CONTROLE DE COPIA: PT-LB-BQ-010 BILIRRUBINA TOTAL 22/10/2015
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- João do Amaral Bugalho
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1 1/6 1. INTRODUÇÃO A bilirrubina é o produto da quebra da hemoglobina. Depois de formada pelo sistema reticuloendotelial, ela circula no sangue sob a forma não-conjugada ligada à albumina (bilirrubina indireta). Esta fração da bilirrubina chega aos sinusóides hepáticos, nos quais, após conjugação com ácido glicurônico, se transforma em bilirrubina conjugada ou bilirrubina direta. As causas mais comuns de aumento da bilirrubina direta são as doenças hepatocelulares e das vias biliares, tais como, hepatites, colangites, colecistites, neoplasias, cirrose, alcoolismo, obstrução biliar intra ou extra-hepática, mononucleose infecciosa. A bilirrubina direta é solúvel em água e, quando sua concentração encontra-se elevada no soro, esta torna-se positiva na urina. 2. NOME DO TESTE E SINONÍMIAS Bilirrubina total 3. ABRANGÊNCIA Setor de Imunoquímica. 4. PRINCÍPIO DO MÉTODO A bilirrubina direta presente na amostra reage com o ácido sulfanílico diazotado, originando um complexo colorido que se pode determinar espectrofotometricamente. A cetrimida solubiliza a bilirrubina indireta permitindo a sua reação juntamente a fração direta. Os termos diretos e totais referem-se às características da reação na presença ou ausência de solubilizantes (aceleradores). As bilirrubinas diretas e indiretas equivalem de forma aproximada as frações conjugadas e não conjugadas. 5. APLICAÇÃO CLÍNICA O aumento da bilirrubina indireta indica: a. aumento da produção (hemólise); b. diminuição do transporte (anticorpos e medicamentos); c. defeito da captação (deficiência ou bloqueio das ligandinas); d. defeito da conjugação (doença de Gilbert, entre outras). As causas mais comuns de aumento da bilirrubina direta são as doenças hepatocelulares e das vias biliares, tais como, hepatites, colangites, colecistites, neoplasias, cirrose, alcoolismo, obstrução biliar intra ou extrahepática, mononucleose infecciosa. A bilirrubina direta é solúvel em água e, quando sua concentração encontra-se elevada no soro, esta torna-se positiva na urina. O aumento da bilirrubina indireta indica: aumento da produção (hemólise), diminuição do transporte (anticorpos e medicamentos); defeito da captação (deficiência ou bloqueio das ligandinas) e defeito da conjugação (doença de Gilbert, entre outras). 6. AMOSTRA
2 2/6 a) Tipo de amostra: O soro ou o plasma com heparina/citrato/edta são os tipos de amostra recomendados para este ensaio. b) Quantidade mínima de amostra necessária: Quantidade ideal de 1,0mL e mínima de 0,5mL. c) Restrições e critérios para rejeição de amostras: Amostras que apresentarem hemólise, lipemia, icterícia excessiva e/ou transporte inadequado serão rejeitadas e uma nova amostra será solicitada. d) Condições de acondicionamento das amostras inclusive seu período de guarda: 2 a 8 C por quatro dias. e) Procedimentos de tratamento ou pré-tratamento da amostra: NÃO SE APLICA. f) Preparo do paciente: Conforme Pop Orientação de preparo e coleta de amostras (cód. PO-LB-CO-005). g) Transporte da amostra: Vide o PO Manuseio de Transporte de Amostras Biológicas (cód. PO-LB-CO-006). 7. BIOSSEGURANÇA Utilizar o EPI (Equipamento de Proteção Individual) comum a toda área técnica sendo eles: jaleco, luva, propé e touca, conforme descrito no PO Orientações de Biossegurança (Cód. PO-LB-CQ-001) em vigor. 8. MATERIAIS E EQUIPAMENTOS a) Equipamentos ADVIA 1800 Siemens. Centrifuga b) Materiais Pipetas automáticas e ponteiras
