AULA PRÁTICA 11: SANGUE E HEMATOPOIESE O sangue é um tecido conectivo especializado constituído por diferentes tipos celulares em suspensão em um meio líquido denominado de plasma. Funciona primordialmente como veículo para transportar para todo o organismo: gases, nutrientes, produtos de refugo do metabolismo celular, células e hormônios. Em consequência, qualquer amostra de sangue é constituída não apenas por células e moléculas envolvidas nos processos de transporte, mas também por esses elementos que estão sendo transportados. O plasma é essencialmente constituído por uma solução aquosa de sais inorgânicos em constante troca com o líquido extracelular ou intersticial dos tecidos do organismo. Existem também as proteínas plasmáticas cujos três tipos principais são: albumina, globulinas e fibrinogênio. De modo geral, os componentes moleculares do plasma não podem ser demonstrados à microscopia de luz ou eletrônica. As células do sangue são classificadas em três classes funcionais: glóbulos vermelhos (eritrócitos ou hemácias), glóbulos brancos (leucócitos elementos defensivos) e plaquetas (trombócitos elementos coagulantes). Os eritrócitos estão primordialmente envolvidos no transporte do oxigênio e do dióxido de carbono; os leucócitos constituem uma importante parcela dos sistemas de defesa e de imunidade do organismo, e as plaquetas são um componente vital do processo de coagulação do sangue. Todos esses tipos celulares são originados na medula óssea por um processo denominado hemocitopoiese (hemopoiese/hematopoiese). Eritrócitos e plaquetas exercem as suas funções inteiramente dentro dos vasos sanguíneos, ao passo que os leucócitos atuam principalmente fora desses vasos, nos tecidos. Assim, os leucócitos encontrados no sangue circulante estão meramente transitando entre os vários locais onde possam exercer as suas atividades.
Como utilizar a objetiva de imersão: 1. Ajuste o foco utilizando as objetivas 4X, 10X e 40X. 2. Gire o revólver, posicionando entre as objetivas de 40X e 100X. Coloque uma gota de óleo de imersão sobre a lâmina. Toque a gota com a objetiva de 100X (imersão), olhando diretamente e com muita cautela. Ajuste o foco utilizando APENAS o parafuso MICROMÉTRICO. 3. Após o estudo, retire a lâmina após girar o revólver posicionando a objetiva de 4X. CUIDADO para não girar o revólver para a objetiva de 40X. 4. Após a utilização, limpe a objetiva de imersão (100X) com um lenço de papel. 5. Não limpe a lâmina se a mesma não tiver lamínula. Apenas deixe escorrer o óleo. LÂMINA Nº 32 - SANGUE DE AVE Observe se existe lamínula para proteger o esfregaço sanguíneo. Caso afirmativo, coloque esta lâmina com a lamínula para cima antes de começar o seu estudo microscópico. Caso não exista lamínula, não limpe sua lâmina após o uso, pois você vai destruí-la. Focalize as células sanguíneas com o pequeno aumento (4X) e mude progressivamente as objetivas até chegar à de grande aumento (40X). Se for necessário, coloque a objetiva de imersão (100X). Aqui você deverá identificar as hemácias ou eritrócitos. Utilizando o seu atlas como referência, tente identificar também as plaquetas (nucleadas nas aves) e alguns linfócitos.
