UNIVERSIDADE FEDERAL DO ESPÍRITO SANTO CENTRO DE ENSINO DEPARTAMENTO CCENS BIOLOGIA. Plano de Ensino. Teoria Exercício Laboratório 0 3

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1 Plano de Ensino Universidade Federal do Espírito Santo Campus: Alegre Curso: Ciências Biológicas Bacharelado Departamento Responsável: Biologia Data de Aprovação (Art. nº 91): Docente responsável: AdrianaMadeira Álvares da Silva Qualificação/link para o Currículo Lattes: Disciplina: Laboratório de Biotecnologia Pré-requisito: Biologia Molecular Código: DBi05204 Carga Horária Semestral: 60 Distribuição da Carga Horária Semestral Créditos: Teoria Exercício Laboratório 0 3 EMENTA Cuidados no laboratório de Biologia Molecular. Isolamento de DNA Plasmidal. Eletroforese de DNA em géis de agarose. Extração de DNA de material vegetal e animal. Amplificação de fragmentos de DNA. Clonagem do produto de amplificação específica. Análises dos transformantes. Extração de RNA de células vegetais e animais. Hibridação de DNA em membranas. Hibridação de RNA em membranas. Sequenciamento de DNA. OBJETIVOS A disciplina visa proporcionar aos alunos o conhecimento sobre a organização e o funcionamento de um laboratório de Biotecnologia, bem como o aprendizado teóricoprático sobre as principais técnicas moleculares utilizadas na área animal, vegetal e de microrganismos. Dessa forma, espera-se que os alunos possam desenvolver a capacidade de utilizar uma abordagem molecular na solução de problemas relacionados a sua área de atuação.

2 Conteúdo Programático O conteúdo programático inclui habilidades para trabalho com DNA, desde a extração até a avaliação dos resultados, extração de RNA, preparo de soluções, treinamento para uso dos equipamentos do laboratório, noções de segurança no laboratório, rotina laboratorial e relacionamento interpessoal e desenvolvimento de habilidades de manejo de grupos em empresas que utilizam laboratório na produção. Metodologia (explicitar a forma de desenvolvimento da disciplina, os recursos utilizados) Aulas práticas na qual o aluno será envolvido com a problemática laboratorial, aulas na plataforma moodle com atividades de reforço e exercícios de fixação.

3 Critérios/Processo de avaliação da Aprendizagem A avaliação será realizada através dos relatórios de aulas práticos (30%), atividades no Moodle (30%) e avaliações que serão realizadas dentro da plataforma Moodle (40%). Estão previstas duas avaliações, 15 relatórios práticos e 15 atividades semanais do Moodle. Bibliografia básica BÁSICA: -BARKER, K. Na Bancada - Manual de Iniciação Cientifica em laboratórios de pesquisas biomédicas. 1ª edição. Porto Alegre: Artmed Editora, ZAHA, A. Biologia Molecular Básica. 3ª edição. Porto Alegre: Mercado Aberto, ALBERTS, B.; JOHNSON, A.; LEWIS, J.; RAFF, M.; ROBERTS, K.; WALTER, P. Biologia molecular da célula. 4. ed. (tradução). Porto Alegre: Artmed Editora, p. -MALACINSKI, G.M. Fundamentos da Biologia Molecular. 4ª edição. Guanabara Koogan, 2005.

4 Bibliografia complementar (indicar um mínimo de cinco obras disponíveis na biblioteca e que deem conta de complementar e oferecer oportunidades de aprofundamento de todo o conteúdo programático a ser desenvolvido) COMPLEMENTAR: -MARQUES, E.K. Diagnóstico Genético-Molecular. 1ª edição. Ulbra, MICKLOS. D.A.; FREVER, G.A.; CROTTY, D.A. A Ciência do DNA.2ª edição. Artmed Editora, BROWN, T.A. Clonagem gênica e Análise do DNA. Uma introdução. 4ª edição. Artmed Editora, SAMBROOK, J.; FRITSCH, E.F.; MANIATIS, T Molecular Cloning. A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory. New York, 2 ed. -WATSON, J.D.; GILMAN, M.; WITKOWSKI, J. & ZOLLER, M. O DNA Recombinante. 2 a Preto, UFOP (1997). Tradução coordenada por Élio Hideo Babá. ed., Ouro

5 Cronograma 1. Apresentação de um laboratório de Biotecnologia 1.1. Normas de Funcionamento do Laboratório 1.2. Organização e limpeza do laboratório 1.3. Uso de equipamentos/vidrarias 2. Revisão de conceitos de unidades de medidas 3. Planejamento experimental 3.1. Preparo de soluções estoque e de materiais 4. Extração de DNA vegetal 4.1. Preparo de soluções de uso 4.2. Análise de DNA vegetal por eletroforese 5. Extração de DNA bacteriano 5.1. Preparo de soluções de uso Análise de DNA de bactérias por eletroforese 6. Extração de DNA de insetos 6.1. Preparo de soluções de uso 6.2. Análise de DNA de insetos por eletroforese 7. Extração de DNA de fungo 7.1. Preparo de soluções de uso 7.2. Análise de DNA de fungo por eletroforese 8. Extração de DNA humano 8.1. Preparo de soluções de uso 8.2. Análise da integridade e quantificação DNA por eletroforese 9. Extração de RNA humano 9.1. Preparo de soluções de uso e reação por Kit 9.2. Análise por nanodrop e por eletroforese 10. Reação de bissulfito para análise de metilação 7.1. Preparo de soluções de uso e uso de kit 7.2. Análise por eletroforese 11. Reação de PCR Estudo de polimorfismos Análise por eletroforese 12. Atividades semanais EAD na plataforma moodle 13. Atividades práticas de convívio, autoconhecimento e relacionamento interpessoal