Ocorrência de anticorpos IgG anti- Neospora caninum em vacas leiteiras no estado de Pernambuco, Brasil

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1 Ciência Veterinária nos Trópicos, Recife-PE, v. 17, n. 1/2 p janeiro/agosto, 2014 Ocorrência de anticorpos IgG anti- Neospora caninum em vacas leiteiras no estado de Pernambuco, Brasil José Givanildo da SILVA 1, Neurisvan Ramos GUERRA 2, Renata Pimentel Bandeira de MELO1, Pedro Paulo Feitosa de ALBUQUERQUE 1, Leucio Câmara ALVES 2, Rinaldo Aparecido MOTA 1. RESUMO 1 Laboratório de Doenças Infectocontagiosas dos Animais Domésticos; Departamento de Medicina Veterinária; Universidade Federal Rural de Pernambuco. 2 Laboratório de Doenças Parasitárias dos Animais Domésticos; Departamento de Medicina Veterinária; Universidade Federal Rural de Pernambuco. rinaldo.mota@hotmail.com; givanildojgs@gmail.com A Neosporose é uma enfermidade causada pelo Neospora caninum, considerada uma importante causa de aborto, responsável por sérios prejuízos econômicos e sanitários em criações de bovinos. Neste estudo foi realizada a pesquisa de anticorpos IgG anti-neospora caninum em vacas leiteiras. Foram obtidas amostras de soro sanguíneo de 533 vacas provenientes de 13 municípios no Estado de Pernambuco. Para a pesquisa de anticorpos foi empregada a técnica de Imunofluorescência Indireta (RIFI). Na RIFI foi possível determinar uma positividade de 6,4% (34/533). Os resultados obtidos demostram a presença da infecção por Neospora caninum em diferentes regiões do Estado de Pernambuco. PALAVRAS-CHAVE Protozoário, Bovinos leiteiros, RIFI. Occurrence of anti-neospora caninum IgG antibodies in dairy cows in the state of Pernambuco, Brazil ABSTRACT Neosporosis is a disease caused by Neospora caninum, considered a major cause of abortion, responsible for major economic losses and sanitary problems in cattle creations. This study was performed to search for anti-neospora caninum IgG antibodies in dairy cows. Blood serum samples were obtained from 533 cows from 13 municipalities in the state of Pernambuco. For the detection of antibodies was used the immunofluorescent antibody test (IFAT). IFAT was possible to determine a positivity of 6.4% (34/533). The results demonstrate the presence of infection by Neospora caninum in different regions of the state of Pernambuco. KEYWORDS Protozoa, dairy cattle, IFAT INTRODUÇÃO A Neosporose é uma enfermidade parasitária de distribuição mundial causada por Neospora caninum, um protozoário coccídio intracelular (DUBEY & LINDSAY, 1996). Seu envolvimento em casos de abortos já foi relatada em diversos países como Argentina (MOO- RE et al., 2009), Brasil (ANDREOTTI et al., 2009; MARQUES et al., 2011), China (WANG et al., 2010), Espanha (EIRAS et al., 2011), Estados Unidos (HOAR et al., 2007), Grécia (SO- TIRAKI et al., 2008), Inglaterra (WOODBINE et al., 2008), México (SEGURA-CORREA et al., 2010; ROMERO-SALAS et al., 2010) e Peru (PURAY et al., 2006). Clinicamente caracteriza-se por causar problemas reprodutivos, sendo considerada uma importante causa de aborto e morte neonatal em bovinos (DUBEY & SCHARES, 2011). O Cão (Canis lupus familiaris), coiote (Canis latrans), dingo (Canis lupus dingo) e lobo cinza (Canis lupus) atuam como hospedeiros definitivos, enquanto que bovinos, búfalos, ovinos, caprinos e aves são alguns dos hospedeiros intermediários naturais comprovados (DUBEY et al., 2007). Devido a sua alta prevalência em algumas 30

2 Ocorrência de anticorpos IgG anti- Neospora caninum em vacas leiteiras no estado de Pernambuco, Brasil espécies domésticas e selvagens, é uma doença de considerável preocupação mundial por suas significativas perdas econômicas e reprodutivas que resultam em impactos na produção (LARSON et al., 2004). Os prejuízos econômicos estão atribuídos à perda fetal, redução da eficiência reprodutiva, redução no valor do rebanho, diminuição na produção leiteira e no teor de gordura do leite (THURMOND & HIETALA, 1997; BARTELS et al., 2006; TIWARI et al., 2007; REICHEL et al., 2013). Considerando a carência de informações sobre a ocorrência deste