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1 145 EFICIÊNCIA DE ZEBMAX NA INIBIÇÃO DE GERMINAÇÃO DE ESPOROS DE FERRUGEM ASIÁTICA DA SOJA Jeferson Carlos Carvalho¹, Odair José Kuhn², Guilherme Borghetti Calixto 3, Taís Regina Kohler 4, Camila Da Cunha Unfried 4, Adrieli Luisa Ritt 4, Eloisa Lorenzetti 1, Dablieny Hellen Garcia Souza 3 (1) Discente de Doutorando em Produção Vegetal, linha de pesquisa Fitossanidade e Controle Alternativo, Universidade Estadual do Oeste do Paraná Unioeste, Campus Marechal Cândido Rondon. jefersoncarvalho@outlook.pt; eloisa-lorenzetti@hotmail.com. (2) Docente da Universidade Estadual do Oeste do Paraná Unioeste, Campus Marechal Cândido Rondon. E- mail: ojkuhn@gmail.com. (3) Discente de Doutorando em Produção Vegetal, linha de pesquisa Fitossanidade e Controle Alternativo, Universidade Estadual do Oeste do Paraná Unioeste, Campus Marechal Cândido Rondon. calixto_gui@outlook.com; dabligarcia@hotmail.com. (4) Discente de Agronomia da Universidade Estadual do Oeste do Paraná Unioeste, Campus Marechal Cândido Rondon. tais.kohler@hotmail.com; camila.unfried@hotmail.com; adrieliritt@hotmail.com. Autor para correspondência: Jeferson Carlos Carvalho (jefersoncarvalho@outlook.pt). RESUMO: A soja é a cultura com maior produção e área semeada no Brasil, no entanto a ferrugem asiática da soja (Phakopsora pachyrhizi) reduz drasticamente a produtividade, possui altos custos de controle, além de apresentar resistência a alguns fungicidas, havendo necessidade de se buscar novos métodos de controle, o produto ZebMax, por possuir ação direta sobre a germinação de esporos e sobre a planta pode ser utilizado com este intuito. O objetivo foi avaliar a eficiência do ZebMax na inibição da germinação de esporos de Phakopsora pachyrhizi. O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado, com seis tratamentos: ZebMax, Epoxiconazol + Fluxapiroxade + Piraclostrobina, Trifloxistrobina + Protioconazole, Manconzebe, Carbendazim + Cresoximmetílico + Tebuconazol e a Testemunha (água), cada um com quatro repetições. Foi aplicado 100 µl da suspenção de esporos (1 x 10 5 esporos ml -1 ) e de cada produto em placas de Petri contendo meio ágar-água, acondicionadas em BOD a 25 C no escuro por 24 horas, após foi acrescentado corante azul de algodão e realizado a contagem aleatória de 100 esporos com o auxílio de microscópio óptico, contabilizando o número de esporos germinados e não germinados. Os resultados foram submetidos analise de variância e comparados pelo teste de Tukey (5%). Os resultados indicam que os produtos ZebMax, Piraclostrobina + Epoxiconazol + Fluxapiroxade e Trifloxistrobina apresentaram 100%, 100% e 97% dos esporos não germinados e inibição de 100%, 100% e 94,74% de inibição da germinação, respectivamente. Conclui-se que o ZebMax possui alta eficiência inibindo da germinação de esporos de Phakopsora pachyrhizi. PALAVRAS-CHAVE: Glycine max, Phakopsora pachyrhizi, Adubo foliar, Controle de doenças. ZEBMAX EFFICIENCY IN THE INHIBITION OF GERMINATION OF ASIAN SOYBEAN RUST SPORES ABSTRACT: Soy is the crop with the highest production and area sown in Brazil. However, Asian soybean rust (Phakopsora pachyrhizi) drastically reduces productivity, has high control costs, and is resistant to some fungicides. There is a need to seek new control methods. Since ZebMax has a direct action on spore germination and on the plant, the product can be used for this purpose. The objective was to evaluate the efficiency of ZebMax to inhibit the spore germination of Phakopsora pachyrhizi. The experiment was conducted in a completely randomized design with six treatments: ZebMax, Epoxiconazole + Fluxapyroxad + Pyraclostrobin, Trifloxystrobin + Prothioconazole, Manconzeb, Carbendazim + Kresoxim-
