INSEMINAÇÃO ARTIFICIAL EM TEMPO FIXO PROTOCOLOS E APLICAÇÃO

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1 UNIVERSIDADE FEDERAL DE VIÇOSA PRÓ-REITORIA DE EXTENSÃO E CULTURA DEPARTAMENTO DE ZOOTECNIA 82ª SEMANA DO FAZENDEIRO INSEMINAÇÃO ARTIFICIAL EM TEMPO FIXO PROTOCOLOS E APLICAÇÃO Fabrício Albani Oliveira Ciro Alexandre Alves Torres Jurandy Mauro Penitente Filho Viçosa MG

2 1. INTRODUÇÃO Na pecuária, a lucratividade dos sistemas de produção está diretamente relacionada ao período de serviço e intervalo de partos (IP). A redução do IP aumenta o número de partos e a produção de leite durante a vida produtiva da vaca. O intervalo de parto de 12 a 13 meses traz benefícios econômicos, mas é difícil de ser obtido na prática devido aos problemas de manejo associados ao ciclo reprodutivo da vaca (Schmidt, 1989). Com isso, o conhecimento e aplicação da biotécnica Inseminação Artificial (IA), associada à administração de hormônios para o controle endócrino da fisiologia reprodutiva das fêmeas, é uma alternativa para a solução do problema. Somando-se que a difusão das biotécnicas contribui para incremento no melhoramento genético dos rebanhos e, consequentemente, para o desenvolvimento do agronegócio da pecuária. A inseminação artificial (IA) é uma biotécnica da reprodução que permite um rápido ganho genético, sendo que durante as últimas décadas observa-se um aumento na utilização da IA (gráfico 1). A detecção do estro é o principal fator que influencia a eficiência de programas de IA em bovinos. As perdas de cio aumentam o número de dias improdutivos dos animais, o intervalo entre partos, e diminuem o número de bezerros nascidos e produção leiteira. Ao observarem esses efeitos, muitos fazendeiros interromperam seus programas de inseminação artificial convencional, retornando a utilizar a monta natural (Carrijo Junior & Lander, 2006). ASBIA,

3 O uso da Inseminação Artificial em Tempo Fixo (IATF) tem aumentado expressivamente no Brasil em decorrência das facilidades de realização dos programas de IA a campo e dos resultados obtidos de maiores taxas de gestação. O emprego de associações hormonais (progestágenos; prostaglandina PGF 2α ; hormônio liberador de gonadotrofinas GnRH; gonadotrofina coriônica humana hcg; gonadotrofina coriônica equina ecg; hormônio folículo estimulante FSH; benzoato de estradiol BE) em protocolos de IATF induz a emergência de uma nova onda de crescimento folicular, controla a duração do crescimento folicular até o estágio pré-ovulatório e induz a ovulação. A aplicação de estratégias para eficiência reprodutiva de fêmeas bovinas com o uso da Inseminação Artificial traduz em aperfeiçoamento da biotécnica IATF, difusão do conhecimento para a aceitação dos produtores, a fim de assegurar investimento em biotecnologias que contribua para o melhoramento genético e, consequente, aumento de produção. 2. CICLO ESTRAL O ciclo estral em bovinos apresenta duração média de 21 dias e é regulado por interações e antagonismos endocrinológicos de hormônios secretados pelo hipotálamo, hipófise, ovários e útero. Esse período pode ser dividido em duas fases distintas quais sejam: folicular ou estrogênica, que se estende do pró-estro ao estro, culminando com a ovulação; e fase luteínica ou progesterônica (metaestro e o diestro) fase de maior secreção de progesterona, que termina com a luteólise. O ciclo estral de bovinos apresenta duas ou três ondas de crescimento folicular (Ginther et al., 1989) e, eventualmente, uma ou quatro (Figueiredo et al., 1997). Na emergência cada onda folicular, um dos folículos é selecionado, torna-se dominante e continua o crescimento, enquanto os demais regridem e se tornam atrésicos (Reichenbach et al., 2001). Um dos mecanismos essenciais para a divergência folicular, início da maior diferença nas taxas de crescimento entre os dois maiores folículos da onda, é a diminuição da concentração de FSH plasmático (Ginther et al., 1999). A capacidade do folículo dominante de continuar o crescimento após o declínio da concentração de FSH pode ser decorrente do aumento da biodisponibilidade do fator de crescimento semelhante à insulina do tipo 1 (IGF-1) no folículo, da expressão de RNA mensageiro (RNAm), do receptor de hormônio luteinizante (LH) e da expressão de 3

