Staphylococcus. Gram positivo - Forma esférica; - Reacção ao método de Gram; - Ausência de endosporos

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1 Gram positivo - Forma esférica; - Reacção ao método de Gram; - Ausência de endosporos Aeróbios catalase positivos Staphylococcus, Micrococcus, Kocuria, Kytococcus e Alloiococcus; Aeróbios catalase negativos Streptococcus, Enterococcus; Anaeróbios Peptostreptococcus.. Staphylococcus Características gerais - Família das Microccacea; - Cocos em cacho, podem aparecer como células isoladas, aos pares ou em cadeias curtas; - Diâmetro entre 0.5 a 1 µm; - Imóveis; - Aeróbios ou anaeróbios facultativos; - Catalase positivos; - Crescem em meio contendo 10% de NaCl e em temperaturas q variam entre 18 a 40 ºC; - Presentes na pele e membranas mucosas dos humanos, em outros mamíferos e em aves; - Existem pelo menos 30 espécies: - Staphylococcus Aureus (coagulase +, colónias douradas) - Staphylococcus coagulase negativos

2 Factores de virulência Componentes estruturais - Cápsula: inibe a quimiotaxia e a fagocitose; inibe a proliferação de células mononuclerares; facilita a aderência a corpos estranhos; - Peptidioglicano: proporciona estabilidade osmótica; estimula a produção de pirogêneo endógeno (actividade semelhante à endotoxina); quimiotático para leucócitos (formação de abcessos); inibe a fagocitose; - Ácido teicóico: regula a concentração de catiões na membrana celular; liga-se à fibronectina; - Proteína A: inibe a eliminação dos microrganismos mediada por anticorpos através da ligação dos receptores Fc de IgG 1, IgG 2 e IgG 4 ; quimiotática para leucócitos; anticomplementar; - Membrana citoplasmática: barreira osmótica; regula o transporte para dentro e para fora da célula; sítio de enzimas biossintéticas e respiratórias; Toxinas - Citotoxinas (α, β, δ, γ, leucocidina P-V): tóxicas para muitas células, incluindo leucócitos, eritrócitos, macrófagos, plaquetas e fibroblastos; - Toxinas esfoliativas (ETA, ETB): serina proteases q clivam as pontes intercelulares na camada granulosa da epiderme; - Enterotoxinas (A-E, G-I): superantigénios (estimulam a proliferação das células Te libertação de citocinas); estimulam a libertação de mediadores inflamatórios nos mastócitos, aumentam o peristaltismo intestinal e a perda de líquidos, bem como náusea e vomito; - Toxina 1 da Síndroma do Choque Tóxico: superantigénio ( estimula a proliferação de células T e a libertação de citocinas); produz extravasamento ou a destruição das células endoteliais.

3 Enzimas - Coagulase: converte fibrinogénio em fibrina; - Catalase: catalisa a remoção do peróxido de hidrogénio; - Hialuronidase: hidrolisa o ácido hialurónico no tecido conjuntivo, promovendo a disseminação dos Staphylococcus nos tecidos; - Fibrinolisina: dissolve coágulos de fibrina; - Lipases: hidrolisa lipideos; - Nucleases: hidrolisa DNA; - Penicilinase: hidrolisa penicilinas. Epidemiologia - Coagulase negativos presentes sobre a pele de todas as pessoas, também presentes na orofaringe e nos tratos gastrointestinal e urogenital; - Colonização transitória de Staphylococcus Aureus nas dobras cutâneas húmidas é comum; - Colonização do coto umbilical, da pele e da área perineal dos recém-nascidos por Staphylococcus Aureus; - O estado de portador a curto prazo ou persistente de crianças de mais idade e adultos é mais comum na nasofaringe anterior do que na orofaringe; - 15% dos adultos sadios normais são portadores persistentes de Staphylococcus Aureus na nasofaringe, com maior incidência em pacientes hospitalizados, equipa médica, pessoas com doenças cutâneas eczematosas e pessoas q utilizam agulhas de modo ilícito ou por razões médicas; - Sensíveis a altas temperaturas e a desinfectantes e soluções anti-sépticas; - Pode sobreviver, por longos períodos, em superfícies secas; - Transmissão pode ocorrer de modo directo ou indirecto (por exemplo roupas);

4 Síndromas clínicos Staphylococcus Aureus: - Síndroma da Pele Escaldada por Staphylococcus (sinal de Nikolsky; impetigo bolhoso); - Síndroma do choque tóxico; - Infecções cutâneas; - Bacteremia e Endocardite; - Pneumonia e Empiema; - Osteomielite e Artrite Séptica; Staphylococcus epidermis e outros Staphylococcus coagulase negativos - Endocardite - Infecções de Cateteres e Derivações; - Infecções de Próteses Articulares; - Infecções das vias urinárias. Diagnóstico laboratorial Recolha: - Raspagem da base de um abcesso com uma zaragatoa, seguindo-se a coloração pelo método de Gram; - Pus aspirado, tem uma pequena quantidade de microrganismos, logo não é o melhor método; - Sangue, também possui poucos microrganismos, mas pode ser utilizado realizando uma cultura.

5 Cultura: - Meio de cultura: Agar Sangue; - Staphylococcus Aureus: cresce no meio Agar Manitol Sal (o Manitol é fermentado pelo Staphylococcus Aureus, mas não pela maioria dos Staphylococcus; o Sal inibe o crescimento da maioria dos microrganismos, mas o Staphylococcus Aureus); - Crescem rapidamente em meios de cultura não selectivos, tanto em condições aeróbias quanto anaeróbias, com formação de grandes colónias lisas em 24h; Identificação: - Prova da Catalase: a enzima catalase desdobra o peróxido de hidrogénio em água e oxigénio (borbulhar positivo); meio de Agar Sangue pode dar falsos positivos; culturas com mais de 24h podem dar falsos negativos; - Prova da Coagulase: pode ser feito em lâmina (10-15segundos) ou em tubo (4h); a Coagulase actua sobre o fibrinogénio transformando-o em fibrina, logo caso se verifique aglutinação o teste é positivo (Staphylococcus Aureus); só válido para estirpes que não apresente autoaglutinação; - Prova da DNase: positivo quando ocorre transparentização do Agar em volta das colónias, o DNA não hidrolisado aparece mais opaco; - Prova da Gelatinase: determinados microrganismos têm capacidade para produzir a gelatinase, que actua hidrolisando a gelatina em aminoácidos; a hidrólise da gelatina é uma característica importante na diferenciação dos microrganismos e pode também ser usada para determinar a sua patogenicidade; se a gelatina foi hidrolisada pela gelatinase, o meio mantém-se liquido após refrigeração;

6 - Provas de sensibilidade à Novobiocina: o Staphylococcus saprophyticus (coagulase negativo) é resistente à Novobiocina; o teste é realizado colocando um disco de Novobiocina na placa; se a zona de inibição for menor ou igual a 16mm indica resistência.