Biologia Celular. Organitos (continuação)

Transcrição

1 Biologia Celular Organitos (continuação)

2 Tráfico intracelular de vesículas

3 Vias de tráfego biossintético, endocítico e retentivos

4 A utilização de mutantes, anticorpos específicos para marcadores de compartimentos intracelulares e proteínas fluorescentes (GFP) permitiram um grande avanço na compreensão do tráfego intracelular

5 A utilização de mutantes, anticorpos específicos para marcadores de compartimentos intracelulares e proteínas fluorescentes (GFP) permitiram um grande avanço na compreensão do tráfego intracelular

6 A utilização de mutantes, anticorpos específicos para marcadores de compartimentos intracelulares e proteínas fluorescentes (GFP) permitiram um grande avanço na compreensão do tráfego intracelular

7 Tráfico intracelular é conseguido através da formação e fusão de vesículas entre compartimentos dadores e receptores?

8 Tipos de vesículas (conforme o seu revestimento) Vesículas revestidas a clatrina, COPI ou COPII

9 O revestimento das vesículas define qual a via de tráfego em que participam

10 A formação das vesículas revestidas é mediada pela a montagem do seu revestimento

11 A dinamina estimula o processo de separação entre o compartimento dador e a vesícula de transporte

12 A especifidade do transporte parece ser definido por reconhecimento de v-snares por t-snares

13 As SNAREs são separadas por NSF + ATP

14 Vírus utilizam estratégias semelhantes para entrarem na célula hospedeira

15 Vias retentivas utilizam sinais de triagem (KDEL, KKXX)

16 Transporte entre o Ap. Golgi e os lisossomas

17 Organitos Ribossomas Retículo endoplasmático Aparelho / Complexo de Golgi / Dictiossomas Lisossomas, Endossomas, e outras vesículas Vacúolos Mitocôndrios Cloroplastos Microcorpos (peroxissomas / glioxissomas) Citosqueleto Núcleo, nucleólo e centríolos

18 Lisossomas Ricos em enzimas hidrolíticas (digestivas) Morfologicamente heterogéneos

19 Lisossomas primários e secundários

20 Lisossomas primários e secundários

21 Funções dos lisossomas Ciechanover, A. (2005) Cell Death Differ. 12:

22 Os lisossomas têm tipicamente um ph acídico mantido por uma bomba de H +

23 Reconhecimento e transporte de hidrolases lisossomais

24 Organitos Ribossomas Retículo endoplasmático Aparelho / Complexo de Golgi / Dictiossomas Lisossomas, Endossomas, e outras vesículas Vacúolos Mitocôndrios Cloroplastos Microcorpos (peroxissomas / glioxissomas) Citosqueleto Núcleo, nucleólo e centríolos

25 Vacúolos

26 As funções do vacúolos em plantas e fungos são semelhantes às dos lisossomas em células animais contêm enzimas hidrolíticas ph acídico mantido por bombas de H + participam na endocitose, exocitose e processos digestivos contribuem para o controlo do ph intracelular participam no crescimento celular contribuem para o controlo do turgor celular armazenam toxinas, pigmentos e outras moléculas e detritos celulares

27 Organitos Ribossomas Retículo endoplasmático Aparelho / Complexo de Golgi / Dictiossomas Lisossomas, Endossomas, e outras vesículas Vacúolos Mitocôndrios Cloroplastos Microcorpos (peroxissomas / glioxissomas) Citosqueleto Núcleo, nucleólo e centríolos

28 Os mitocôndrios são organitos com elevado dinamismo

29 Os mitocôndrios co-localizam-se frequentemente com os microtúbulos Mitocôndrios corados com rodamina 123 Microtúbulos evidenciados por anticorpos associados a um fluorocromo

30 Os mitocôndrios possuem duas membranas e dois compartimentos que podem ser separados por processos de extracção

31 Organitos Ribossomas Retículo endoplasmático Aparelho / Complexo de Golgi / Dictiossomas Lisossomas, Endossomas, e outras vesículas Vacúolos Mitocôndrios Cloroplastos Microcorpos (peroxissomas / glioxissomas) Citosqueleto Núcleo, nucleólo e centríolos

32 Os cloroplastos assemelham-se estruturalmente aos mitocôndrios, possuindo um compartimento adicional

33 Mitocôndrio vs. Cloroplasto

34 Mitocôndrio vs. Cloroplasto Estrutura e Função Produção de ATP Membrana externa Membrana interna Compartimento interior Compartimento intramembranar DNA, RNA, ribossomas Tilacóides, Grana Mitocôndrio Respiração Sim, Permeável (ricas em canais) Sim, Pouco Permeável, com cristas (ricas em transportadores) Matriz Sim Sim Não Cloroplasto Fotossíntese Sim, Permeável (ricas em canais) Sim, Pouco Permeável, sem cristas (ricas em transportadores) Estroma Sim Sim Sim

35 Mitocôndrio vs. Cloroplasto Estrutura e Função Enzimas metabólicas Cadeia transportadora de electrões Pigmentos fotossintéticos ATP sintetase Orientação da ATP sintetase Mitocôndrio Sim, essencialmente na matriz Sim (cristas, membrana interna) Não Sim (cristas, membrana interna) Cabeça virada para a matriz Cloroplasto Sim, essencialmente no estroma Sim (tilacóides) Sim (tilacóides) Sim (tilacóides) Cabeça virada para o estroma

36 Mitocôndrio vs. Cloroplasto

37 Bibliografia Alberts et al. (2002) Molecular Biology of the Cell. Lodish et al. (2000) Molecular Cellular Biology. [ + referências dadas ao longo da aula Palavras chave recomendadas para pesquisa em inglês: coated vesicles, clathrin, COPI, COPII, dynamin, SNARE, KDEL, lysosome, vacuole, mitochondrion, chloroplast