UNIVERSIDADE DE SÃO PAULO http://www.biocel.icb.usp.br/ FONOAUDIOLOGIA BMC-114: BIOLOGIA TECIDUAL E DO DESENVOLVIMENTO ROTEIRO DE ESTUDO TEÓRICO-PRÁTICO I 2015
HISTOLOGIA E MICROSCÓPIO Por que estudar Histologia? Histologia (do grego histos, rede ou tecidos; logia, ramo de aprendizado) significa estudo dos tecidos e de como estes tecidos se organizam para constituir órgãos. Por meio da análise das características microscópicas de células e tecidos, os estudos histológicos elucidam a relação entre estrutura e função por um prisma microscópico. Disciplina obrigatória presente nos diferentes cursos da área de saúde, o domínio da linguagem histológica é imprescindível no entendimento das diferentes disciplinas do ciclo básico, tais como, biologia celular, anatomia e fisiologia, assim como na prática clínica. Esta formação inicial permitirá um aprendizado sólido dos conhecimentos do ciclo profissionalizante. O estudo da histologia compreende os quatro tecidos básicos, que são o tecido epitelial, o tecido conjuntivo, o tecido nervoso e o muscular. Os diferentes órgãos e sistemas do corpo humano são formados pelo conjunto destes tecidos. Histologia e microscópio O estudo deste tópico deve possibilitar você a: Noção de microscopia de luz, microscópio eletrônico de transmissão e eletrônica. Conceito de ultraestrutura, ultramicrografia, micrografia. Conceituar basofilia e acidofilia utilizando corante hematoxilina e eosina. Desenhar um corte transversal de uma célula e mostrar quais os seus elementos que podem ser observados em microscopia de luz. Interpretar tridimensionalmente cortes histológicos. Manejo do microscópio de luz
Estudo Dirigido 1. Explique o conceito de basofilia e acidofilia em colorações de cortes histológicos. 2. Que coloração apresentará uma estrutura basófila ou acidófila quando utilizamos a coloração Hematoxilina Eosina (H&E) 3. Marque na tabela abaixo as estruturas que são possíveis de serem observadas nos diferentes microscópios. Estrutura Membrana citoplasmática Mitocôndria Núcleo Nucléolo Retículo endoplasmático Complexo de Golgi Microscópio de luz Microscópio eletrônico de transmissão APOIO DIGITAL: MOL -Módulo 1 CONCEITOS BÁSICOS no endereço eletrônico http://www.icb.usp.br/mol Leitura do livro: Capítulo 1 Junqueira & Carneiro. Histologia Básica. Capítulo 1 Cormack D. H. Fundamentos de Histologia.
Roteiro para utilização do microscópio (Modelo OLYMPUS CH-2) Para a obtenção de melhores resultados ao utilizar o microscópio, você deverá observar rigorosamente os seguintes passos: 1. Antes de ligar o microscópio, colocar o controle de intensidade da iluminação no 1 e posicionar a objetiva de menor aumento (4X). 2. Ligue o microscópio, coloque a lâmina na platina (sempre com a lamínula voltada para cima) gire o parafuso macrométrico até encontrar o foco. Ajuste-o utilizando o parafuso micrométrico. Ajuste a intensidade da iluminação mais adequada. Observe se voce está vendo com os dois olhos a estrutura em foco. Se não estiver, acerte o foco girando a ocular desejada.