protozoário em vacas leiteiras no estado de Pernambuco, objetivou-se neste estudo pesquisar a ocorrência de anticorpos IgG anti-neospora em municípios desta região do Brasil. MATERIAL E MÉTODOS ANIMAIS E LOCAIS DE COLETA Foram analisadas 533 amostras de soro sanguíneo de vacas de aptidão leiteira, a partir do banco de soros gentilmente cedido pelo Laboratório Nacional Agropecuário em Pernambuco (LANAGRO/MAPA). Essas amostras eram provenientes de rebanhos localizados em 13 municípios, sendo sete localizados na Região Metropolitana do Recife, cinco na Zona da Mata e um no Agreste do Estado de Pernambuco (Figura 1). Os animais eram mestiços, com faixa etária média de 5,56 anos e de 3,16 parições e as propriedades não apresentavam histórico de aborto (tabela 1). A amostragem deste estudo foi do tipo não probabilística por conveniência (SAMPAIO, 1998). EXAME SOROLÓGICO No laboratório, as amostras foram submetidas à Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI) para a pesquisa de anticorpos IgG anti-n. caninum, realizada de acordo com metodologia descrita por Dubey (1988), utilizando anticorpos anti IgG bovine (Sigma ) conjugado ao isotiocianato de fluoresceína e ponto de corte 200. Como antígenos para sensibilização das lâminas foram utilizados taquizoítos da cepa NC1 de N. caninum mantidos em cultivo de células Marc-145 e soros controles padrão positivo e negativo. Figura 1: Distribuição espacial dos municípios estudados Ciênc. vet. tróp., Recife-PE, v. 17, no 1/2, p janeiro/agosto,

3 José Givanildo da Silva et al. Tabela 1 - Procedência das amostras coletadas, médias das faixas etárias e dos números de parições das vacas leiteiras provenientes do Estado de Pernambuco, Brasil. Município Média da faixa etária Média do número de parições Abreu e Lima 5,58 3,29 Água Preta 9,29 6,07 Barreiros 5,69 3,93 Cabo de Santo Agostinho 5,66 3,39 Glória de Goitá 5,03 2,87 Igarassú 3,93 2,06 Itamaracá 3,92 2,00 Jaboatão dos Guararapes 4,83 2,76 Moreno 4,14 2,22 Palmares 6,71 2,33 Passira 6,05 3,10 São Lourenço da Mata 6,08 3,80 Vitória de Santo Antão 5,43 3,36 Média geral 5,56 3,16 Tabela 2 - Frequência absoluta e relativa das amostras positivas para a detecção de anticorpos IgG anti-neospora caninum em bovinos do Estado de Pernambuco, de acordo com a idade. Idade (meses) FA* FR (%)** /34 2, /34 26, /34 70,59 Total *FA= Frequência Absoluta; **FR= Frequência Relativa RESULTADOS Na RIFI, 6,4% (34/533) das amostras apresentaram anticorpos IgG anti-n. caninum. Do total de amostras positivas, 97,06% (33/34) eram de animais com idade superior a 24 meses (Tabela 2). Na tabela 3 encontram-se as distribuições das amostras positivas por município, na qual é possível observar que, com exceção dos municípios de Jaboatão dos Guararapes, Passira e São Lourenço da Mata, todos os demais apresentaram pelo menos um animal sororreagente. Os títulos de anticorpos variaram de 200 a 3200 com maior frequência do título 400 (Tabela 4). DISCUSSÃO A frequência média global de animais sororreagentes encontrada neste estudo (6,4%) está abaixo daquelas observadas em outros estudos realizados no Brasil. Em Pernambuco, Silva et al. (2008) relataram soroprevalência de 31,7% (163/469) em vacas leiteiras. Na Bahia, Gondim et al. (1999) detectaram prevalência de 14,09% (63/447) em rebanhos leiteiros. Benetti et al. (2009) observaram 53,5% (499/932) de positividade em vacas leiteiras no Mato Grosso do Sul, enquanto que Guedes et al. (2008) detectaram 91,2% (510/559) em rebanho leiteiro e 97,2% (559/575) em vacas abatidas em matadouros de Minas Gerais, sendo estas as maiores prevalências em gado bovino já relatadas no país. Variáveis como o país, a região, a técnica de detecção de anticorpos utilizada e o estado imunológico do animal são apontados como responsáveis pela variação nas frequências de anticorpos anti-n. caninum na espécie bovina (YÁNIZ et al., 2010). Devido a isto, as comparações dos resultados com dados de outros estudos devem ser realizadas com precaução, principalmente quando se utiliza técnicas sorológicas e pontos de corte diferentes. Pesquisas de anticorpos anti-n. caninum em bovinos utilizando a Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI) e Ensaio Imunoenzimático (ELISA) em diferentes países indicaram prevalência bastante variável de 0,7 % a 97,2% (GUEDES et al., 2008; SCHARES et al., 2009; KLEVAR et al., 2010; DUBEY & SCHARES, 2011). No presente estudo todos os animais positivos na sorologia eram adultos. Segundo Moore (2005) existe uma relação 32 Ciênc. vet. tróp., Recife-PE, v. 17, no 1/2, p janeiro/agosto, 2014

