Múmia de Ramsés V com marcas sugestivas de varíola

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1 Varíola

2 Múmia de Ramsés V com marcas sugestivas de varíola

3 Varíola: a primeira arma biológica? Hernan Cortez ( )

4 Londres, 1844

5 POXVIRIDAE - os maiores vírus conhecidos (~ 300 nm) - simetria complexa - DNA duplo (codifica > 100 prots) - multiplicação intracitoplásmica Varíola Molusco contagioso Ectima dos ovinos Vários outros poxvírus

6 HISTÓRICO -Edward Jenner ( ) pai da vacinação PRIMEIRA VACINAÇÃO: 1798

7 VARÍOLA

8 VARÍOLA x VARICELA

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11 -OMS (1980): Declara erradicada a varíola

12 O que é uma vacina? -Visa induzir resposta imune (imunógeno) - capaz de proteger o indivíduo frente a uma agressão - Nem todos antígenos são bons imunógenos; - Para uma boa vacina, muitas vezes são necessários adjuvantes (ex. adj. Freund).

13 Resposta imune ativa: Resposta IMUNE - Naturalmente adquirida (infecção) - Artificialmente adquirida (vacina) Resposta imune passiva Naturalmente adquirida: - placenta - colostro Artificialmente adquirida - soros (preparados contendo anticorpos policlonais) - anticorpos monoclonais

14 Imunidade humoral adquirida Vírus neutralizado B Célula infectada com vírus Anticorpo reconhecido por LT com receptor Fc

15 Imunidade celular perforinas necrose CD8 Gatilho da Apoptose apoptose CD4 citocinas Vírus eliminado

16 PROPRIEDADES DA VACINA IDEAL: 1- IMUNOGÊNICA 2- INÓCUA 3- ESTÁVEL 4- ECONÔMICA

17 Tipos de Vacinas: Inativadas: Vacinas mortas ou inativadas (microrganismos inativados). Vacinas c/ microrganismos inteiros Vacinas de subunidades (convencionais ou recombinantes)

18 INATIVANTES Proteotrópicos: ex: formalina Nucleotrópicos: ex: beta-propiolactona, AEI, BEI Universais: ex: raios X, gama, UV.

19 Tipos de Vacinas: Vivas: Atenuadas: - microrganismos atenuados por passagens em cultivo ou animais de laboratório. - - capacidade de causar doença eliminada ou reduzida -capazes de multiplicarem-se no organismo - não necessitam grandes quantidades de antígeno Vacinas produzidas por Engenharia Genética : 1- Vacinas geneticamente modificadas: - Genes excluidos (ou incluidos) com vistas à atenuação ou aumento da resposta imune - podem ser atenuadas ou inativadas. ex: vacina diferencial ge-negativa 2- Vacinas com Vetores vacinais: - microrganismos manipulados para produzir antígenos que desencadeiam a produção de anticorpos protetores. 3- Vacinas de DNA: DNA de interesse administrado ao hospedeiro. (ainda experimental)

20 Vacinas produzidas por Engenharia Genética : 4- Vacinas em plantas/alimentos: plantas com genes de interesse introduzidos no genoma capazes de sintetizar a proteína e produzir anticorpos em animais que ingerem a planta. 5- Vacinas sintéticas: antígenos sintetizados artificialmente. Geralmente baixo poder imunogenico em função da conformação do antígeno

21 Uma amostra vacinal recombinante brasileira: Vacina diferencial ge - A. C. Franco et al. vacinados Infectados

22 Estratégia de deleção da ge a) U L U S gi ge US9 b) c) P1 P2 P bp 750 bp P4 d) PstI PstI Co-transfecção com o DNA viral em células Ebtr pcr2.1 Detecção do vírus recombinante por imunoperoxidase sobre células infectadas

23 ELISA DIFERENCIAL BHV-1 ge + (Infectado) ge - (Vacinado)

24 Em andamento: Vírus vacinal ge- contendo o gene imunodominante do vírus v rábico r (gene G ) vacinados Infectados

25 Vacinas inativadas x atenuadas: Inativadas: - não se multiplicam no organismo - maior massa antigênica - mais caras - adjuvantes - imunizações freqüentes Atenuadas / vírus vivo modificado - vírus se multiplica no organismo - melhor imunidade - menor massa antigênica - mais baratas

26 Vacinas Atenuadas x inativadas Vacina Vantagens Desvantagens Atenuada (viva/ modificada) Mimetiza infecção natural Imunidade duradoura Melhor imun. celular Altas taxas de soroconversão Títulos mais altos Lábil Pode causar doença ou efeitos adversos Inativada morta, subunidade Estável, segura Imunidade curta Pode requerer reforços freqüentes Massa antigênica grande