3. Utilizando os parafusos do charriot, examine a lâmina e selecione a área que deverá ser observada com maior aumento. A área selecionada deverá estar no centro do campo antes de se passar ao aumento seguinte (10X). Posicione a objetiva e, desse momento em diante, ajuste o foco utilizando-se apenas do parafuso micrométrico. Ajuste sempre a iluminação mais adequada para cada aumento, utilizando-se também do diafragma do condensador. 4. Para passar ao aumento seguinte (40X) proceda exatamente como no ítem anterior. 5. Para focalizar com a objetiva de 100X é necessária a utilização de óleo de imersão. A lâmina deverá estar perfeitamente focalizada na objetiva de 40X e a área a ser observada, colocada no centro do campo. Desloque a objetiva de 40X em direção à de 100X, parando a meio caminho. Coloque uma pequena gota de óleo sobre a área iluminada da lâmina e posicione a objetiva de imersão. Note que a extremidade inferior da lâmina ficará imersa na gota de óleo. Utilizando-se apenas do parafuso micrométrico encontre o foco que deverá estar bem próximo. Caso não consiga, volte para a objetiva de menor aumento, reiniciando todos os passos. 6. Para retirar a objetiva da imersão, gire o revólver posicionando a objetiva de menor aumento (4X). Retire a lâmina, limpe-a, bem como a objetiva de imersão com lenço de papel embebido levemente em xilol. (Cuidado em manusear o xilol que além de ser solvente de plásticos, é inflamável e seus vapores são tóxicos). 7. Ao chamar o professor para confirmação de diagnósticos, aponte a estrutura desejada com a seta. Observe que a seta está situada na ocular direita que pode ser girada em 360 o. 8. Ao terminar a sua prática, desligue o microscópio e limpe-o utilizando lenço de papel. Verifique se a lâmina foi retirada e guardada na caixa e se a objetiva de menor aumento está posicionada e o controle de iluminação no zero. Por último, cubra o microscópio 9. Se precisar segurar ou movimentar o microscópio, faça-o pela estativa, NUNCA pelo tubo ou platina.
TECIDO EPITELIAL DE REVESTIMENTO Os tecidos epiteliais têm como funções principais: (1) revestimento das superfícies (exemplo: epiderme e epitélio do ovário); (2) absorção (exemplo: epitélio do intestino); (3) secreção (exemplo: glândula salivar); e (4) função sensorial (exemplo: neuroepitélio gustativo e olfatório). Os epitélios são constituídos por células justapostas aderidas firmemente umas às outras, com raras exceções não apresentam vasos sanguíneos, são em sua maioria ricamente inervados e formam um tecido de permeabilidade seletiva. As células dos epitélios de revestimento podem apresentar modificações em sua superfície, como os cílios e os microvilos. Os epitélios de revestimento são classificados de acordo com critérios essencialmente morfológicos, tendo em vista o número de camadas constituintes e a forma das células na camada mais superficial. Número de camadas: simples, estratificado e pseudoestratificado. Formato celular: cúbico, colunar, pavimentoso e de transição. Tecido epitelial de revestimento O estudo deste tópico deve lhe dar a possibilidade de: Classificar, distinguir e exemplificar os subtipos de tecido epitelial observados num corte histológico; Entender a estrutura, função dos diferentes tipos de junção celular; Descrever as características (composição) e função da membrana basal; Entender as diferenças entre lâmina basal e membrana basal; Explicar as especializações da superfície das células epiteliais;
AULA PRÁTICA Identifique e classifique os tipos de epitélio; Identifique a região que separa o epitélio do restante do tecido; e Observe a ausência ou presença de queratina na superfície dos epitélios. L 24: Vesícula biliar, coloração HE. L 23 - LV 470: Traquéia e esôfago, coloração HE. L 10 LV 506: Língua, coloração HE.
APOIO DIGITAL: MOL -Módulo 2 EPITÉLIOS DE REVESTIMENTO no endereço eletrônico http://www.icb.usp.br/mol Estudo Dirigido. 1. Descreva as principais características de um tecido epitelial. 2. Quais os critérios de classificação de um tecido epitelial de revestimento? 3. Explique polaridade de uma célula epitelial. 4. Explique a organização de uma membrana basal. 5. Explique a diferença entre membrana basal e lâmina basal. 6. Esquematize um tecido epitelial indicando a localização dos diferentes tipos de junções celulares e junção comunicante. 7. Estude os componentes dos diferentes tipos de junção celular. 8. Estude as características da especialização apical de um tecido epitelial: cílios e microvilosidades. Leitura do Livro: Capítulo 4 Junqueira & Carneiro. Histologia Básica. Capítulo 4 Cormack D. H. Fundamentos de Histologia. Estudar as figura 4.2, 4.3, 4.4, 5.4, 17.1 e 19.1 do atlas do livro Junqueira & Carneiro. Histologia Básica, 10º edição.