4 receptores de LH nas células da granulosa, que conferem maior responsividade ao LH em relação aos folículos menores (Crowe, 1999). Considerando as dificuldades inerentes à detecção de estro, que pode ser considerada um dos maiores entraves a eficiência reprodutiva, tem-se desenvolvido protocolos que sincronizam a ovulação pela aplicação de fármacos que possibilitam o emprego da IATF, independente da manifestação de estro. Estes protocolos permitem controle do desenvolvimento folicular e que a maioria dos animais expostos ao protocolo ovule e seja inseminada em tempo determinado. Tais protocolos possibilitam inseminar um grande número de vacas sem a necessidade de se implantar programas intensivos de detecção de estro.. A sincronização de estro, como biotécnica reprodutiva, surge como uma ferramenta de manejo auxiliar para o aumento da eficiência produtiva e econômica da atividade pecuária (Odde, 1990). Pela sincronização, o período de IA pode ser reduzido de 21 dias para o mínimo de algumas horas, no caso da IATF, dependendo do método escolhido (Bragança et al., 2004). Programas de sincronização de estro oferecem uma série de benefícios, destacando-se: previsão do momento do estro e IA, eliminação da necessidade de detecção de cio, redução de custos de mão de obra, concentração do período de parição com consequente uniformidade de produtos, indução da ciclicidade em vacas em anestro transicional, diminuição do IP, aumento do número de bezerros nascidos, menor tempo de observação de partos e maior praticidade na execução de programas de IA (Gregory & Rocha, 2004). Para isto, um protocolo de IATF deve ser de fácil aplicabilidade, ter alta probabilidade de sucesso, ser administrado em curto intervalo de tempo e ser viável economicamente (relação custo/benefício), sendo fundamental que o programa de sincronização de estro e,ou ovulação seja capaz de induzir a ciclicidade nas vacas em anestro, com boa taxa de concepção. 3. SINCRONIZAÇÃO DE ESTRO A sincronização de estros é a biotécnica reprodutiva que permite manipular o ciclo estral, com a utilização de substâncias hormonais. A diferença entre sincronização e indução de estros é que a sincronização consiste em encurtar ou prolongar o ciclo estral pela utilização de hormônios ou associações hormonais que induzam a luteólise ou prolonguem a vida do corpo lúteo, ao passo que, a indução consiste em induzir o estro em fêmeas que estejam em anestro, por meio também, do emprego de hormônios 4

5 ou práticas de manejo. Assim, são processos distintos e aplicáveis a diferentes categorias de animais (Moraes et al., 2001). O primeiro sucesso na sincronização de estros foi relatado por (Christian & Casida, 1948) e, a partir desta data, a pesquisa tem focado no desenvolvimento de protocolos e produtos de sincronização. A utilização de protocolos de sincronização de estro visa encurtar o período para ocorrência da primeira ovulação, por induzir o crescimento folicular e posterior ovulação em fêmeas que se apresentem em anestro. Vários protocolos são descritos na literatura, os quais apresentam resultados variáveis, dependendo da condição sanitária e nutricional das fêmeas. Para a escolha do protocolo, devem ser analisadas as condições individuais de cada rebanho, levando-se em consideração as condições citadas anteriormente, além da relação custo/benefício de seu uso (Moraes et al., 2001). Os principais hormônios utilizados na indução do estro e/ou ovulação são progestágenos e GnRH, os quais muitas vezes são utilizados em associação com outros hormônios, como PGF 2α (e seus análogos sintéticos), estradiol, ecg ou FSH. Estas associações visam manipular tanto a dinâmica folicular como o corpo lúteo (Mapletoft et al., 2000), aumentar a fertilidade do estro induzido e aumentar a precisão do momento da ovulação e qualidade do oócito, quando se utilizam protocolos de inseminação artificial em tempo fixo (IATF). O crescimento dos folículos ovarianos nas fêmeas bovinas se dá em ondas, geralmente duas ou três por ciclo. Cada onda pode ser dividida em 3 fases: Recrutamento: quando vários folículos primários passam a se desenvolver concomitantemente. Esta fase é dependente do FSH (Hormônio Folículo Estimulante). Seleção e dominância: na qual um folículo cresce mais que os outros, tornandose dominante e inibindo o crescimento dos demais (subordinados). Esta fase é dependente também do LH (Hormônio Luteinizante). Ovulação ou atresia: O folículo dominante ovula após um pico de liberação de LH. No entanto, se houver um corpo lúteo ativo, os níveis de progesterona estarão altos (fase luteal) inibindo a liberação de LH (feedback negativo) e, então, o dominante entra em atresia e uma nova onda de crescimento folicular se inicia. A última onda folicular de cada ciclo culmina com a regressão do corpo lúteo (induzida pela prostaglandina F2α liberada no útero). Com a diminuição dos níveis de progesterona, cessa-se a inibição sobre o LH, que é liberado em pulsos e induz o crescimento final do folículo, a 5

6 ovulação e posterior luteinização na formação do novo corpo lúteo. Este processo é ilustrado nas Fig. 2 a 4. Fig.2 -.Fases do crescimento folicular: recrutamento (dependente de FSH); Seleção e dominância (dependente de LH); Ovulação ou atresia (na dependência da presença o não do pico pré-ovulatório de LH; Fonte: TECNOPEC) Fig.3 - Esquema de ciclo estral com 2 ondas foliculares. A primeira onda culmina com a atresia do dominante por falta do pico pré-ovulatório de LH (fase luteínica). A segunda onda culmina com a ovulação (fase folicular, baixa progesterona e pico pré-ovulatório de LH; Fonte: TECNOPEC) 6