3 3/6 c) Reagentes: KIT Bilirrubina Total ADVIA REF a. Reagente 1: Conservar em geladeira. Estável até a data indicada no rótulo dos reagentes. b. Reagente 2:. Conservar em geladeira. Estável até a data indicada no rótulo dos reagentes. c. Reagente de uso: Proporção de 30 partes do reagente 1 com 1 parte do reagente 2. Estável por 1 mês se conservado em geladeira. 9. CALIBRAÇÃO Ver procedimento de calibração e operação do ADVIA Calibrador: Deve ser utilizado o calibrador sempre que o sistema de análise necessite de calibração ou ajuste. 10. CONTROLE DE QUALIDADE a) Controle de qualidade Interno Conforme descrito no plano da qualidade do setor Imunoquímica (Cód. PQ-LB-IQ-001). b) Controle de qualidade externo Conforme descrito no plano da qualidade do setor Imunoquímica (Cód. PQ-LB-IQ-001). 11. PROCEDIMENTO TÉCNICO Ver PE de operação do ADVIA 1800 (Cód. PE-LB-IQ-002). a)limites de Detecção/Sensibilidade: 0,1mg/dL b)linearidade: 35mg/dL c) Intervalo reportável (CRR): 0 a 35mg/dL. Diluir a amostra até obter resultado dentro da linearidade. A diluição deve ser feita com água destilada e repetir a medição. O valor encontrado deve ser multiplicado pelo fator utilizado. d) Valores críticos: > 15mg/dL. Enfermidade hepatobiliar, produzida predominantemente por viroses hepatotrópicas com risco de contágio. Em recém-nascidos a termo risco de quernicteros. e) Especificidade: não se aplica f) Carryover: Verificação do sistema interno de pipetagem, escolha de um soro alterado e analito seguido da passagem do branco. Peridiocidade de 6 em 6 meses procedimento descrito no formulário Controle de Carryover do Equipamento (cód. LAB-093-VR01). 12. CÁLCULOS Os resultados fornecidos pelo autoanalisador, são calculados a partir da multiplicação do Fator de Calibração(obtido da razão da concentração do analito no Calibrador Bioquímico multiparamétrico SIEMENS
4 4/6 sobre sua absorbância) pelos valores de absorbância das amostras. Os resultados são fornecidos em valores quantitativos na unidade mg/dl 13. REGISTRO DOS RESULTADOS Resultados interfaceados e armazenados pelo sistema Centralink, conforme POP SOFTWARE ADVIA CENTRALINK (cód. PO-LB-CT-002). 14. PROCEDIMENTOS EM CASOS DE RESULTADOS ANORMAIS Verificam-se dados clínicos, medicamentos e histórico do paciente. Se necessário o ensaio é repetido e informa-se no laudo analítico que o resultado foi repetido e confirmado na amostra. Comunicar ao medico que solicitou por via telefônica, os resultados discrepantes e anotar no formulário Programa de Diagnóstico Laboratorial Baseado em Evidências (cod. LAB-121-VR01). 15.VALORES DE REFERÊNCIA Soro Bilirrubina total: 0,5 a 1,5 mg/dl a. Bilirrubina direta: 0,1 a 0,5mg/dL Líquido amniótico Idade gestacional b. 15 semanas: até 0,13 mg/dl c. 25 semanas: até 0,14 mg/dl d. 40 semanas: até 0,04 mg/dl 16.INTERFERÊNCIAS A hemólise de até 10g/L hemoglobina não interfere no teste. A lipemia com resultados de triglicerídeos > 500 mg/dl pode interferir no teste. 17. DOCUMENTOS DE REFERÊNCIA a) Bibliografia: RAVEL, Richard M.D. Aplicações clínicas dos dados laboratoriais. 6a edição, Guanabara Koogan, Rio de Janeiro, ADVIA CHEMISTRY ALBUMIN, instruções de uso. SIEMENS HEALTHCARE DIAGNOSTIC. b) Documentos complementares Manual do equipamento automatizado Bula do kit PO de Orientação de Preparo e Coleta de Amostras Biológicas (cód. PO-LB-CO-005). PO Manuseio de Transporte de Amostras Biológicas (cód. PO-LB-CO-006).
5 5/6 PO de Orientações de Biossegurança (cód. PO-LB-CQ-001) Plano da qualidade do setor de Imunoquimica (Cód. PQ-LB-IQ-001) PE de Operação do ADVIA 1800 (cód. PE-LB-IQ-002). PO Software ADVIA Centralink (cód. PO-LB-CT-002). 18. HISTÓRICO DAS REVISÕES Pg. Natureza da Revisão Data da Revisão Versão Responsáveis 1/2 Inclusão do equipamento ADVIA /08/ Leandro Lago 1-3 Pop recodificado, codificação anterior PO-LB-BQ /08/ Procedimento adequado para atender ao item 5.3 da Norma PALC, versão Procedimento adequado para atender ao item 5.3 da Norma PALC, versão 2013 Após Pré auditoria. Ana Regina e 01/08/ /01/ Procedimento revisado e sem alterações. Luciana Calmon 19. REGISTRO DE TREINAMENTO DATA NOME COMPLETO ASSINATURA
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