EFEITOS DO G-CSF RECOMBINANTE EM MODELO EXPERIMENTAL DE ISQUEMIA/REPERFUSÃO RENAL

Transcrição

1 EFEITOS DO G-CSF RECOMBINANTE EM MODELO EXPERIMENTAL DE ISQUEMIA/REPERFUSÃO RENAL Guimaraes, M. C. C., Araujo, I. B. B. A., Rodrigues, V. C., Nogueira, B. V., Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia - UFES Introdução: A lesão por isquemia/reperfusão (IR) é a principal causa de insuficiência renal após transplante. A oclusão temporária da artéria renal provoca lesões similares aos casos de falência renal aguda encontrados na prática clínica. O fator estimulador de colônias de granulócitos (G-CSF) tem se mostrado como agente protetor em modelos de IR, porém a literatura é controversa. Objetivos: Objetivou-se definir uma dose segura do G-CSF recombinante e avaliar seus efeitos sobre a função renal em modelo animal de IR. Métodos: Protocolo CEUA/UFES # 050/2013 No presente estudo foram utilizados ratos Wistar adultos jovens, machos, pesando entre g. Realizou-se uma curva dose-resposta para estabelecer uma dose segura de G-CSF sem prejuízo da função renal nas concentrações de 10, 50, 100 e 250 µg/kg/dia por 5 dias. Para o estudo de isquemia/reperfusão os animais foram distribuídos nos grupos: SHAM (controle, sem clampeamento, com nefrectomia unilateral) que receberam solução glicosada 5% (veículo), IR (isquemia/reperfusão sem tratamento, nefrectomia unilateral) e IR-GCSF (isquemia/reperfusão associado com G-CSF 100 µg/kg por 3 dias). A isquemia foi obtida por meio do clampeamento da artéria renal por 40 minutos, seguida de reperfusão. Os animais foram alocados em gaiolas metabólicas para análise dos parâmetros de função renal e posteriormente sacrificados com sobredose de anestésico para coleta de sangue e órgãos de interesse. Os resultados obtidos foram normalizados e foi utilizada ANOVA-1 via seguida do post hoc de Fischer, os valores estão apresentados como média ± EPM e considerados significantes quando p<0,05. Resultados: Ao final do tratamento o total de leucócitos dos animais foi de células/dl (SHAM), células/dl (IR) e células/dl (IR-GSCF) (p>0,05; Grupos SHAM e IR vs IR-GCSF; n=10). Os valores de creatinina plasmática foram de 0,34±0,02; 0,43±0,03 e 0,33±0,02 mg/dl para os animais dos grupos SHAM, IR e IR-GSCF, respectivamente (p<0,05; IR vs IR-GCSF;

2 n=10). A área de deposição percentual de colágeno na região medular foi de 16%±3, 33%±1 e 20±1% (p<0,01; IR vs IR-GCSF) para os grupos SHAM, IR e IR-GSCF respectivamente. Houve ainda menor quantidade de células em apoptose e menor concentração de produtos avançados de oxidação de proteínas nos animais tratados quando comparado ao grupo IR. Conclusão: Esses resultados demonstram o efeito protetor do G-CSF contra a lesão renal em modelo experimental de isquemia/reperfusão. Apoio Financeiro: Esses resultados demonstram o efeito protetor do G-CSF contra a lesão renal em modelo experimental de isquemia/reperfusão. Gerado em: :20:20

3 AVALIAÇÃO DOS EFEITOS DA NATAÇÃO SOBRE AS ALTERAÇÕES RENAIS RESULTANTES DA DIABETES. 1Silva, A.L.L., 1Pinheiro, G.O., 1Bezerra, T.L., 1Souza, K.S., 1Santos, A.C.V., 1Ting, E., 1Fioretto, E.T., 1Aires, M.B., 1Departamento de Morfologia, Universidade Federal de Sergipe, São Cristóvão/SE. Silva, A. L. L., Aires, M. B., Departamento de Morfologia - UFS Introdução: A Diabetes mellitus é uma doença caracterizada por distúrbios no metabolismo de carboidratos, lipídios e proteínas causados por insuficiência completa ou relativa da secreção de insulina e/ou da ação da insulina. O sedentarismo, a obesidade, e a adoção de estilo de vida pouco saudável estão associados ao desenvolvimento de diabetes, por isso o interesse pela atividade física como complemento no tratamento dessa doença. Objetivos: O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da natação sobre as alterações renais resultantes da diabetes. Métodos: CEPA 86/2011 Os experimentos foram aprovados pelo protocolo CEPA 86/2011. Foram utilizadas 10 ratas Wistar, com idade de 2 meses, pesando entre 150g e 200g, para indução de diabetes por meio da aplicação de aloxana (37 mg/kg/iv). Após 24 horas da indução foi verificada a glicemia e consideradas diabéticas as ratas com glicemia 200mg/dL. As ratas diabéticas foram divididas nos grupos treinado (TRE) e sedentário (SED). As ratas diabéticas do grupo treinado foram submetidas à sessões diárias de natação durante 30 minutos, em balde de plástico (52cm x 43cm x 40cm; comprimento x largura x profundidade), com água à temperatura de 30±2oC, 5 dias por semana, durante 5 semanas com carga de 1% do peso corporal. Todas as ratas passaram por uma semana de adaptação na qual foram colocadas no tanque com água durante 30 minutos. Após 6 semanas, as fêmeas de ambos os grupos, foram anestesiadas e laparotomizadas para a coleta de sangue e rins. Os rins foram removidos, pesados e fixados para processamento histológico. Foi realizada análise bioquímica dos níveis séricos de colesterol e triglicerídeo. A análise estatística foi realizada por meio de Análise de Variância seguido pelo teste de Tukey para as diferenças de peso e glicemia e pelo teste T para diferenças no peso dos rins entre os grupos.