TECIDOS CONJUNTIVOS 1. TECIDO CONJUNTIVO PROPRIAMENTE DITO As funções básicas do tecido conjuntivo relacionam-se com: (1) sustentação e preenchimento de espaço entre os órgãos; (2) absorção de choque; (3) defesa - possui células do sistema imunológico envolvidas em processos inflamatórios; e (4) meio pelo quais nutrientes e catabólitos são trocados entre células e seu suprimento sanguíneo. O tecido conjunto apresenta componentes celular e extracelular (matriz extracelular). Em geral, o material que constitui a matriz extracelular (fibras e proteoglicanas) é sintetizado pelas células residentes do tecido conjuntivo. Células do tecido conjuntivo propriamente dito: 1. residentes ou fixas: fibroblasto e fibrócito 2. não residentes ou migratórias: macrófago, leucócitos, plasmócitos, mastócito; Fibras do conjuntivo são de três tipos principais: colágenas, elásticas e reticulares. Proteoglicanas são formadas por agregados de: ácido hialurônico, proteínas e glicosaminoglicanas. Classificação do tecido conjuntivo propriamente dito: 1. frouxo; 2. denso - não modelado modelado Tecido conjuntivo Ao terminar de estudar o tópico tecido conjuntivo você deverá ser capaz de: Classificar o tecido conjuntivo propriamente dito; Descrever os tipos celulares presentes no tecido conjuntivo frouxo; Descrever a composição da substância fundamental; Explicar o mecanismo de síntese do colágeno; e Explicar a importância do colágeno no tecido conjuntivo denso modelado e não modelado.
Aula Prática Na aula prática identifique e classifique os tipos de tecido conjuntivo, identifique o tipo de célula e a orientação das fibras colágenas L 17 LV 517: Pele, coloração HE. Classifique o tecido conjuntivo presente abaixo do epitélio L 8: Intestino grosso, coloração HE. Classifique o tecido conjuntivo presente abaixo do epitélio L 20: Tendão, coloração HE. Observe nesta lâmina L 20 a presença de feixes paralelos de fibras colágenas densamente agrupadas e o formato dos núcleos dos fibrócitos enfileirados.
APOIO DIGITAL: MOL -Módulo 4 TECIDO CONJUNTIVO no endereço eletrônico http://www.icb.usp.br/mol Estudo dirigido 1. Descreva as funções das células presentes no tecido conjuntivo. 2. Classifique e explique a função do tecido conjuntivo propriamente dito. 3. Descreva a composição da Matriz extra-celular. 4. Descreva a composição da substância fundamental. 5. Explique a síntese do colágeno. Leitura do Livro: Capítulo 5 Junqueira & Carneiro. Histologia Básica. Estudar as figura 5.5A, 5.7, 5.8, 5.9 e 7.4 do atlas do livro Junqueira & Carneiro. Histologia Básica, 10º edição. 2. TECIDO ADIPOSO BRANCO E MARROM As principais funções do tecido adiposo branco são: (1) armazenar energia a longo prazo; (2) isolamento térmico; (3) absorção de choque; e (4) proteção de órgãos. Há duas variedades de tecido adiposo, que apresentam distribuição no corpo, estrutura e fisiologia diferentes o (1) tecido adiposo branco, amarelo ou unilocular, com suas funções descritas acima; e o (2) tecido adiposo marrom, pardo ou multilocular que se caracteriza pelo grande conteúdo de mitocôndrias e um grande número de gotículas de lipídios, sua principal função é gerar calor. Tecido adiposo branco e marrom Ao terminar de estudar o tópico tecido adiposo você deverá ser capaz de: Identificar num corte histológico células adiposas (branca) e explicar suas funções; Entender a função do tecido adiposo marrom; Diferenças morfológicas (histologia) entre tecido adiposo branco e marrom.