2 146 methyl + Tebuconazole and control (water), each with four repetitions. 100 μl of the spore suspension (1 x 10 5 spores ml -1 ) and of each product were applied in Petri dishes containing agar-water medium, conditioned in BOD at 25 C in the dark for 24 hours. After that, methyl blue dye was added and 100 spores were counted randomly with the aid of an optical microscope, counting the number of germinated and non-germinated spores. The results were submitted to analysis of variance and compared by the Tukey's test (5%). The results indicate that the products ZebMax, Pyraclostrobin + Epoxiconazole + Fluxapyroxad, and Trifloxystrobin presented 100%, 100% and 97% of non-germinated spores, and inhibition of 100%, 100% and 94.74% inhibition of germination, respectively. We concluded that ZebMax has high efficiency to inhibit the spore germination of Phakopsora pachyrhizi. KEY WORDS: Glycine max, Phakopsora pachyrhizi, Foliar fertilizer, Disease control. INTRODUÇÃO A soja (Glycine max) é a principal cultura semeada e produzida no Brasil, na safra 2017/2018 a produção chegou a 229,7 milhões de kg, em uma área de 61,58 milhões de ha, com uma produtividade média de 3730 kg ha -1 (Conab, 2018). No entanto a um dos principais problemas recorrentes na cultura é a ocorrência de doenças, com capacidade de reduzir a produtividade, na qual a ferrugem asiática da soja é a principal doença da cultura, causada pelo fungo Phakopsora pachyrhizi (Godoy, et al., 2016), que pode reduzir até 90% da produtividade da cultura (Hartman et al., 2015). Os sintomas característicos são inicialmente pontuações de coloração escura, na face inferior da folha, formando pústulas normalmente de formato angular, com 2-5 mm de diâmetro, coloração castanha com intensa esporulação. Em condições de alta severidade as folhas amarelecem e caem precocemente, influenciando na produtividade da cultura (Godoy, et al., 2016). O método de controle utilizado se dá pelo vazio sanitário na entressafra, semeadura de cultivares precoces, semeadura no início da época recomendada, monitoramento do aparecimento de esporos do patógeno, cultivares resistentes e aplicação de fungicidas (Tecnologias, 2013; Godoy, et al., 2016). Porém vem se observando problemas dom resistência do patógeno, dificultando o controle, elevando os custos com controle e perdendo princípios ativos por conta da sua ineficiência, Godoy, et al., (2017) observaram baixa eficiência dos fungicidas a base de tebuconazol, ciproconazol e azoxistrobina. Outros atores já observaram a resistência da ferrugem asiática da soja sobre fungicidas inibidores da desmetilação, inibidores da quinona externa e inibidores da succinato desidrogenase (Schmitz et al., 2014; Klosowski et al., 2016; Frac, 2017). O que acaba
3 147 dificultado a ação de controle do patógenos, aumentando a importância de se utilizar mais métodos ou produtos para o controle da ferrugem asiática da soja. Visando auxiliar o controle de ferrugem asiática da soja, pode se utilizar o adubo foliar e indutor de resistência ZebMax, é um porduto a base de fosforo, enxofre, cobre e manganês, estes minerais podem atuar diretamente no microrganismo, inibindo sua germinação, ou sobre a planta, induzindo resistência e até acelerando o seu ciclo (Williams; Cooper, 2004; Zambolim, 2006), além de servir como suplementação de adubação para cultura. Diante do exposto o objetivo da presente pesquisa foi avaliar a eficiência do produto ZebMax na