4 Resultados: Houve redução da glicemia dos animais do grupo treinado (135,0 ± 4,6 mg/dl, p < 0,05) em relação ao sedentário (369,7 ± 86,86 mg/dl), no entanto, não houve diferença no peso corporal (TRE: 213,5 ± 17,6 g vs SED: 195,0 ± 14,75 g) e no peso renal (SED: rim direito 1,16 ± 0,06 g, rim esquerdo 1,02 ± 0,02 g vs TRE: rim direito 0,99 ± 0,11 g, rim esquerdo 0,98 ± 0,12 g). Na análise histológica, observou-se maior congestão dos capilares, acentuada acidofilia citoplasmática e maior presença de vacúolos nos túbulos renais. No grupo TRE, houve redução da congestão dos capilares e dos vacúolos nos túbulos renais. Conclusão: A natação pode auxiliar na redução da glicemia e parece interferir na ocorrência das alterações histológicas renais resultantes da diabetes. Apoio Financeiro: Gerado em: :20:20

5 EFEITOS A CURTO PRAZO DA DESNUTRIÇÃO PROTEICA PERINATAL SOBRE A FUNÇÃO RENAL NA PROLE DE RATOS MACHOS Constantino, T. S., Oliveira,. J. M. D., de Brito Alves, J. L., Barro, M. A. V., Nogueira, V. O., Chaves,C. C., Costa-Silva, J. H., Nucleo e Educação Física e Ciencias do Esporte - UFPE Departamento de Fisiologia e Farmacologia - UFPE Introdução: Desnutrição proteica durante a gestação e lactação (período perinatal) induz alterações morfofuncionais no sistema renal e predispõe o desenvolvimento de hipertensão arterial na vida adulta da prole. No entanto, pouco se sabe acerca dos efeitos da desnutrição proteica perinatal sobre a função renal na prole de ratos jovens. Objetivos: Investigar os efeitos da desnutrição proteica perinatal sobre os aspectos funcionais renais na prole de ratos jovens. Métodos: / Foram utilizados ratos Wistar machos provenientes de mães que receberam dieta normoprotéica (grupo NP, 17% de proteína) ouhipoproteica (grupo HP, 8% de proteína) durante a gestação e lactação. Aos 30 dias, grupo NP (n=4) e HP (n=14) foram mantidos em jejum e com livre acesso à água em gaiolas metabólicas individuais (GMI) por 24 horas. Após esse período, foi investigado a ingestão de água e volume urinário. O volume urinário de 24h foi utilizado para determinação de ureia, creatinina, proteínas totais, eletrólitos (Na, e K), densidade, ph e o clearance de creatinina. Além disso, os animais foram anestesiados com ketamina (80 mg/kg) e xilazina (10 mg/kg) e amostras de sangue (aproximadamente 1 ml) foram coletadas pelo rompimento do plexo retro-orbital para determinação de ureia e creatinina. Os resultados estão expressos como média±erro padrão da média. Foi utilizado o teste T-student e p<0.05 para diferença estatística. Os protocolos experimentais foram previamente aprovados. Resultados: Aos 30 dias, grupo HP exibiu consumo médio de água(np:0.66±0.34vs HP:0.90±0.18mL/10g, P=0.549), volume urinário (NP: 0.26± 0.05 vs. HP:0.29±0.04ul/min/10g,P=0.68) e densidade urinária (NP: 1.03±0.01 vs. HP: 1.031± ugp=0.89) semelhantes ao grupo NP. Além disso, ratos HP

6 exibiram concentrações urinárias de creatinina (NP: 1.16 ±0.39 vs. HP: 1.14±0.26 mg/ul, P=0.97), ureia (NP: ± vs HP: ± mg/ul, P= 0.72)e proteínas totais (NP: 0.32±0.03 vs. HP: 0.65±0.09mg/ul,P=0.06)semelhantes aos ratos NP. Em adição, a excreção urinária de creatinina (NP: 0.26±0.10 vs. HP: 0.31±0.08mg/ul, P=0.75), ureia (NP: ±80.36 vs. HP: ±120.84mg/ul/min, P=0,48), proteínas totais (NP: 0.37±0.21 vs. HP: 0.16±0.02mg/ul/min,P=0.08), Na (NP: ± vs. HP: ± mEq/ul/min,P=0.50), K (NP: ± vs. HP: ± mEq/ul/min, P=0,21) e o clearance de creatinina (NP: 0.68±0.23 vs. HP: 0.69±0.19 mg/ul/min,p=0.97) também foram semelhantes entre os grupos NP e HP. Em contrapartida, ratos HP exibiram um aumento nas concentrações séricas de ureia (NP: ± 5.9 vs. HP: 74.74±7.04 mg/ul, P= 0.04) quando comparado ao grupo NP, mas semelhantes valores de creatinina(np: 0.45 ± 0.05 vs. HP: 0.52± 0.03mg/ul, P=0.27). Conclusão: Nossos resultados sugerem que função renal de ratos submetidos à desnutrição proteica durante a gestação e lactação não é alterada a curto-prazo. Apoio Financeiro: FACEPE e CNPq. Gerado em: :20:20