7 Fig.4 - Esquema de ciclo estral com 3 ondas foliculares. A primeira e a segunda onda culminam com a atresia dos dominantes por falta do pico pré-ovulatório de LH (fase luteínica). A terceira onda culmina com a ovulação (fase folicular, baixa progesterona e pico pré-ovulatório de LH; Fonte: TECNOPEC). E Como Controlar as Várias Fases do Ciclo Estral? Os programas de IATF se tornaram possíveis graças aos esforços de muitos pesquisadores que descobriram métodos farmacológicos de controle de cada fase do ciclo estral, em diferentes estágios do ciclo reprodutivo dos animais. Trabalhos mostraram que é possível: Sincronizar a emergência de uma nova onda folicular, através da indução da ovulação (GnRH) ou da atresia folicular (progesterona + estradiol). Controlar a duração da fase luteal, usando luteolíticos análogos à Prostaglandina F2α ou simulando uma fase luteal, fornecendo progesterona por meio de dispositivos de liberação lenta. Induzir a ovulação na fase folicular com GnRH, LH ou estrógeno. Induzir o crescimento folicular em animais em anestro, utilizando gonadotrofinas (FSH ou ecg). IATF 4. PRINCIPAIS HORMÔNIOS UTILIZADOS EM PROGRAMAS DE 4.1. Prostaglandina F 2α As prostaglandinas são substâncias orgânicas, biologicamente ativas, com efeitos fisiológicos e farmacológicos no organismo, muito potentes. Ocorrem naturalmente em muitos tecidos e situações biológicas. Inicialmente encontradas na próstata (Von Euler, 1934 citado por Von Euler, 1973), daí o nome de prostaglandina. A 7

8 maior parte das prostaglandinas seminais se origina das glândulas vesículares e não da próstata, mas o nome original permanece. Os efeitos das diferentes prostaglandinas (PGF) na reprodução dos animais domésticos são amplos, atuando no desenvolvimento folicular, ovulação, regressão luteal, implantação e manutenção da gestação, parto e fisiologia puerperal (Weems et al., 2006). A PGF 2α e seus análogos sintéticos são utilizados na sincronização do ciclo estral das fêmeas domésticas devido à sua ação luteolítica, que é promover a vasoconstrição seguida de uma cascata apoptótica. A PGF 2α e seus análogos têm sido os agentes farmacológicos mais utilizados nos programas para sincronização do estro em fêmeas bovinas. Nas fêmeas com a lise do corpo lúteo, o estro aparece a intervalos de cinco ou mais dias, o que torna impraticáveis os programas de inseminação e transferência de embriões em tempo fixo (Bó & Baruselli, 2002). Esta variação no intervalo da aplicação da PGF 2α ao estro e a ovulação é decorrente do estado de desenvolvimento dos folículos no momento do tratamento. Dessa forma, se o tratamento for realizado quando o folículo dominante está na fase final do seu crescimento, ou no início da sua fase estática, a ovulação irá ocorrer dentro de dois a três dias. Por outro lado, se a PGF 2α for aplicada quando o folículo dominante estiver no meio ou no final da sua fase estática, a ovulação irá ocorrer cinco a sete dias mais tarde, após o crescimento do folículo dominante da próxima onda folicular (Kastelic & Ginther, 1991). As grandes variações no intervalo do tratamento à ovulação, além do manejo da detecção de estro, reforçam a necessidade de protocolos destinados a controlar tanto a fase luteal quanto o crescimento folicular e a ovulação, para aumentar a eficiência reprodutiva nos rebanhos. Alguns resultados (Cruz et al., 1997) sugerem que a PGF 2α pode exercer efeito na ciclicidade por causar a liberação de LH, independente dos níveis de progesterona, e que a administração de PGF 2α 30 horas antes do GnRH aumenta o efeito de indução deste na liberação do LH e resposta ovulatória Progestágenos A progesterona é o progestágeno natural mais importante secretado pelas células luteínicas. Assim como os estrógenos, é derivada do colesterol, sendo também secretada pela placenta, testículos e córtex adrenal, em pequenas quantidades. Grande número de progestágenos sintéticos tem sido utilizado na prática como: acetato de medroxiprogesterona (MAP); acetato de clormadinona (CAP); acetato de 8