4 Ocorrência de anticorpos IgG anti- Neospora caninum em vacas leiteiras no estado de Pernambuco, Brasil Tabela 3 - Distribuição, por município, da frequência de amostras positivas e negativas na detecção de anticorpos IgG anti-neospora caninum em bovinos no estado de Pernambuco, Brasil. Municípios Nº de amostras Positivos Negativos FA* FR (%)** FA* FR (%)** Abreu e Lima ,7% 21 91,30% Água Preta ,52% 22 81,48% Barreiros ,00% 12 80,00% Cabo de Santo Agostinho ,30% 89 96,7% Glória de Goitá ,00% 24 80,00% Igarassú ,25% 30 93,75% Itamaracá ,70% 26 96,30% Jaboatão dos Guararapes % % Moreno ,00% 50 98,0% Palmares ,77% 11 73,33% Passira % % São Lourenço da Mata % % Vitória de Santo Antão ,80% 96 93,2% Total ,38% ,62% Tabela 4 - Frequência dos títulos de anticorpos IgG anti-neospora caninum em bovinos no estado de Pernambuco, Brasil. Título de anticorpos FA* FR** ,4% ,3% ,6% ,8% ,9% Total % linear entre o aumento da idade e a soropositividade para N. caninum e de acordo com este autor, animais entre dois a seis anos tendem a apresentar maiores títulos de anticorpos. Tal relação também foi relatada por Guimarães Junior et al. (2004) que observaram menor soroprevalência em vacas com idade entre meses quando comparadas com aquelas com mais de 24 meses, no estado do Paraná, Brasil. Por outro lado, Sanderson et al. (2000) não observaram aumento na soroprevalência em bovinos nos Estados Unidos e segundo os autores a relação idade-soroprevalência é inconsistente. Para Hietala & Thurmond (1999), bovinos com idade entre 13 e 24 meses possuem tendência a apresentar menor soroprevalência quando comparados a outras faixas etárias, indicando que ocorre um declínio de anticorpos em animais infectados congenitamente. No estudo realizado por Benetti et al. (2009) no Brasil, não foi observado relação entre as faixas etárias e a soroprevalência, tendo animais jovens e adultos apresentado valores semelhantes, segundo os autores esses resultados indicam que a transmissão vertical apresentou maior importância nos rebanhos por eles estudados. Outra variável que pode ter contribuído para a baixa soropositividade é a inexistência de histórico de abortos nos rebanhos, que já foi identificado anteriormente, em outros estudos, como um dos principais sinais clínicos e fator de risco da infecção (DUBEY & LINDSAY, 1996; DUBEY & SCHARES, 2011). Em relação aos municípios foi observado que as cidades de Palmares, Barreiros e Glória de Goitá foram as que apresentaram maior frequência de animais positivos. Todas estão localizadas na região da Zona da Mata, possuindo um clima caracterizado como quente e úmido com média de precipitação pluviométrica superior a 1000 mm anuais, temperatura média em variando de 24 a 25ºC e umidade relativa em torno de 70 % (BRASIL, 2000; BRASIL, 2012). Tais condições climáticas são favoráveis à viabilidade do parasito no ambiente fato, que pode ter contribuído para a elevada taxa de animais infectados encontrada nesses municípios. Ciênc. vet. tróp., Recife-PE, v. 17, no 1/2, p janeiro/agosto,