LÂMINA Nº 31 - SANGUE PERIFÉRICO Observe esta lâmina em pequeno aumento (4X). Mude sucessivamente os aumentos até a objetiva de grande aumento (40X). Se for necessário, coloque a objetiva de imersão (100X). Lembre-se que depois de examinar uma lâmina com a objetiva de 100X, você não deve limpar o óleo de imersão se a sua lâmina não tiver lamínula. Você deve tentar aqui identificar: 1 - Eritrócitos (hemácias) - células em forma de disco bicôncavo, anucleadas (mamíferos), com citoplasma mais corado na periferia e menos corada na região central (de cor rósea ou cinza, conforme o corante empregado em sua lâmina). 2 - Plaquetas (trombócitos) - pequenas células anucleadas (nas aves são nucleadas), originadas na medula óssea por fragmentação do citoplasma de megacariócitos. São extremamente menores do que as hemácias e neste esfregaço sanguíneo, o seu formato esférico ou ovóide não é bem observado, pois, estas células estão muito agrupadas. O seu citoplasma pode estar corado em róseo ou cinza, de acordo com o corante empregado em sua lâmina. 3 - Leucócitos (granulócitos) - células brancas sanguíneas caracterizadas pelos proeminentes grânulos citoplasmáticos e um único núcleo multilobulado, dando a falsa impressão de serem células multi ou polinucleares. Os grânulos são ditos: grânulos primários (azurófilos) e grânulos secundários (específicos). De acordo com as afinidades tintoriais dos grânulos específicos (ou secundários), os granulócitos são subdivididos em três tipos: neutrófilos, eosinófilos e basófilos. 3a. Neutrófilos - citoplasma granulações delicadas, com pouca afinidade tanto pelos corantes ácidos como pelos básicos. Contém um núcleo com 2 a 5 lóbulos, medindo 12 m de diâmetro e são 45% a 75% dos leucócitos.
3b. Eosinófilos - 9 m de diâmetro. Contém no citoplasma granulações ovóides acidófilas proeminentes. Mostram um núcleo bilobulado e são de 1% a 6% do total dos leucócitos. 3c. Basófilos - 12 m de diâmetro. São menos de 1% dos leucócitos. Mostram núcleo lobulado em forma de S, com granulações citoplasmáticas basofílicas volumosas que dificultam a observação do núcleo. 4 - Leucócitos (agranulócitos) - Também fazem parte das células brancas do sangue, mas, apresentam citoplasma sem grânulos facilmente visíveis à microscopia de luz. O núcleo dos agranulócitos não é lobulado, mas pode ser identado. Este aspecto do núcleo gerou a denominação errônea de leucócitos mononucleares. Estão subdivididos em linfócitos e monócitos. 4a. Linfócitos - 20% a 45% dos leucócitos, medindo de 9 a 12 m de diâmetro, com núcleo esférico e hipercromático. O citoplasma é escasso (pouco visualizado à M.L.). 4b. Monócitos - 2% a 10% dos leucócitos, medindo de 9 a 12 m de diâmetro, com citoplasma basófilo, sem grânulos evidentes. Núcleo em forma de rim ou ferradura e de localização excêntrica. HEMATOPOIESE Hematopoiese (hemocitopoiese / hemopoiese) é o processo pelo qual as células sanguíneas se desenvolvem a partir de células precursoras. No homem adulto ocorrem na medula óssea de determinados ossos, principalmente os da abóbada craniana, costelas, esterno, coluna vertebral, pelves e epífise de alguns ossos longos. Antes da vida adulta, todavia, a hematopoiese ocorre em outros locais e em diferentes estágios do desenvolvimento. Na fase embrionária inicial as células sanguíneas primitivas surgem no saco vitelino. Um pouco mais tarde o fígado torna-se o principal foco da hematopoiese e, durante o desenvolvimento subsequente, o baço e os linfonodos suplementam essa atividade. À medida que os ossos se desenvolvem durante o quarto e quinto meses de vida intra-uterina, a hematopoiese se inicia nas cavidades dos
mesmos. No nascimento, os locais dessa atividade restringem-se exclusivamente à medula óssea. A partir do nascimento até a maturidade, o número de focos de hematopoiese na medula diminui muito, embora a medula retenha esta potencialidade hematopoiética. LÂMINA Nº 65 - MEDULA ÓSSEA - HE Nesta lâmina, com a objetiva de 40X ou de imersão, TENTE identificar entre as trabéculas ósseas: megacariócitos, células da série granulocítica, células reticulares, células endoteliais, células adiposas, osteócitos, osteoclastos (osteoclastócitos) e osteoblastos.