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1 1 ISOLAMENTO E PERFIL DE SUSCETIBILIDADE DE BACTÉRIAS EM AMOSTRAS BIOLÓGICAS DE CÃES ISOLATION AND PROFILE OF BACTERIAL SUSCEPTIBILITY IN BIOLOGICAL SAMPLES OF DOGS Claudio Douglas GUIMARÃES 1 ; Hérika Regina SANTIAGO 2, Yvana Rezende HADAD 3, Maridelzira Moraes DAVID 4 ; Luiz Moraes MOREIRA 4 1Residente de Clínica Cirúrgica, Universidade Federal Rural da Amazônia, cdoguimaraes@gmail.com 2Residente de Anestesiologia da Universidade Federal Rural da Amazônia 4Discente de graduação em Medicina Veterinária da Universidade Federal Rural da Amazônia Resumo: Infecções bacterianas são de grande importância na medicina veterinária devido à grande frequência dessas afecções nos atendimentos de rotina. Este estudo objetivou identificar e determinar perfil de suscetibilidade de bactérias isoladas em amostras biológicas de cães, encaminhadas para análise em um Laboratório Clínico de Belém, Pará, Brasil. Foram analisadas 59 amostras biológicas, sendo 34 amostras de secreção otológica e 25 amostras de urina. O principal agente bacteriano identificado em secreções otológicas foi Staphylococcus sp., enquanto que em amostras de urina Escherichia coli. Dentre os antimicrobianos testados a amicacina, ampicilina, ceftriaxona e imipenem obtiveram os melhores resultados de ação frente os isolados bacterianos. Palavras-chave: Infecção; Bactéria; Cães. Keywords: Infection; Bacterial; Dogs. Introdução: Entre as enfermidades bacterianas que acometem os animais, a otite externa é uma das doenças mais comuns encontradas na prática veterinária, afetando cerca de 5 a 20% dos cães, sendo caracterizada como um processo inflamatório agudo ou crônico do epitélio do meato auditivo, na qual a etiologia é multifatorial (PENNA et al., 2009; ALMEIDA et al., 2016). Em menor escala, infecções do trato urinário (ITUs) também são responsáveis por grande parte dos atendimentos veterinários nesta espécie, resultantes principalmente de infecções ascendentes causadas por bactérias oportunistas, na maioria das vezes provenientes da microbiota intestinal (LOW et al., 1988; GIEG et al., 2008). Em ambos os casos o diagnóstico clínico deve ser baseado na anamnese e nos achados de exame físico detalhado, porém o conhecimento do agente etiológico a partir de bacterioscopia, cultura e teste de Anais do 38º CBA, p.2163

2 2 sensibilidade aos antimicrobianos são essenciais para o tratamento da doença e consequente diminuição do uso de terapia empírica (SILVEIRA et al., 2008). Sendo assim, o presente estudo teve como objetivo identificar os agentes bacterianos presentes em amostras biológicas de cães. Metodologia: Foram analisadas 59 amostras biológicas (secreção otológica e urina) de cães em um laboratório particular de Belém, Pará, provenientes de várias clínicas localizadas na região metropolitana da capital no período de janeiro a agosto de As amostras de secreção otológica e urina foram analisadas apenas quando coletadas e armazenadas em swabs e recipientes estéreis, respectivamente. O isolamento bacteriano foi realizado a partir do semeio do material em meios específicos, tais como Ágar MacConkey, Ágar Cromogênico e Ágar Sangue e incubados a 36 C por 24 horas. Após a incubação e crescimento microbiano, foram observados o tamanho, a cor e a morfologia das colônias que obtiveram crescimento positivo. As bactérias Gram negativas isoladas foram identificadas em meios diferenciais, como ágar TSI, caldo Vermelho de Metila, caldo Voges-Proskauer, Ágar Citrato de Simmons, Ágar Motilidade Teste, Ágar Fenilalanina, Ágar Lisina, caldo Indol e caldo Nitrato. Já as bactérias Gram positivas foram submetidas às provas da catalase e da coagulase. Para determinação da susceptibilidade aos antimicrobianos foi utilizado o método de difusão em Ágar Muller Hinton, segundo os critérios recomendados pelo Clinical and Laboratory Standards Intitute, sendo testados os seguintes antimicrobianos: gentamicina, amicacina, amoxicilina, ampicilina, imipenem, cefalotina, cefuroxina, ceftriaxona, cloranfenicol, norfloxacino, ciprofloxacino, levofloxacino, clindamicina, azitromicina e sulfonamida. Os dados obtidos foram planificados e analisados através de estatística descritiva simples no programa Microsoft Office Excel Resultados e Discussão: Do total de amostras (n=59) analisadas, 34 corresponderam à secreção otológica (58%) e 25 à amostras de urina (42%), sendo observada predominância de amostras biológicas provenientes de machos (n=33; 56%) em relação às fêmeas (n=26; 44%). Considerando o tipo de amostra por raça, foi possível constatar que cães SRDs contribuíram com o maior número de material biológico, tanto otológico quanto urina (n=16; 28%), seguidas de Poodles (n=11; 19%), Shih-Tzu (n=5; 8%); Anais do 38º CBA, p.2164