inibição da germinação de esporos de Phakopsora pachyrhizi. MATERIAL E MÉTODOS O experimento foi realizado nos Laboratórios de Fitopatologia da Universidade Estadual do Oeste do Paraná (Unioeste), Campus de Marechal Cândido Rondon, estado do Paraná, durante o mês de Abril de O inoculo foi obtido de plantas com os sintomas característicos de ferrugem, estas foram levadas ao laboratório e com o auxílio de um pincel foi realizado pincelagem das pústulas para liberação dos esporos e obtenção da suspenção de esporos. O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado, com seis tratamentos, sendo eles o ZebMax (0,5 L ha -1 ); Epoxiconazol + Fluxapiroxade + Piraclostrobina (1,0 L ha -1 ), Trifloxistrobina 150 g/l + Protioconazole 175 g/l (0,4 L ha -1 ), Manconzebe (3,0 kg ha -1 ), Carbendazim 200 g/l + Cresoxim-metílico 125 g/l + Tebuconazol 100 g/l (1,5 L ha -1 ) e a Testemunha (água), cada um com quatro repetições cada. Para realizar o experimento, foi utilizado placas de petri com 60 mm de diâmetro, contendo meio de cultura ágar-agua, na qual foi pipetado 100 µl da suspenção de esporos ajustado em câmara de Neubauer na concentração de 1 x 10 5 esporos ml -1 e 100 µl de cada produto, as placas foram acondicionadas em BOD a 25 C no escuro pelo período de 24 horas. Após foi acrescentado corante azul de algodão para paralisar a germinação dos esporos e realizado a contagem aleatória dos 100 primeiros esporos encontrados na placa de petri, com o auxílio de microscópio óptico, contabilizando o número de esporos germinados e não germinados. Os resultados obtidos foram submetidos analise de variância (ANOVA) e os tratamentos comparados entre si pelo teste de Tukey (5%), com auxílio do Software Sisvar 5.6. RESULTADOS E DISCUSSÃO
4 148 Com os resultados obtidos é possível observar que os produtos ZebMax, Piraclostrobina + Epoxiconazol + Fluxapiroxade e Trifloxistrobina 150 g/l apresentaram os melhores resultados, não apresentando esporos de Phakopsora pachyrhizi germinados (Figura 1). Figura 1 - Resultados de esporos de Phakopsora pachyrhizi não germinados (A) e germinados (B) sob o tratamento com produtos químicos. Médias seguidas pela mesma letra não diferem entre si (p>0,05).
5 149 Santos e Mio (2007) utilizando os fungicidas à base de tebuconazole apresentou a germinação inferior a 2%, azoxistrobina com tebuconazole entre 5 e 10% e o mancozebe mais de 10%, semelhante ao que foi observado para o presente experimento em que o mancozebe apresentou 10% de esporos germinados e outros dois fungicidas apresentaram germinação de 3% ou nenhum esporo germinado, o que evidencia a eficiência do ZebMax na inibição da germinação de esporos de Phakopsora pachyrhizi. O produto ZebMax provoca reações químicas na célula do fungo, resultando no agrupapamento de aminoácidos sulfífricos e enzimas, como consequência ocorre o acúmulo de K + nas células (Zambolim et al., 1995). Devido a este mecanismo ele inibe a germinação do esporo. Observando os resultados obtidos com o ZebMax, não apresentou esporos germinados, outro produto semelhante é o mancozebe, que apresentou 10% dos esporos germinados, demonstrando a eficiência do produto, outro ponto importante é de com a inviabilização total dos esporos, não permitindo a infecção e reprodução do patógeno, ocorre a quebra do seu ciclo, evitando a ocorrência de epidemiologia e redução de produtividade da cultura (Bergamin Filho, et al., 2018) O ZebMax, Piraclostrobina + Epoxiconazol + Fluxapiroxade e Trifloxistrobina 150 g/l inibiram 100 %, 100% e 94,74% da germinação de esporos de Phakopsora pachyrhizi respectivamente (Figura 2).
