C O L O R I M E T R I A

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1 C O L O R I M E T R I A

2 FUNDAMENTOS DA COLORIMETRIA Coleta da amostra Preparação da amostra Procedimento de teste O teste Amostra na cubeta Reagentes adicionados Período de espera Branco da amostra Leitura no instrumento Prova de precisão

3 FUNDAMENTOS DA COLORIMETRIA Colorimetria é a medição da intensidade de luz transmitida por uma solução. Esta medição é então utilizada para a determinação quantitativa de uma substância dissolvida em uma solução. A substância deve ser colorida (absorver luz) ou convertida em um composto colorido.

4 COLETA DA AMOSTRA Amostragem Preservação Preparação Filtração Distilação Digestão Diluição

5 PROCEDIMENTO DE TESTE De onde a resposta veio? Procedimento de teste O teste Amostra na Cubeta Reagentes adicionados Período de espera Branco da amostra Leitura no instrumento?

6 MANUSEIO DA CUBETA A cubeta se torna parte do sistema óptico e não deve alterar o raio de luz que passa através dela. Espelho Luz Prisma Foto detector Cubeta Abertura móvel Espelhos parabólicos

7 MANUSEIO DA CUBETA Quando utilizar cubetas siga estas regras: Limpe adequadamente, usando ácido ou reagente colorimétrico. Use um papel que não solte fiapos para remover gotas de líquidos, impressões digitais, ou poeira antes de inserir a cubeta no suporte. Posicione-a a no instrumento sempre da mesma maneira. Certifique que o nível da amostra é alto o suficiente de modo que todo o raio de luz passe através da amostra. Usar cubetas casadas para brancos e amostras. Verifique a existência de riscos ou imperfeições na superfícies ópticas.

8 FUNDAMENTOS DA COLORIMETRIA Coleta da amostra Preparação da amostra Procedimento de teste O teste Amostra na cubeta Reagentes Reagentes adicionados Período de espera Branco da amostra Leitura do instrumento Prova de precisão

9 REAGENTES/QUÍMICA O que acontece quando reagentes ou produtos químicos são adicionados?? Reagentes + Amostra Complexo colorido

10 REAGENTES/QUÍMICA Tampões (buffers( buffers) Indicadores para cor Agentes Redutores/Oxidantes

11 REAGENTES PRÉ PREPARADOS Vantagens Conveniência Confiança Exemplos Dose unitária Soluções pré-preparadas preparadas

12 REAGENTES/QUÍMICA Padrões Ampolas Soluções 1.0 mg/l Ferro Informações no Final do Procedimento

13 FATORES PARA O DESENV. DE COR ph Estabilidade com respeito ao tempo Força iônica Estabilidade na atmosfera Temperatura Estado de oxidação do elemento Quantidade de reagente adicionado Natureza dos íons presentes Especificidade do reagente

14 INTERFERÊNCIAS Outras substâncias que podem estar presentes na amostra desconhecida e causar erros no resultado são classificadas como interferentes. O controle destes efeitos pode ser obtido com o uso de agentes inibidores que reagem com a substância interferente.

15 INTERFERÊNCIAS Se o controle não é efetivo, pode ser necessária a separação preliminar do analisado da amostra complexa ou destruição do complexo pode ser necessária. Diversas técnicas estão disponíveis, incluindo extração, destilação, absorção em resina de troca de íons, precipitação, e digestão.

16 FUNDAMENTOS DA COLORIMETRIA Coleta da amostra Preparação da amostra Procedimento de teste O teste Amostra na cubeta Reagentes Adicionados espera Período de espera Branco da amostra Leitura do instrumento Prova de precisão

17 PERÍODO DE ESPERA Tempo necessário para os tampões, indicadores, e agentes redutores/oxidantes agirem e formarem os complexos coloridos.

18 FUNDAMENTOS DA COLORIMETRIA Coleta da amostra Preparação da amostra Procedimento de teste O teste Amostra na cubeta Reagentes Adicionados Período de espera Branco Branco da amostra Leitura do instrumento Prova de precisão

19 BRANCO DA AMOSTRA Branco da amostra VS Branco do reagente

20 BRANCO DA AMOSTRA Um branco de amostra é a amostra sem adição de reagentes para a formação de cor. Um branco de reagente é água DI tratada com os mesmos reagentes utilizados na amostra. Idealmente, há uma produção desprezível de cor pelos reagentes na ausência da substância/elemento analisado.

21 FUNDAMENTOS DA COLORIMETRIA Coleta da amostra Preparação da amostra Procedimento de teste O teste Amostra na cubeta Reagentes Adicionados Período de espera Branco da amostra Leitura Leitura do instrumento Prova de precisão

22 INSTRUMENTAÇÃO PARA COLORIMETRIA Comparadores visuais Colorímetros Espectrofotômetros

23 ESPECTROFOTÔMETROS Um espectrofotômetro é um instrumento que contém componentes que fazem o seguinte: geram energia luminosa selecionam um comprimento de onda de luz específico passa o raio de luz através da amostra mede a mudança na intensidade da luz na passagem pela amostra mostra a intensidade do sinal em um display

24 LÂMPADA MONOCROMADOR OU FILTRO LENTES AMOSTRA DETECTOR

25 ABSORBÂNCIA INTERSECÇÃO CONCENTRAÇÃO CALIBRAÇÃO DE MELHOR ENCAIXE

26 RADIAÇÃO ELETROMAGNÉTICA (RE) Luz visível ( nm) Ultravioleta (< 400 nm) Infravermelho (> 700 nm)

27 OU COMPRIMENTO DE ONDA

28 COMPRIMENTOS DE ONDA MENORES COMPRIMENTOS DE ONDA MAIORES

29 ABSORBÂNCIA Comprimento de onda (nm) SELEÇÃO DO MELHOR COMPRIMENTO DE ONDA

30 Luz branca Vermelho Violeta REFRAÇÃO DA LUZ

31 INSTRUMENTAÇÃO PARA COLORIMETRIA Colorímetros Filtros Espectrofotômetros Monocromador

32 Espelho Luz Prisma Foto detector Cubeta Abertur a móvel Espelhos parabólicos SISTEMA ÓPTICO TÍPICO A PRISMA

33 FUNDAMENTOS DA ESPECTROFOTÔMETRIA Métodos de análise espectrofotométricos são métodos de comparação invariáveis. A amostra é compara com um padrão do mesmo analisado sob condições idênticas de química e luz.

34 FUNDAMENTOS DA COLORIMETRIA Coleta da amostra Preparação da amostra Procedimento de teste O teste Amostra na cubeta Reagentes Adicionados Período de espera Branco da amostra Leitura do instrumento Prova de precisão Prova de

35 CURVAS DE CALIBRAÇÃO É feita através da preparação de soluções padrão do analisado a ser determinado e medição da absorbância destas soluções sob condições idênticas as da amostra. A curva de calibração é um gráfico de absorbância em um comprimento de onda fixo em função da concentração.

36 ABSORBÂNCIA VS CONCENTRAÇÃO ABS CONCENTRAÇÃO

37 PADRÕES Padrões são indispensáveis para verificação e garantia da precisão em todos os passos associados com a análise.

38 PADRÕES: PROVA DE PRECISÃO Soluções padrão É necessário que a amostra e os padrões sejam preparados sob condições químicas idênticas. Adições de padrão É a técnica conhecida como adição de padrões ou spiking,, na qual um padrão é adicionado à amostra, é útil para revelar interferências ou outra fonte de erros na determinação.

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