Aula Prática Na aula de tecido epitelial utilizamos a lâmina L 10 para estudar o epitélio pavimentoso queratinizado. Observe que abaixo da membrana basal o órgão possui o tecido conjuntivo propriamente dito, identifique células adiposas no tecido conjuntivo, observe o núcleo periférico e a ausência de coloração intracelular da gotícula de lipídio - isso ocorre devido à perde do conteúdo lipídio durante o processamento do material. L 10 LV 133: língua, coloração HE. APOIO DIGITAL: MOL -Módulo 5 TECIDO ADIPOSO no endereço eletrônico http://www.icb.usp.br/mol Leitura do livro: Capítulo 6 Junqueira & Carneiro. Histologia Básica. Capítulo 5 Cormack D. H. Fundamentos de Histologia. Estudar as figuras 6.1, 6.2 e 10.2 do atlas do livro Junqueira & Carneiro. Histologia Básica, 10º edição.
3. TECIDO CARTILAGINOSO E ÓSSEO O tecido cartilaginoso (ou cartilagem) é um tecido de sustentação que possui a função de revestir a superfície das cartilagens, absorvendo choques e facilitando o movimento dos ossos. A cartilagem não possuem vasos sanguíneos, sendo nutridas pelos capilares do tecido conjuntivo adjacente. Células do tecido cartilaginoso: condrócito e condroblastos. Entre as células do tecido cartilaginoso hialino observa-se a matriz extracelular: composto de fibras de colágeno tipo II e substância fundamental amorfa. Há três tipos de cartilagem: hialina, elástica e fibrosa. As principais funções do tecido ósseo são: (1) proteger órgãos vitais; (2) reserva de íons cálcio e fosfato; (3) alojar e proteger a medula óssea; e (4) servir de ponto de inserção de músculos estriados esqueléticos, transformando suas contrações em movimentos úteis. Células do tecido ósseo: osteócitos, osteoblastos e osteoclastos. Matriz óssea: formado por fibras de colágeno tipo I, substancia fundamental mineralizada pela deposição de grande quantidade de fosfato de cálcio, ao lado de pequenas quantidades de outros sais. O tecido ósseo origina-se por um processo chamado ossificação intramembranosa, que ocorre pela diferenciação no interior de uma membrana de tecido mesenquimal, ou pelo processo de ossificação endocondral, que tem lugar no interior de uma cartilagem hialina, a qual é substituída gradualmente por tecido ósseo. Na ossificação endocondral a cartilagem representa o papel de um suporte temporário, até que se forme o tecido ósseo em seu lugar. Tecido cartilaginoso e ósseo Após o estudo deste tópico o estudante deve ser capaz de: Apontar os componentes celulares e de matriz extracelular do tecido cartilaginoso e do tecido ósseo. Descrever os componentes de um tecido cartilaginoso Descrever a condrogênese Descrever o crescimento e a renovação do tecido cartilaginoso. Diferenciar a cartilagem hialina, elástica e fibrosa. Entender as diferenças estruturais e funcionais das células presentes no tecido ósseo; Descrever os componentes da matriz óssea e a sua organização no osso compacto; Descrever a unidade morfológica fundamental de um tecido ósseo.
Descrever as duas formas de formação do tecido ósseo; Entender o processo de crescimento de um osso membranoso; Descrever a função e os componentes de uma placa epifisária; Identificar num corte histológico de tecido ósseo e os componentes de um sistema Havers; Aula Prática Examine a olho nu a lâmina L 23 e note uma faixa azula, focalize essa região no microscópio. Como você classificaria esse tecido? No aumento médio identifique o pericôndrio e as células presentes neste tecido. L 23 LV535: Tecido cartilaginoso hialino (traquéia); coloração HE. Na lâmina L 71 identifique os condrócitos, os condroblastos e os grupos isogênicos. L 71 LV202: Cartilagem elástica (orelha), coloração Weigert. A lâmina L 13 possui um corte transversal de fêmur, identifique o sistema Havers, os canais de Havers, os canais e Volkmann, os osteócitos e lamelas. L 13 Osso (diáfise); coloração: Schmorl.