9 melengestrol (MGA) e acetato de flurogesterona = clonolone (FGA), bastantes eficazes como sincronizadores de estro e para aumento de peso em novilhas. O MGA inibe a ovulação, mas permite o crescimento de folículos ovarianos. A progesterona e sua associação com outros hormônios estão amplamente utilizadas no tratamento do anestro pós parto em bovinos, com resultados variáveis na indução de estro. Os resultados variam de acordo com o tipo de progesterona que é utilizada e com o tempo de tratamento (Nation et al., 2000; Perry et al., 2002; Stevenson et al., 2003). A administração contínua de progesterona por 5 a 9 dias inibe a liberação de LH e, quando há a interrupção de seu fornecimento, é desencadeada uma onda de LH capaz de induzir o crescimento final do folículo pré-ovulatório, culminando com a ovulação (Moraes et al., 2001), e a administração de estradiol aumenta a resposta de expressão de estro (McDougall, 1994). Assim, o tratamento com progesterona aparentemente sensibiliza vacas em anestro em resposta ao nível folicular de estradiol. A utilização de progesterona no tratamento do anestro pós parto tem proporcionado resultados superiores aos obtidos com MGA, principalmente por diminuir a ocorrência de corpos lúteos de curta duração após o tratamento de indução de estro (Perry et al., 2004) Estrógenos São substâncias derivadas do colesterol e seus precursores imediatos são androstenediona e testosterona. Vários estrógenos são secretados pelos ovários dos mamíferos: 17β-estradiol (E 2 ), estrona, estriol e outros. O LH estimula as células tecais do folículo que secretam testosterona, que é convertida em estradiol nas células da granulosa por ação do FSH na síntese da enzima aromatase. Os estrógenos são secretados pelas células da granulosa, no folículo em desenvolvimento e maduro e no corpo lúteo (células luteínicas), placenta, testículos e pequenas quantidades na córtex adrenal. Como os demais esteróides, os estrógenos não são armazenados na glândula, mas rapidamente utilizados ou degradados no fígado, conjugados com sulfatos inorgânicos ou com ácido glicurônico e eliminados na urina. A utilização do E 2 em programas de sincronização de estro e ovulação está relacionada com sua habilidade em induzir o surgimento da onda pré-ovulatória de LH, luteólise durante a fase folicular e atresia folicular (Bó et al., 1993; Lammoglia et al., 1998). 9

10 A aplicação de estrógenos causa, inicialmente, supressão da secreção tanto de FSH quanto de LH (Martinez et al., 2003), levando a atresia dos folículos. Segue-se a liberação de um pico de FSH e, consequentemente, o recrutamento de uma nova onda. O intervalo da aplicação do estrógeno e do recrutamento da nova onda depende da dose administrada do estrógeno, variando em torno de 36 a 72 horas (Martinez et al., 2005). O desenvolvimento de uma nova onda folicular ocorre em torno de quatro dias após a aplicação do E 2 e depende do reaparecimento do pico de FSH (Bó et al., 1993). Na ausência de progesterona, o E 2 induz liberação de GnRH e LH e ovulação do folículo dominante em 36 a 72 horas, dependendo do éster de E 2 utilizado. Diferentes ésteres de E 2 vêem sendo utilizados para a sincronização do estro. A maioria é utilizada como solução injetável, como o valerato de estradiol (VE), benzoato de estradiol (BE), cipionato de estradiol (CE) e E 2 (Bó et al., 1994; Murray et al., 1998). A maior diferença entre esses compostos é a meia-vida após a administração. A duração da meia-vida é maior em ordem crescente: E 2, BE, VE e CE. A administração de uma única injeção de VE (5 mg) resulta na elevação da concentração plasmática de estradiol por um período de cinco a sete dias (Bó et al., 1993), sendo que uma única injeção de E 2 (5 mg) resulta na elevação plasmática de estradiol por apenas 42 horas (Bó et al., 1994). Estas diferenças promovem mudanças referentes ao protocolo de sincronização estabelecido (Lopez, 2005). Os estrógenos de longa duração promovem o surgimento de uma onda folicular muito variável e ainda estão ativos no momento de induzir a ovulação durante o protocolo de IATF, por isso o éster de estrógeno mais utilizado é o BE. Colazo et al. (2003) ao procederem análise comparativa do CE com o E 2 e BE, observaram que o CE foi menos eficaz em sincronizar a emergência da onda e ovulação, sem, repercutir na taxa de gestação. Lopes et al. (2000) relataram sucesso na utilização do CE em protocolos de IATF Gonadotrofina coriônica eqüina O hormônio gonadotrofina coriônica eqüina (ecg), também denominado gonadotrofina do soro de égua gestante (PMSG), é uma glicoproteína produzida pelos cálices endometriais de éguas, entre os 40 e 120 dias de gestação (Ginther, 1979). Cole e Hart (1930) foram os primeiros a demonstrar a substância gonadotrópica no soro de égua prenhe. Allen e Moor (1972) demonstraram que os cálices endometriais que produzem ecg são de origem placentária, daí a derivação do nome gonadotrofina coriônica equina (ecg). Em relação a outros hormônios gonadotróficos, o ecg 10