3 3 Schnauzer (n=5; 8%), Pit Bull (n=4; 7%), Cocker Spaniel (n=4; 7%), Yorkshire Terrier (n=3; 5%), Pinsher (n=3; 5%), Husky Siberiano (n=2; 3%), Maltês (n=2; 3%), Labrador Retriever (n=1; 2%), Pug (n=1; 2%), Basset Hound (n=1; 2%) e Fox Paulistinha (n=1; 2%). A maior frequência de cães SRDs pode estar relacionada ao fato deste grupo representar a maior parcela da população canina e, consequentemente, responderem pela maioria dos atendimentos veterinários (GRIFFIN, 1996). Observou-se, maior frequência de infecções causadas por bactérias Gram positivas (n=37; 63%) em relação às Gram negativas (n=22; 37%). Isso se deve, especialmente, ao tipo de amostra analisada, pois assim como identificado por Tunon et al. (2008), Ishii et al. (2011) e Martins et al. (2011), as bactérias Gram positivas estão entre as mais frequentes causadoras de otites e isoladas em culturas provenientes de secreção otológica de cães, principal tipo de amostra analisada neste estudo. Entre as bactérias Gram positivas encontradas figuram Staphylococcus sp. (n=23; 39,0%), Staphylococcus aureus (n=6; 10,1%), Enterococcus sp. (n=4; 6,8%) e Streptococcus sp. (n=4; 6,8%). Já entre as bactérias Gram negativas, Escherichia coli (n=18; 30,5%) e Proteus mirabilis (n=4; 6,8%) foram isoladas, corroborando com dados disponíveis na literatura (TUNON et al., 2008; ISHII et al., 2011; MARTINS et al., 2011). Quando analisados os agentes em cada tipo de amostra, verificou-se que Staphylococcus sp. foi isolado em 8 (23,5%) amostras de secreção otológica (n=18; 52,9%), seguido de E. coli (n=8; 23,5%), S. aureus (n=3; 8,8%); P. mirabilis (n=2; 5,9%), Streptococcus sp. (n=2; 5,9%) e Enterococcus sp. (n=1; 2,9%). Como observado por Martins et al. (2011) e Tunon et al. (2008), Staphylococcus sp., principal agente isolado nas amostras de secreção otológica, figura como o microorganismo responsável pela maioria dos casos de otites bacterianas. Já de acordo com Ishii (2011), o mesmo agente foi isolado em diferentes tipos de amostras biológicas, participando, portanto, de processos infecciosos em diferentes sítios orgânicos, o que ilustra sua importância na medicina veterinária. Em amostras de urina, o principal microrganismo encontrado foi E. coli, bactéria mais frequente nas ITUs (FERREIRA et al., 2014), seguida de Staphylococcus sp. (n=5; 20%), S. aureus (n=3; 12%), Enterococcus sp (n=3; 12%), P. mirabilis (n=2; 8%) e Streptococcus sp (n=2; 8%). Segundo Gieg et al. (2008), as ITUs devem-se principalmente à infecções ascendentes causadas por bactérias Anais do 38º CBA, p.2165