5 José Givanildo da Silva et al. CONCLUSÃO Os resultados obtidos confirmam a presença do Neospora caninum em diferentes regiões do Estado de Pernambuco, o que ressalta a importância de pesquisas sobre os impactos reprodutivos e econômicos nos rebanhos analisados. Mais estudos sobre a prevalência do agente em outras regiões do Brasil e do mundo são necessários, visto que ainda há escassez de informações. REFERÊNCIAS ANDREOTTI, R.; MATOS, M. F. C.; GONÇALVES, K. N.; OSHIRO, L. M.; LIMA-JUNIOR, M. S. C.; PAIVA, F.; LEITE, F. L Comparison of indirect ELISA based on recombinant protein NcSRS2 and IFAT for detection of Neospora caninum antibodies in sheep. Revista Brasileira de Parasitologia Veterinária, v. 18, p BARTELS, C. J.; ARNAIZ-SECO, J. I.; RUIZ-SANTA-QUITERA, A.; BJORKMAN, C.; FROSSLING, J.; VON BLUMRODER, D.; CONRATHS, F. J.; SCHARES, G.; VAN MAANEN, C.; WOUDA, W.; ORTEGA-MORA, L. M Supranational comparison of Neospora caninum seroprevalences in cattle in Germany, The Netherlands, Spain and Sweden. Veterinary Parasitology, v. 137, p BENETTI, A. H.; SCHEIN, F. B.; SANTOS, T. R.; TONIOLLO, G. H.; COSTA, A. J.; MINEO, J. R.; LOBATO, J.; SILVA, D. A. O.; GEN- NARI, S. M Pesquisa de anticorpos anti-neospora caninum em bovinos leiteiros, cães e trabalhadores rurais da região Sudoeste do Estado de Mato Grosso. Revista Brasileira de Parasitologia Veterinária, v. 18, p BRASIL Empresa brasileira de pesquisa agropecuária. Boletim de Pesquisa n. 11-Levantamento de Reconhecimento de Baixa e Média Intensidade dos Solos do Estado de Pernambuco. Disponível em: Acesso em: 03/11/2014. BRASIL Empresa brasileira de pesquisa agropecuária. Clima e Água de Chuva no Semi-árido. Available at: Acesso em 03/11/2014. DUBEY, J. P.; HATTEL, A. L.; LINDSAY, D. S.; TOPPER, M. J Neonatal Neospora caninum infection in dogs: isolation of the causative agent and experimental transmission. Jounal of American Veterinary Association, v.192, p DUBEY J. P.; LINDSAY, D. S A review of Neospora caninum and neosporosis. Veterinary Parasitology, 67, DUBEY, J. P.; SCHARES, G.; ORTEGA-MORA. Epidemiology and Control of Neosporosis and Neospora caninum Clinical Microbiology Reviews, v. 20, n. 2, p DUBEY, J. P.; SCHARES, G. Neosporosis in animals The last five years Veterinary Parasitology, v. 180, p EIRAS, C.; ARNAIZ, I.; ÁLVAREZ-GARCÍA, G.; ORTEGA-MORA, L. M.; SANJUÁNL, M. L.; YUS, E., DIÉGUEZ, F. J Neospora caninum seroprevalence in dairy and beef cattle from the northwest region of Spain, Galicia. Preventive Veterinary Medicine, v. 98, p GONDIM, L. F. P.; SARTOR, I. F.; HASEGAWA, M.; YAMANE, I Seroprevalence of Neospora caninum in dairy cattle in Bahia, Brazil. Veterinary Parasitology, v. 86, p GUEDES, M. H. P.; GUIMARÃES, A. M.; ROCHA, C. M. B. M.; HIRS- CH, C Frequência de anticorpos anti-neospora caninum em vacas e fetos provenientes de municípios do sul de Minas Gerais. Revista Brasileira de Parasitologia Veterinária, v. 17, p GUIMARÃES JUNIOR, J. S.; SOUZA, S. L. P.; BERGAMASCHI, D. P.; GENNARI, S. M Prevalence of Neospora caninum antibodies and factors associated with their presence in dairy cattle of the north of Paraná state, Brazil. Veterinary Parasitology, v. 124, n. 1/2, p HIETALA, S. K.; THURMOND, M. C. Postnatal Neospora caninum transmission and transient serologic responses in two daires. International Journal of Parasitology, v. 29, n. 10, p , HOAR, B. R.; MCQUARRY, A. C.; HIETALA, S. K Prevalence of Neospora caninum and persistent infection with bovine viral diarrhea virus in dairy-breed steers in a feedlot. Journal American Veterinary Medical Association, 230, KLEVAR, S.; NORSTRÖM, M.; THARALDSEN, J.; CLAUSEN, T.; BJÖRKMAN, C The prevalence and spatial clustering of Neospora caninum in dairy herds in Norway. Veterinary Parasitology, v. 170, p LARSON, R. L.; HARDIN, D. K.; PIERCE, V. L Economic considerations for diagnostic and control options for Neospora caninum-induced abortions in endemically infected herds of beef cattle. Journal of the American Veterinary Medical Association, v. 224, p MARQUES, F. A. C.; HEADLEY, A. S.; FIGUEREDO-PEREIRA, V.; TARODA, A.; BARROS, L. D.; CUNHA, I. A. L.; MUNHOZ, K., BUGNI, F. M.; ZULPO, D. L.; IGARASHI, M.; VIDOTTO, O.; JU- NIOR, J. S.; GARCIA, J. L Neospora caninum: evaluation of vertical transmission in slaughtered beef cows (Bos indicus). Parasitology Research, v. 108, p MOORE, D. P. Neosporosis in South America Veterinary Parasitology, v. 127, p MOORE, D. P.; PÉREZ, A.; AGLIANO, S.; BRACE, M.; CANTÓN, G.; CANO, D.; LEUNDA, M. R.; ODEÓN, A. C.; ODRIOZOLA, 34 Ciênc. vet. tróp., Recife-PE, v. 17, no 1/2, p janeiro/agosto, 2014

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