11 apresenta a singularidade de possuir atividade folículo estimulante e luteinizante na mesma molécula (Papkoff, 1974). O ecg em virtude da sua estrutura, reage muito bem com receptores de LH dos folículos e do corpo lúteo no ovário de fêmeas bovinas (Stewart & Allen, 1981). Uma alternativa para aumentar taxas de prenhez em programas de IATF em vacas em anestro pode ser a adição de UI de ecg no momento da remoção do implante de progesterona (Roche et al., 1992; MacMillan & Peterson, 1993; MacMillan & Burke, 1996). A eficácia da inclusão da gonadotrofina coriônica equina (ecg), em protocolos de sincronização de estro, é devida ao seu efeito folículo estimulante (similar ao do FSH). Experimentos comprovaram que a administração 300 a 500 UI de ecg, em protocolos de IATF, estimula o crescimento folicular até o estágio pré-ovulatório, aumenta a taxa de ovulação e, consequentemente, as taxas de prenhez nos programas (Aleixo et al., 1995, Bó et al., 2003). Entretanto, o ecg é uma proteína de alto peso molecular, extraído do soro de éguas prenhes, passível de provocar reações imunológicas (formação de anticorpos), quando utilizado repetidamente. Neste caso, os anticorpos se ligam ao ecg, anulando seu efeito. Chupin e Saumande (1979) avaliaram tratamento para o controle do ciclo estral com baixa dose de ecg. Esse tratamento consistiu de implante de progestágeno por nove dias, com uma injeção de 5 mg de valerato de estradiol no começo do tratamento e 0,5 mg de análogo de prostaglandina dois dias antes da remoção do implante. No primeiro experimento, 500 UI de ecg foram injetadas dois dias antes (n = 61 vacas) ou na remoção do implante (n = 62 vacas). Os índices de prenhez foram altos e similares nos dois tratamentos (67,2 e 67,7%, respectivamente), com uma percentagem maior de gêmeos no grupo que recebeu o ecg dois dias antes da remoção do progestágeno. O efeito do dia da aplicação de prostaglandina, relativo ao do ecg, demonstrou que a eficiência da aplicação do ecg dependeu da duração da estimulação. Esses autores compararam o tratamento hormonal anteriormente descrito com o tratamento de ecg e um análogo de prostaglandina em vacas da raça Normanda amamentando. Em ambos os casos, o ecg (600 UI) e o análogo de prostaglandina foram aplicados juntos. Observaram maiores taxas de ovulação (avaliadas por palpação retal), no caso da aplicação em conjunto dessas substâncias, nos dois dias anteriores da remoção do progestágeno. 11

12 4.5. Hormônio liberador de gonadotrofinas O hormônio liberador de gonadotrofinas (GnRH) é um decapeptídeo produzido no hipotálamo. Esse hormônio hipotalâmico é liberado de modo pulsátil e, na fêmea, a sua freqüência e amplitude variam durante os estágios reprodutivos nas diferentes espécies. Há ainda alguma dúvida sobre se o GnRH controla LH e FSH, porque a síntese e liberação do LH são muito mais responsivas ao GnRH do que a síntese e liberação do FSH (Valle, 1991; Swenson & Reece, 1996; Santos, 2002). A administração de GnRH eleva a concentração de LH na circulação periférica dentro de 2 às 4h (Twagiramungu et al., 1995). O GnRH promove a ovulação ou a luteinização do folículo dominante se este estiver em sua fase de crescimento ou no início de sua fase estática (Martinez et al., 1997). A resposta folicular frente ao tratamento com GnRH deve-se a liberação de LH. Protocolos de sincronização de estro que utilizam GnRH para iniciar uma nova onda de crescimento folicular ou, principalmente, promover a ovulação de um folículo dominante no momento da IA ou antes, têm sido desenvolvidos para gado de corte e de leite. Quando administrado em estágios aleatórios do ciclo estral, o GnRH determina a ovulação do folículo dominante com mais de 9 mm ou a sua atresia, e induz a emergência de uma nova onda de crescimento folicular dentro de 2 a 3 e 1 a 2 dias em vacas e novilhas, respectivamente, após o tratamento (Bragança, 2007). A aplicação de GnRH (100µg) promove a ovulação em cerca de 85-90% das vacas e 56% das novilhas (Pursley et al., 1995). PROTOCOLOS DE IATF - TECNOPEC 1) Protocolo IATF Tecnopec - Vacas Leiteiras de Alta Produção 12

13 Indicações deste protocolo: Animais com média condição corporal (2,5). Animais com intervalo pós-parto maior que 50 dias. Animais com presença de CL, o uso do Folltropin ou ecg é opcional. 2) Programa IATF Tecnopec - Vacas Leiteiras Cruzadas Indicações deste protocolo: Vacas leiteiras com produção menor de 20 Kg/dia. Animais com média condição corporal (2,5). Animais com intervalo pós-parto maior que 50 dias. Animais com presença de CL, o uso do Folltropin ou ecg é opcional. 3) Protocolo IATF Tecnopec BE no D9 Vacas de corte Este protocolo é usualmente indicado para gado de dupla aptidão (corte e leite), com fêmeas na fase de lactação e para fêmeas cruzadas leiteiras. Durante a produção de 13

14 leite, há um maior fluxo sanguíneo pelo fígado e consequentemente ocorre uma maior metabolização hormonal hepática. Com isso, recomenda-se o uso do RIC-BE 1 dia após a retirada do Primer, para permitir que o aumento nas concentrações de estrógeno, responsável pela indução da ovulação, ocorram na ausência de progesterona circulante. 4) Protocolo IATF Tecnopec BE no D8 Vacas de corte Programas de execução simples, exigindo menor mão-de-obra e que provoquem menos estresse nos animais são requisitos importantes para viabilizar o programa IATF em condições de campo. A aplicação do Benzoato de Estradiol (RIC-BE ) na retirada do dispositivo de progesterona (D8) diminui um manejo, ou seja, os animais são fechados no curral uma vez a menos, que os programas mais usuais. 5) Protocolo IATF Tecnopec GnRH no D10 Vacas de corte 14