APOIO DIGITAL: MOL -Módulo 6 TECIDO CARTILAGINOSO MOL -Módulo 7 TECIDO ÓSSEO no endereço eletrônico http://www.icb.usp.br/mol Estudo dirigido 1. Identifique os componentes de um tecido cartilaginoso 2. Diferencie os tipos de cartilagem. 3. Explique o crescimento aposicional e isogênico na cartilagem. 4. Explique a condrogênese (atenta para o fato de que condrogênese é diferente de crescimento da cartilagem). 5. Explique a ossificação endocondral e intramembranosa e exemplifique onde cada tipo de tecido ósseo é encontrado no indivíduo adulto. 6. Esquematizar e identificar os componentes de um sistema de Havers, 7. Esquematize os componentes e a organização de uma placa epifisária. 8. Descreva as características funcionais e morfológicas de osteócitos, osteoblastos e osteoclastos. 9. Explique a atuação de um osteoclasto no tecido ósseo. 10. Explicar a função dos canais de Havers e Volkmann. Leitura do livro: Capítulo 7 e 8 Junqueira & Carneiro. Histologia Básica. Capítulo 8 Cormack D. H. Fundamentos de Histologia. Estudar as figuras 7.1, 7.2, 7.3, 8.1, 8.2, 8.4, 8.5 e 8.6 do atlas do livro Junqueira & Carneiro. Histologia Básica, 10º edição.
TECIDO MUSCULAR A principal função do tecido muscular é a produção de movimento. De acordo com suas características funcionais e morfológicas o tecido muscular pode ser dividido em: (1) músculo estriado esquelético com células cilíndricas alongadas, estriações transversais, multinucleadas e com contração voluntária; (2) músculo estriado cardíaco com células alongadas, que se unem por meio dos discos intercalares, com 1-2 núcleos, estriações transversais e possui contração involuntária e (3) músculo liso que apresenta células fusiformes, sem estriações, com um único núcleo e não estão sujeitas a contração voluntária. Tecido muscular Com as informações deste tópico você deverá ser capaz de: Entender a diferença histológica de um músculo liso, cardíaco e esquelético; Identificar num corte histológico o tecido muscular liso, estriado esquelético e cardíaco; Representar esquematicamente um sarcômero em seu estado relaxado e contraído; Resumir as diferenças e as semelhanças morfológicas e funcionais dos três tipos de tecido muscular; Explicar o mecanismo molecular da contração muscular do músculo esquelético estriado e liso; e Esquematizar uma placa motora detalhando seus principais componentes Aula Prática L 10 LV 133: Tecido muscular estriado esquelético (língua); coloração HE A região central da lâmina L 10 (língua) é composta predominantemente por tecido muscular esquelético. Nesta preparação é possível observar fibras musculares estriadas esqueléticas seccionadas transversalmente, longitudinalmente e obliquamente. Num conjunto de fibras seccionadas transversalmente observe os núcleos periféricos, a célula alongada com citoplasma acidófilo. Note que entre conjuntos de fibras é possível observar algumas células adiposas.
L 7 LV 197: Tecido muscular liso (intestino delgado), coloração HE Observe na lâmina L 7 (intestino delgado) uma região basófila e outra acidófila. Focalize a região acidófila, que corresponde à túnica muscular do intestino delgado. A camada mais superficial é formada por células musculares lisas seccionadas longitudinalmente, e a mais interna por células seccionadas transversalmente ou obliquamente. Focalize a camada superficial e observe que as células musculares lisas apresentam formato alongado e fusiforme e possuem um único núcleo central com cromatina finamente granular. L 67 LV 132: Tecido muscular cardíaco, coloração: H. fosfotúngstica. Na lâmina L 67 e no LV132 observe a disposição das células cardíacas, note a presença de discos intercalares entre as células e o núcleo central.
APOIO DIGITAL: MOL -Módulo 8 TECIDO MUSCULAR no endereço eletrônico http://www.icb.usp.br/mol Estudo dirigido 1. Explique o mecanismo molecular da contração muscular no músculo esquelético estriado e liso. 2. Esquematize um sarcômero em seu estado relaxado e contraído. 3. Explique a importância dos túbulos transversos na despolarização de membrana durante a contração muscular. 4. Conceituar placa motora e unidade motora. 5. Explique a função dos discos intercalares no músculo estriado cardíaco. Leitura de livro: Capítulo 10 Junqueira & Carneiro. Histologia Básica. Capítulo 10 Cormack D. H. Fundamentos de Histologia. Capítulo 7 - Kierszenbaum A. L. Histologia e Biologia Celular. Estudar as figuras 10.1, 10.2, 10.3, 10.4, 10.5, 11.2 e 11.3 do atlas do livro Junqueira & Carneiro. Histologia Básica, 10º edição.