4 4 presentes nas fezes, levando à contaminação de sítios como vulva, vestíbulo ou prepúcio, alterando a microbiota normal, resultando processos infecciosos. Além disso, de acordo com Clermont et al. (2000), E. coli é o agente com maior capacidade de causar infecções urinárias em função da existência de fatores de virulência bacteriana, principalmente por cepas pertencentes aos grupos filogenéticos B2 e D, fatores que justificam sua elevada frequência em uroculturas. Quanto ao perfil de sensibilidade, amicacina, ampicilina, ceftriaxona e imipenem foram os agentes que obtiveram melhores resultados por apresentarem 100% de sensibilidade para, pelo menos, três agentes microbianos. Em contrapartida, a azitromicina obteve os piores resultados de sensibilidade, não inibindo o crescimento de cinco dos seis microorganismos isolados. Conclusão: Foi possível identificar que Staphylococcus sp. e E. coli foram os principais agentes isolados em secreção otológica e amostras de urina, respectivamente, o que ilustra a relevância desses micro-organismos em processos infecciosos em cães. Além disso, amicacina, ampicilina, ceftriaxona e imipenem obtiveram os melhores resultados de sensibilidade entre os antibióticos testados. Ressalta-se a importância de estudos que priorizem as diferentes cepas envolvidas em infecções bacterianas associadas à realização de antibiograma. Referências: ALMEIDA, M.S.; SANTOS, S.B.; MOTA, S.R.; DA SILVA, L.T.R.; SILVA, L.B.G.; MOTA, R.A Isolamento microbiológico do canal auditivo de cães saudáveis e com otite externa na região metropolitana de Recife, Pernambuco. Pesquisa Veterinária Brasileira, v.36, n.1, p , janeiro, CLERMONT, O.; BONARCOSI, S.; BINGEN, E. Rapid and simple determination of the Escherichia coli phylogenetic group. App Environ Microbiol, v.66, n.1, p , FERREIRA, M.C.; NOBRE, D.; OLIVEIRA, M.G.X.; OLIVEIRA, C.V.; CUNHA, M.P.V.; MEÑAO, M.C.; DELLOVA, C.A.; KNOBL, T. Agentes bacterianos isolados de cães e gatos com infecção urinária: perfil de sensibilidade aos antimicrobianos. Atas de Saúde Ambiental, v.2, n.2, p.29-37, FORRESTER, S.D. Nefropatias e ureteropatias. In: BIRCHARD, S. J.; SHERDING, G. Manual Saunders: Clínica de Pequenos Animais.2 ed. São Paulo: Roca. 2003, 2072 p. Anais do 38º CBA, p.2166

5 5 GIEG, J.; CHEW, D.J.; MCLOUGHLIN, M.A Doenças da bexiga. In: BIRCHARD, S.J.; SHERDING, R.G. Manual Saunders: Clínica de Pequenos Animais. 3 Ed. São Paulo: Roca, p , GRIFFIN, C. E. Malassezia paranychia in atopic dog. In: Proceedings of the 12th meeting of the American College of Veterinary Dermatology, 5152, ISHII, J.B.; FREITAS, J.C.; ARIAS, M.V.B. Resistência de bactérias isoladas de cães e gatos no Hospital Veterinário da Universidade Estadual de Londrina ( ). Pesquisa Veterinária Brasileira, v.31, n.06, p , LOW, D.A.; BRAATEN, B.A.; LING, G.V.; JOHNSON, D.L., RUBY, A.L. Isolation and comparison of Escherichia coli strains from canine and human patients with urinary tract infections. Infection Immunology, v.56, p , MARTINS, E.A.; MOMESSO, C.S.; NARDO, C.D.D.; CASTRO, K.F.; ATIQUES, T.S.C.; NETTO, H.A.; FURINI, A.A.C. Estudo clínico e microbiológico de otite externa de cães atendidos em hospital veterinário do noroeste paulista. Acta Veterinaria Brasilica, v.5, n.1, p.61-67, PENNA, B.; VARGES, R.; MEDEIROS, L.; MARTINS, G.M.; MARTINS, R.R.; LILENBAUN, W. Species distribution and antimicrobial susceptibility of staphylococci isolated from canine otitis externa. Veterinary Dermatology, v.21, p , SANTOS, R.R. Sensitivity in vitro of the microbiota of the ear of dogs with otitis externa to five antimicrobials. Acta Scientiae Veterinarie, v.35, supl2, p , SILVEIRA, A.C.P.; ROLDÃO, C.D.R.; RIBEIRO, S.C.A.; FREITAS, P.F.A. Aerobic bacterial flora of the canine otitis. Revista Portuguesa de Ciencias Veterinarias., v.103, p , TUNON, G.I.L.; SILVA, E.P.; FAIERSTEIN, C.C. Isolamento de estafilococos multirresistentes de otites em cães e sua importância para saúde pública. Bepa, v.5, p.4-7, WOLFFENBUTTEL, S. Nefropatias e Distúrbios Eletrolíticos em Cães p. Dissertação (Pós-graduação em Ciências Veterinárias) Universidade Federal do Rio Grande do Sul. Anais do 38º CBA, p.2167

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