15 A indução da ovulação com Gestran Plus (GnRH) é rápida e eficiente, permitindo sua administração no momento da IA e também diminuindo uma passagem dos animais pelo tronco, durante os protocolos IATF. A Tecnopec comprovou sua eficácia também na associação com RIC-BE (Benzoato de Estradiol). O uso dos estrógenos, ao final dos protocolos, facilita o processo de inseminação, em especial nas fêmeas primíparas, e a sincronização das ovulações ocorre de forma mais precisa com o Gestran Plus 6) Programa Tecnopec Sêmen Sexado Os resultados de programas de IATF com sêmen sexado ainda têm se mostrado inconsistentes. Uma alternativa seu uso em programas de sincronização, é o uso de protocolos mistos, no qual se realiza a sincronização folicular, porém sem o estimulo final à ovulação, que ocorrerá naturalmente. Neste caso se faz necessária a observação de cios. Os animais que não apresentarem cios até 54 horas após a retirada do dispositivo podem ser inseminados em tempo fixo com sêmen não sexado de baixo custo administrando junto uma dose de Gestran Plus Esse tipo de protocolo também pode ser utilizado para se aumentar a eficiência de uso de doses de sêmen de alto valor, diminuindo as perdas de sêmen (alta taxa de concepção), porém comprometendo um pouco a taxa de serviço (o que pode compensar pelo alto custo das doses). 15

16 ESTRATÉGIAS PARA INCREMENTAR A TAXA DE CONCEPÇÃO À IATF: Estratégias que visam melhorar a taxa de concepção em vacas leiteiras e que podem ser utilizadas concomitantemente à IATF, pois podem incrementar os resultados. Deve-se, no entanto, avaliar o custo benefício das técnicas dentro da realidade de cada propriedade. Aplicação de análogo de GnRH, 7 dias após a IA. Esse manejo induz a ovulação do folículo dominante da 1ª onda de desenvolvimento folicular, que se inicia 1 dia após a ovulação ocorrida na IA. Esse manejo gera um corpo lúteo acessório. Aumenta a produção de progesterona, podendo melhorar as taxas de prenhez, por diminuir os índices de perda embrionária. Suplementação alimentar com Ácidos Graxos Omega 3. A ingestão de 10 gramas/dia de ácidos graxos Omega 3, durante o período reprodutivo, melhora a taxa de concepção na IA, diminuindo o índice de perda embrionária, motivada pela regressão precoce do corpo lúteo. Os ácidos graxos Omega 3 mudam a cadeia de degradação do ácido Araquidônico, resultando em Prostaglandinas do Tipo E (ao invés de PGF 2α), que não são ativas na lise do corpo lúteo. Administração injetável de estimulante hormonal desde a parição até o início do protocolo de IATF. Pode estimular a eficiência das glândulas relacionadas com a reprodução, podendo levar à maior síntese e liberação de hormônio liberador de gonadotrofinas (GnRH), hormônio folículo estimulante (FSH) e hormônio luteinizante. Administração de rbst (Somatotropina recombinante bovina). Eleva as concentrações plasmáticas de IGF-I e de insulina, exercendo efeito sobre maturação dos ovócitos por efeito direto ou pela estimulação das células da granulosa, além de poder agir nos estádios iniciais do desenvolvimento embrionário. Administração de flunixin meglumine no momento do reconhecimento materno da gestação. Inibe a ciclo-oxigenase e, portanto, impede a conversão do ácido araquidônico em PGF 2α. 16

17 OBSERVAÇÕES IMPORTANTES Em vacas de raças européias ou sintéticas (corte e leite), devido às diferenças no metabolismo da progesterona em relação aos zebuínos e cruzados, recomenda-se utilizar o PRIMER por duas vezes. Existindo a possibilidade da 3ª utilização somente em novilhas, ou vacas secas que são animais com metabolismo de progesterona mais lento. Recomenda-se para a reutilização do PRIMER, após sua retirada da vaca sincronizada, lavá-lo em água corrente, retirando todo o muco e colocando-o em solução de Kilol ou Amônia quartenária por 10 minutos. Secar os dispositivos na sombra e guardá-los em sua própria embalagem, até nova utilização. Não trabalhar com animais em condição corporal muito comprometida ou com balanço energético negativo intenso (perda de peso). Mesmo nos melhores programas, o efeito da nutrição e da condição corporal é sempre significante. Tomar os devidos cuidados na manipulação e aplicação dos hormônios. Mantê-los em local refrigerado mesmo durante o manuseio no curral, utilizar seringas pequenas (1 a 5 ml) e agulhas finas (40x12 ou 30x8), para um melhor doseamento e para evitar o refluxo. Usar somente uma agulha para retirar o produto do frasco, evitando contaminações. Utilizar uma planilha para controle das aplicações. Todos os animais devem passar por todas as aplicações, uma falha em uma aplicação significa perda de prenhez do animal. Muitas falhas comprometem o resultado final. Uma sugestão de planilha pode ser observada na tabela abaixo. Note o espaço para anotação da condição corporal e intervalo pós-parto. Estes dados ajudam a entender o resultado final e realizar correções em um próximo programa, caso seja necessário. Descongelar o sêmen conforme as instruções do fornecedor. Deixar uma pessoa exclusivamente para descongelar e montar aplicadores, para ganhar agilidade. Não estressar desnecessariamente os animais nas aplicações e na IA. 17