27 Efeito da vacinação e doses de reforço nos níveis n de anticorpos Nível de anticorpos 2 a 3 a 4 a tempo 1 a

28 POLIOMIELITE Três tipos de vírus: 1, 2, 3 Paralisia progressiva ascendente Muitas degenerações neurológicas permanentes Membro mais movimentado mais afetado Morte por paralisia respiratória

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31 Vacinas contra a poliomielite Vacina inativada intramuscular ( vacina tipo Salk) - vírus inativado com formalina (3 sorotipos). - induz anticorpos séricos, não induz imunidade local e assim não - previne infecção local no intestino. - previne a poliomielite paralisante pois a viremia não ocorre. - casos de síndrome de Guillain-Barré Vacina Oral ( vacina Sabin) - amostras de vírus dos 3 sorotipos, atenuadas. - induz imunidade local no intestino com produção de IgA, assim como boa imunidade sistêmica. - raramente pode causar poliomielite paralítica (~ 1 caso em 3 milhões de doses).

32 Produção de vacina para Influenza: Inoculação em ovos embrionados Inoculação na membrana corioalantóica Casc a Albumina Cavidade amniótica Gema Membrana da casca Saco aéreo Inoculação amniótica Inoculação na gema Inoculação alantóica Cavidade alantóica Membrana corioalantóica

33 Influenza - HA

34 Toxóides: - São toxinas cuja toxicidade é eliminada - Retém a capacidade antigênica Ex: toxóide tetânico

35 Adjuvantes São substâncias adicionadas à vacina com o objetivo de aumentar a resposta imune. Ex: Hidróxido de alumínio (alúmem) Saponinas Adjuvante de Freund (completo / incompleto) Adjuvantes oleosos sintéticos ( Marcol Adjuvantes do futuro: Seqüências de nucleotídeos Interleucinas, Interferon gama Genes de estimuladores de IL e outras citocinas Lipossomos

36 D.O. % - Ig G 1 D.O. % CONTROLE BHV-1 EXT. AQ. CASCAS EXT. AQ. FOLHAS EXT. AQ. RAMOS QB-90 ALUMÍNIO QUIL-A ÓLEO DIAS

37 O que é um soro? Soro sangüineo contendo uma grande variedade de anticorpos policlonais, usualmente obtido de animais hiperimunizados com o(s) antígeno (s) de interesse. - homólogo - heterólogo.

38 Soro Heterólogo: - Produzido em indivíduos de espécies diferentes da espécie -alvo Ex.: cavalos contra o tétano: soro anti-tetânico - Não transmite infecções aos humanos - Pode causar reações de hipersensibilidade. Podem ser submetidos à digestão péptica para separar a região Fc da região Fab do anticorpo. - Mais baratos. - Pode levar a um excesso de formação de imunocomplexos depósitos nas paredes internas dos vasos => reações inflamatórias sistêmicas.

39 Tipos de Soros Hiperimunes: Soro Homólogo: Produzido na mesma espécie-alvo. - Risco de transmissão de doenças (AIDS, Hepatites) - Menor chance de reações de hipersensibilidade. - Mais caros.

40 Anticorpos monoclonais: - Anticorpos derivados de um único linfócito produzidos em camundongos. - Produzidos usualmente em camundongos em linhagens singenéicas ex. BALB-C - podem ser humanizados pela introdução de células humanas em camundongos irradiados - Já utilizados para hepatite B e Vírus Resp. Sincicial Humano (HRSV)

41 Ana Cláudia Franco Eber A S Oliveira EVI Equipe de virologia LABVIR DM/ICBS Fernando Spilki Helena B. R. Batista Paulo A Esteves Alessandra D Ávila Rejane Schaefer Tamahine Schmidt Silvia Hübner Eduardo Caldas Marcelo Maronna Dias

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43 Construção do vírus vacinal recombinante U L U S gi ge US9 P1 P2 P3 P4 PstI PstI Co-transfecção com DNA do vírus original em células de bovino Detecção do vírus recombinante em células infectadas por imunoperoxidase

44 Efeito citopático Herpesvírus rus (coloração por imunoperoxidase)

45 Típica resposta sorológica Nível de Anticorpos D o e n ç a IgM IgG Anticorpos IgG Dias

46 Interferência por anticorpos maternos anticorpos passivos * * * janela de suscetibilidade * Nível mínimo para proteção * * interfere com vacinação semanas após o nascimento

47 EFEITO CITOPÁTICO

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