TECIDO NERVOSO O sistema nervoso tem com função (1) detectar, transmitir, analisar e utilizar as informações geradas pelos estímulos sensoriais representados por calor, luz, energia mecânica e modificações químicas do ambiente externo e interno e; (2) organizar, coordenar, direta ou indiretamente, o funcionamento de quase todas as funções do organismo, entre as quais as funções motoras, viscerais, endócrinas e cognitivas. Os dois componentes celulares do sistema nervoso central são os neurônios e as células da glia ou neuroglia. Os neurônios possuem morfologia complexa, porém quase todos apresentam três componentes: Corpo celular ou pericário é a parte do neurônio que contém o núcleo e o citoplasma envolvendo o núcleo. É o centro trófico do neurônio e tem a função de receber e integrar estímulos. Dendritos são prolongamentos numerosos, especializados na função de receber os estímulos do meio ambiente, de células epiteliais sensoriais ou de outros neurônios. Axônio é um prolongamento único, especializado na condução de impulsos que transmitem informações do neurônio para outras células (nervosas, musculares, glandulares). Além dos neurônios o tecido nervoso possui um conjunto de células de sustentação, denominadas células da glia ou neuroglia. As células da neuroglia se dividem em quatro tipos no SNC: 1.oligodendrócitos, 2. astrócitos, 3. microglia e 4. células ependimárias. Todas as células da neuroglia, exceto as células ependimárias, possuem delicados processos citoplasmáticos, visíveis em condições especiais de coloração, tais como em cortes adequadamente impregnados com prata ou ouro (preparação de Golgi). Tecido nervoso Após o estudo deste você deve ser capaz de: Reconhecer neurônios em cortes histológicos; Esquematizar um neurônio; Distinguir substância cinzenta e substância branca e descrever sua composição; Descrever as características morfológicas e funcionais das células da glia; Descrever o aspecto histológico de nervos e gânglios do sistema nervoso periférico; Discutir a origem da bainha de mielina e sua importância no potencial de ação; e Resumir as diferenças entre axônios e dendritos.
Aula Prática Identificar e diferenciar substância cinzenta e branca; Identificar e classificar o tecido conjuntivo presente neste tecido, e Localizar e diferenciar as células presentes no tecido nervoso. L 11 LV 503: Medula espinhal, coloração HE Identifique substância branca e cinzenta L 5 LV279: Feixe vásculo-nervoso, coloração HE Localize o feixe váculo-nervoso e classifique o tecido conjuntivo adjacente. L56 LV374: Cérebro, coloração pelo método de Golgi (impregnação por prata) Observe os dendritos e axônios com coloração mais escura (preto)
APOIO DIGITAL: MOL -Módulo 9 TECIDO NERVOSO no endereço eletrônico http://www.icb.usp.br/mol Estudocomplementar: 1. Esquematize um neurônio e seus componentes celulares. 2. Conceitue sinapse química. 3. Explique o potencial de ação e descreva a importância da bainha de mielina. 4. Descreva morfologicamente e funcionalmente as células da glia. 5. Na figura abaixo identifique: 1. Substância Cinzenta 2. Substância Branca 3. Face dorsal 4. Face ventral 5. Canal do epêndima 6. Emergência das fibras motoras (raiz ventral) 7. Fibras nervosas sensitivas que chegam pela raiz dorsal Sugestões de leitura: Capítulo 9 Junqueira & Carneiro. Histologia Básica. Capítulo 9 Cormack D. H. Fundamentos de Histologia. Estudar as figuras 9.1, 9.2, 9.3, 9.4, 9.5, 9.6, 9.7, 9.8, 9.9 do atlas do livro Junqueira & Carneiro. Histologia Básica, 10º edição.