18 *ECC = Escore de Condição Corporal (avaliação 1 a 5) * Diagnostico Prenhez: P= prenha (+) ou V= vazia (-) * Na coluna de manejo, marcar com um "X" a vaca que recebeu o tratamento daquele dia * No protocolo de 3 passagens inutilizar a coluna do 3º manejo 18

19 REFERÊNICAS BIBLIOGRÁFICAS ASBIA. Relatório estatístico de Produção, importação e Comercialização de sêmen, em Bó, G. A., G. P. Adams, L. F. Nasser, R. A. Pierson, and R. J. Mapletoft. Effect of estradiol valerate on ovarian follicles, emergence of follicular waves and circulating gonadotropins in heifers. Theriogenology. 36: , Bó, G. A., G. P. Adams, R. A. Pierson, H. E. Tribulo, M. Caccia, and R. J. Mapletoft. Follicular wave dynamics after estradiol-17_ treatment of heifers with or without a progestogen implant. Theriogenology. 41: , ALLEN, W.R; MOOR, R.M. The origin of the equine endometrial cups. I. Production of PMSG by foetal trophoblast cells. Journal of Reproduction and Fertility, v.29, n.2, p , BÓ, G.A.; BARUSELLI, P.S.; MARTINEZ, M.F. Pattern and manipulation of follicular development in Bos Indicus cattle. Animal Reproduction Science, v.78, p , BRAGANÇA, J.F.M.; GONÇALVES, P.B.D.; BASTOS, G.M. et al. Sincronizacao de estro e ovulacao em novilhas de 12 a 14 meses de idade e inseminadas artificialmente com observacão de estro e horario prefixado. Revista Brasileira de Reprodução Animal, v.28, p.73-77, CHRISTIAN. R.E; CASIDA. L.E. The effect of progesterone in altering the oestrual cycle of the cow. Journal of Animal Science, v.7, p.540, CHUPIN, D; SAUMANDE, J. New attemps to decrease the viability of ovarian response to PMSG in cattle. Annales Biology Animal Biochimestry and Biophys, v.19, n.5, p , COLAZO, M.G.; KASTELIC, J.P.; MAPLETOFT, R.J. Effects of estradiol cypionate (ECP) on ovarian follicular dynamics, synchrony of ovulation, and fertility in CIDR-G-based, fixed-time AI programs in beef heifers. Theriogenology, v.60, p , COLE, H.H; HART, G.H. Potency of blood serum of mares in progressive stages of pregnancy in effecting the sexual maturity of the inmature rat. American Journal Physiology, v.93, n.1, p.57-58, CROWE, M.A. Gonadotrophic control of terminal follicular growth in cattle. Reprocution Domestic Animal, v.34, p , CRUZ, L.C.; VALLE, E.R.; KESLER, D.J. Effect of prostaglandin F and gonadotropin releasing hormoneinduced luteinizing hormone releases on ovulation and corpus luteum function of beef cows. Animal of Reproduction Science, v.49, p , GINTHER, O.J. Reproductive Biology of the Mare. Ann Arbor: McNaughton, p. GINTHER, O.J.; BERGFELT, D.R.; KULICK, L.J. et al. Selection of the dominant follicle in cattle: establishment of follicle deviation in less than 8 hours through depression of FSH concentrations. Theriogenology, v.52, p ,1999. GINTHER, O.J.; KNOPF, L.; KASTELIC, J.P. Temporal associations among ovarian events in cattle during oestrus cycle with two and three follicular waves. Theriogenology, v.87, n.1, p , GREGORY, R.M; ROCHA, D.C. Protocolos de sincronização e indução de estros em vacas de corte na Rio Grande do Sul. In: 1 Simpósio Internacional de Reprodução Animal Aplicada, 2004, Londrina, PR. Anais... Londrina: Hotel Sumatra. p.56-81, KASTELIC, J.P.; GINTHER, O.J. Factors affecting the origin of the ovulatory follicle in heifers with induced luteolysis. Animal of Reproduction Science, v.26, p.13-24, LAMMOGLIA, M.A; SHORT, E.E; BELLOWS, S.E. et al. Induced and synchronized estrus in cattle: Dose titration of Estradiol benzoate in peripubertal heifers and apostpartum cows after treatment with an intravaginal progesterone-releasing insert and prostaglandin. Journal of Animal Science, v.76, p , LOPES, F.L.; ARNOLD, D.R.; WILLIAMS, J. et al. Use of estradiol cypionate for timed insemation. Journal of Dairy Science, v.83, p.216, LOPEZ, J.P.S. Ovarian and hormonal events during synchronization of ovulation and timed appointment breeding of Bos indicus- influenced cattle using intravaginal progesterone, GnRH and prostaglandin F 2α. Master of Science. Texas A&M University, 96p, Martínez MF, Kastelic JP, Bó GA, Caccia M, Mapletoft RJ. Effects of oestradiol and some of its esters on gonadotrophin release and ovarian follicular dynamics in CIDR- reated beef cattle. Anim Reprod Sci; 86:37-52, MACMILLAN, K.L.; BRUKE, C.R. effects of estrous cycle control of reproductive efficiency. Animal of Reproduction Science, v.42, n.1-2, p , MACMILLAN, K.L.; PETERSON, A.J. A new intravaginal progesterone releasing device for cattle (CIDR- B) for oestrus synchronization, increasing pregnancy rates and the treatment of postpartum anoestrus. Animal Reproduction Science, v.33, n.1-4, p.1-25,