6 150 Figura 2 - Resultados de inibição da germinação de esporos de Phakopsora pachyrhizi sob o tratamento com produtos químicos. Médias seguidas pela mesma letra não diferem entre si (p>0,05). Quando se compara o ZebMax e o Piraclostrobina + Epoxiconazol + Fluxapiroxade com os demais produtos (Trifloxistrobina 150 g/l, Manconzebe e Carbendazim 200 g/l; Cresoxim-metílico 125 g/l; Tebuconazol 100 g/l), se observa diferença de 5,26%, 17,67 e 29,40% respectivamente, sendo que o ZebMax apresentou melhores resultados comparado a outros fungicidas e o produto Mancozebe que é um produto da mesma categoria. Esse resultado possui grande importância, pois visando o controle de ferrugem asiática da soja, se observa que vários produtos apresentam resistência por parte do patógeno, dificultando o controle, elevando os custos com controle e perdendo princípios ativos por conta da sua ineficiência (Godoy, et al., 2017). A composição do ZebMax é de fosforo, que pode acelerar o ciclo da cultura, reduzindo o período de infecção para o fungo, além de atuar como indutor de resistência (Zambolim, 2006). O enxofre apresenta fungitoxidade, com potencial de inibição de germinação, segundo Williams e Cooper (2004) o enxofre é absorvido pelo esporo do fungo e afeta a respiração mitocondrial. O cobre pode atuar como indutor de resistência, induzindo a biossintese de lignina na parede celular, induz a produção de peróxidos e apresenta fungitoxico ao esposo. O
7 151 manganês atua como indutor de resistência na planta através da produção de compostos tóxicos ao patógeno, biossíntese de lignina, além de ser fungitoxico ao patógeno (Zambolim, 2006). Devido a isso como se pode observar o produto além de adubo foliar pode auxiliar no manejo de ferrugem da soja como protetor, inibindo a germinação do esporo e também como indutor de resistência, aumentando a sua eficiência e dificultando a resistência do patógeno ao princípio ativo. CONCLUSÃO O produto ZebMax possui alta eficiência inibindo da germinação de esporos de Phakopsora pachyrhizi. REFERÊNCIAS BERGAMIN FILHO, A.; AMORIM, L.; WILLOCQUET, L.; SAVARY, S. Epidemiologia de Doenças de Plantas. In: AMORIM, L.; REZENDE, J.A.M.; BERGAMIN FILHO, A. (Ed.). Manual de Fitopatologia Volume I: Princípios e Conceitos. Agronomica Ceres, Ouro Fino: Agronomica Ceres, p CONAB Companhia Nacional de Abastecimento. Acompanhamento da safra brasileira de grãos. v.5. n.9, p.174, FRAC INTERNACIONAL. SDHI Working Group. Informação sobre carboxamidas em ferrugem da soja. FRAC, p. (Informativo, 01/2017). Disponível em: 5b1d3_060a b693f acff2. pdf. Acesso em: 18 jun GODOY, C.V., ALMEIDA, A.M.R.; COSTAMILAN, L.M.; MEYER, M.C.; DIAS, W.P.; SEIXAS, C.D.S.; SOARES, R.M.; FENNING, A.A.; YORINORI, J.T.; FERREIRA, L.P.; SILVA, J.F.V. Doenças da Soja. In: AMORIM, L.; REZENDE, J. A. M.; BERGAMIN FILHO, A. CAMARGO, L.E.A. (Ed.). Manual de Fitopatologia Volume II: Doenças das Plantas Ciltivadas. Ouro Fino: Agronomica Ceres, p GODOY, C.V.; UTIAMADA, C.M.; MEYER, M.C.; CAMPOS, H.D.; LOPES, I.O.N.; FORCELINI, C.A. Eficiência de fungicidas para o controle da ferrugem-asiática da soja, Phakopsora pachyrhizi, na safra 2016/17: resultados sumarizados dos ensaios cooperativos. Circular técnica 129. EMBRAPA, Lomdrina PR, p. HARTMAN, G.L.; SIKORA, E.J.; RUPE, J.C. Rust. In: HARTMAN, G.L.; RUPE, J.C.; SIKORA, E.J.; DOMIER, L.L.; DAVIS, J.A.; STEFFEY, K.L. (Ed.). Compendium of soybean diseases and pests. Saint Paul: APS Press, p KLOSOWSKI, A.C.; MAY DE MIO, L.L.; MIESSNER, S.; RODRIGUES, R.; STAMMLER, G. Detection of the F129L mutation in the cytochrome b gene in Phakopsora pachyrhizi. Pest Management Science,, v.72, n.6 p , 2016.
8 152 SCHMITZ, H.K.; MEDEIROS, A.C.; CRAIG, I.R.; STAMMLER, G. Sensitivity of Phakopsora pachyrhizi towards quinone-outside-inhibitors and demethylation-inhibitors, and corresponding resistance mechanisms. Pest Management Science, v.3, n.70, p , TECNOLOGIAS de produção de soja Região Central do Brasil Sistema de produção, 16. Londrina: Embrapa Soja, p. WILLIAMS, J.S.; COOPER, R.M. The oldest fungicide and newest phytoalexin a reappraisal of the fungitoxicity of elemental sulphur. Plant Pathology, v.53, n.3, p , ZAMBOLIM, L. Controle integrado de doenças de plantas. Associação Brasileira de Educação Agrícola Superior ABEAS, Viçosa, MG: UFV, p. ZAMBOLlM, L.; VALE, F. X. R. do; CHAVES, G.M. Controle químico de doenças de plantas. Brasília: ABEAS, p.
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