Biotecnologia Geral TRANSCRIÇÃO E TRADUÇÃO

Transcrição

1 Biotecnologia Geral TRANSCRIÇÃO E TRADUÇÃO

2 DNA Replicação DNA Trasncrição Reversa Transcrição RNA Tradução Proteína

3 Transcrição É o processo pelo qual uma molécula de RNA é sintetizada a partir da informação contida na sequência de nucleotídeos de uma molécula de DNA de fita dupla

4 Transcrição É o processo pelo qual uma molécula de RNA é sintetizada a partir de um gene

5 DOGMA

6 Célula Eucariótica

7 Célula Procariótica

8 PROCARIOTO X EUCARIOTO

9 RNA -Fita Simples; -A,U,C,G; - Ribose

10 FASES DA TRANSCRIÇÃO INÍCIO quando ocorre reconhecimento de seqüência específica no DNA; ALONGAMENTO quando os ribonucleotídeos são sucessivamente incorporados; TERMINAÇÃO quando seqüências no DNA são reconhecidas e a síntese é interrompida.

11 RNA POLIMERASE α Fator σ (sigma) α β β α β Core α Haloenzima

12 RNA POLIMERASE

13 Fator sigma

14 Estrutura de um Gene DNA Promotor Região Codificadora Terminador Ribossomo RNA PROTEÍNA

15 ESTRUTURA DE UM GENE DE EUCARIOTO DNA Promotor Região Codificadora Sítio de PoliA hnrna Intron RNA mrna AAAAAAAAAA Exon AAAAAAAAAA

16 Região 10: T A T A A T Região 35: T T G A C A As duas regiões são separadas por 17±1 nucleotídeos CARACTERISTICAS DE UM PROMOTOR DE E. coli TTGACA...TATAATATCGATTTAGATCCCATGAT O primeiro nucleotídeo (+1) é geralmente uma purina (A ou G)

17 PROMOTORES DE GENES BACTERIANOS

18 -10 9 nucleotídeos

19 TRANSCRIÇÃO

20 FUNÇÕES DA RNA POLIMERASE Reconhecer o promotor; Desnaturar o DNA expondo a seqüência a ser copiada; Manter as fitas de DNA separadas na região da síntese; Manter o híbrido DNA:RNA estável; Renaturar o DNA na região imediatamente posterior à síntese; Terminar a síntese do RNA.

21 TRANSCRIÇÃO

22 TRANSCRIÇÃO

23 TÉRMINO DA TRANSCRIÇÃO Independente da proteína rho (ρ) (90% dos casos) Dependente da proteína rho (ρ) 5 CCCAGCCCGCCTAAGCGGGCTTTTTTTTGAC 3 3 GGGTCGGGCGGATTCGCCCGAAAAAAACTG 5 Pareamento A-U

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25 DNA fita codificadora DNA fita molde RNA transcrito Animação replicação/transcrição

26 Código Genético e Sintese de Proteínas

27 CÓDIGO GENÉTICO É a relação entre a seqüência de bases no DNA e a seqüência de aminoácidos na proteína

28 CÓDIGO GENÉTICO UUU Phe UCU Ser UAU Tyr UGU Cys UUC Phe UCC Ser UAC Tyr UGC Cys UUA Leu UCA Ser UAA stop UGA stop UUG Leu UCG Ser UAG stop UGG Trp CUU Leu CCU Pro CAU His CGU Arg CUC Leu CCC Pro CAC His CGC Arg CUA Leu CCA Pro CAA Gln CGA Arg CUG Leu CCG Pro CAG Gln CGG Arg AUU Ile ACU Thr AAU Asn AGU Ser AUC Ile ACC Thr AAC Asn AGC Ser AUA Ile ACA Thr AAA Lys AGA Arg AUG Met ACG Thr AAG Lys AGG Arg GUU Val GCU Ala GAU Asp GGU Gly GUC Val GCC Ala GAC Asp GGC Gly GUA Val GCA Ala GAA Glu GGA Gly GUG Val GCG Ala GAG Glu GGG Gly

29 CÓDIGO GENÉTICO Características Pareamento códon:anticódon; Degeneração um mesmo aminoácido pode ser codificado por vários códons diferentes; Não ambigüidade cada códon corresponde a somente um aminoácido; Universalidade o código genético é o mesmo nos mais diversos organismos (exceção: protozoários ciliados e mitocondiras); Utilização preferencial de códons (codon usage).

30 CÓDIGO GENÉTICO

31 TRADUÇÃO Consiste na transformação da mensagem contida no mrna, via trna, na sequência de aminoácidos que constituem a proteína. Intervenientes: mrna trna Ribossomos (rrna) Aminoácidos Sistemas enzimáticos

32 ESTRUTURA DOS RIBOSSOMOS Procariotos Subunidade 30S (rrna 16S, 21 proteínas) Subunidade 50S (rrna 23S e 5S, 31 proteínas) Total 70S Eucariotos Subunidade 40S (rrna 18S) Subunidade 60S (rrna 28S, 5,8S e 5S) Total 80S

33 Ribossomos ESTRUTURA DOS RIBOSSOMOS

34 trna -Estrutura secundária com grampos e alças formando um trevo -Alto número de bases modificadas depois da sua transcrição

35 trna

36 trna

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38 Existem 61 códons e 40 trnas. Como é resolvida a questão dos 21 códons restantes?

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40 Trasncrição Tradução

41 Etapas da tradução A síntese protéica ocorre em 3 etapas sucessivas: 1. Iniciação 2. Alongamento 3. Finalização

42 RIBOSSOMAS Sítio de ligação do ribossomo e códon de iniciação 5...AGGAGGxxxxxxxAUG...3 RBS ou Seqüência Shine-Dalgarno Códon de iniciação (raramente GUG ou UUG)

43 Início da tradução

44 AminoaciltRNAsintetase Aminoacil- trna Met-tRNA

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46 INICIAÇÃO

47 INICIAÇÃO

48 ALONGAMENTO Tradução

49 ALONGAMENTO Tradução

50 TERMINAÇÃO

51 Antibióticos e Síntese Proteica Substância produzida por um organismo ou obtida sinteticamente que, em soluções diluídas, destrói as bactérias e outros microrganismos ou inibe o seu desenvolvimento.

52 Antibióticos e Síntese Proteica Antibiótico Células-alvo Efeito Estreptomicina Tetraciclina Cloranfenicol Eritromicina Puromicina Cicloheximida Procariótica Procariótica Procariótica Procariótica Procariótica e Eucariótica Eucariótica - Inibe a iniciação - Provoca erro na leitura do mrna - Inibe a ligação do aminoaciltrna ao sítio A do ribossoma - Inibe a actividade da peptidil transferase - Liga-se à subunidade 50S do ribossoma e inibe a translocação - Provoca a terminação prematura da cadeia, actuando como um análogo do aminoaciltrna - Inibe a actividade da peptidil transferase

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