20 MAPLETOFT, R.J; BÓ, A.G.; ADAMS, G.P. Advances in the manipulation of donor and recipient estrous cycle in bovine embryo transfer programs. Arquivos Faculdade Veterinária UFRGS, v.28, n.1, p.23-48, MARTÍNEZ, M.F.; COLAZO, M.G.; KASTELIC, J.P. et al. Effects of estradiol and progesterone on plasma steroid and gonadotropin concentrations in CIDR-treated ovariectomized cows. Theriogenology, v.59, p.224, MARTÍNEZ, M.F.; KASTELIC, J.P.; BÓ, G.A. et al. Effects of oestradiol and some of its esters on gonadotrophin release and ovarian follicular dynamics in CIDR- reated beef cattle. Animal of Reproduction Science, v.86, p.37-52, MCDOUGALL, S. Postpartum anoestrum in the pasture grazed New Zealand dairy cow. Tese de PhD. Massey University, New Zealand MORAES, J.C.F.; SOUZA, C.J.H.; GONÇALVES, P.B.D. Controle do estro e da ovulação em bovinos e ovinos. In: P.B.D. Gonçalves, J.R. Figueiredo, V.J.F. Freitas. Biotécnicas aplicadas à reprodução animal. São Paulo, Livraria Varela, MURRAY, A.J.; CAVALIERI, J.; D'OCCHIO, M.J. et al. Treatment with progesterone and 17 betaoestradiol to induce emergence of a newly-recruited dominant ovulatory follicle during oestrus synchronisation with long-term use of norgestomet in Brahman heifers. Animal of Reproduction Science, v.50, p.11-26,1998. NATION, D.P.; BURKE, C.R.; PARTON, G. et al. Hormonal and ovarian responses to a 5-day progesterone treatment in anoestrous dairy cows in the third week post- partum. Animal of Reproduction Science, v.63, p.13 25, ODDE, K.G. A review of synchronization of estrus in postpartum cattle. Journal of Animal Science, v.68, p , PAPKOFF, H. Chemical and properties of the subunits of pregnant mare serum gonadotropin. Biochemical and Biophysical Research Communications, v.58, n.2, p , PERRY, G.A.; KOJIMA, F.N.; SSLFEN, B.E. Effect of an orally active progestin on follicular dynamics in cycling and anestrous postpartum beef cows. Journal of Animal Science, v.80, p , PERRY, G.A.; SMITH M.F.; GEARY, T.W. Ability of intravaginal progesterone inserts and melengestrol acetate to induce estrous cycles in postpartum beef cows. Journal of Animal Science, v.82, p , PURSLEY, J.R.; MEE, M.O.; WILTBANK, M.C. Synchronization of ovulation in dairy cows using PGF 2α and GnRH. Theriogenology, v.44, n.7, p , REICHENBACH, H.D.; OLIVEIRA, M.A.L.; LIMA, P.F. et al. Transferência e criopreservação de embriões bovinos. In: GONÇALVES, P.B.D.; FIGUEIREDO, J.R.; FREITAS, V.J.F. (Eds). Biotécnicas Aplicadas à Reprodução Animal, São Paulo: Livraria Varela, p , ROCHE, J.F.; CROWE, M.A.; BOLAND, M.P. Postpartum anestrus in dairy and beef cows. Animal Reproduction Science, v.28, n.1-4, p , SCHMIDT, G.H. Effect of length of calving intervals on income over feed and variable costs. Journal of Dairy Science, v.72, n.6, p.1605, STEVENSON, J.S.; LAMB, G.C.; JOHNSON, S.K. et al. Supplemental norgestomet, progesterone, or melengestrol acetate increases pregnancy rates in suckled beef cows after timed inseminations Journal of Animal Science, v.81, p , STEWART, J.M; ALLEN, W.R. Biological functions and receptor binding activities of equine chorionic gonadotropihins. Journal of Reproduction and Fertility, v.62, n.2, p , TECNOPEC. TWAGIRAMUNGU, H., GUIBAULT, L.A., DUFOUR, J.J. Synchronization of ovarian follicular waves with a gonadotropin-releasing hormone agonist to increase the precision of estrus in cattle: a review. Journal of Animal Science;73: , VALLE, E.R.do. O ciclo estral de bovlnos e métodos de controle. Campo.Grande : EMBRAPA- -CNPGC, 24p VON EULER, U.S. The First Heymans Memorial Lecture, Ghent, March 24, Some aspects of the actions of prostaglandins. Arch Int Pharmacodyn Ther, p , WEEMS, C.W.; WEEMS, Y.S.; RANDEL, R.D. Prostaglandins and reproduction in female farm animals. The Veterinary Journal, v.17, p ,