PROGRAMA DE ENSINO CÓDIGO DISCIPLINA OU ESTÁGIO SERIAÇÃO IDEAL/PERÍODO CB-14 LABORATÓRIO DE BIOQUÍMICA METABÓLICA 2ª S / 3º P

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1 PROGRAMA DE ENSINO UNIDADE UNIVERSITÁRIA: UNESP CÂMPUS DE ILHA SOLTEIRA (Resolução UNESP nº HABILITAÇÃO: OPÇÃO: DEPARTAMENTO RESPONSÁVEL: Departamento de Física e Química CÓDIGO DISCIPLINA OU ESTÁGIO SERIAÇÃO IDEAL/PERÍODO CB-14 LABORATÓRIO DE BIOQUÍMICA METABÓLICA 2ª S / 3º P OBRIGATORIA/ OPTATIVA/ ESTAGIO Obrigatória PRÉ-REQUISITO CO-REQUISITO ANUAL SEMESTRAL CB-40 Química Orgânica CB-13 Bioquímica Metabólica ( ) 1º SEM. ( X ) 2º SEM. ( ) CRÉDITOS CARGA HORÁRIA DISTRIBUIÇÃO DA CARGA HORÁRIA TOTAL TEÓRICA PRÁTICA TEÓRICO- PRÁTICA OUTRAS NÚMERO MÁXIMO DE ALUNOS POR TURMA AULAS TEÓRICAS AULAS PRÁTICAS AULAS TEÓRICO- PRÁTICAS 25 OUTRAS OBJETIVOS: (ao término da disciplina o aluno deverá ser capaz de) As atividades de laboratório têm por objetivo a aplicação da teoria na identificação e análise de macromoléculas bem como o estudo de suas propriedades físico-químicas.

2 CONTEÚDO PROGRAMÁTICO: (Título e descriminação das Unidades) 1. Técnicas de Laboratório 1.1. Material e suas características 1.2. Emprego de pipetas graduadas 1.3. Emprego de pipetas volumétricas e balão volumétrico 1.4. Operação com bureta e proveta 1.5. Operação com bico de gás 2. Análise por Neutralização 2.1. Diluição de soluções concentradas para obtenção de uma de titulo desejado 2.2. Trabalhos com indicadores para o reconhecimento do ponto de viragem 2.3. Cálculo de molaridade, normalidade e meq/l 2.4. Preparar solução padrão de NaOH 0,1000N com precisão 3. Identificação de carboidratos 3.1. Teste de Iodo 3.2. Teste de Benedict 3.3. Teste de Seliwanoff 3.4. Teste de Molish 3.5. Teste de Osazona 3.6. Identificação de carboidratos através de cromatografia em papel 4. ph e Tampões (Buffer) 4.1. Concentração de ácido e ph 4.2. Cálculos de uma solução tampão 4.3. Como preparar uma solução tampão 4.4. Demonstração do efeito tampão 5. Cromatografia de aminoácidos em papel 5.1. Cromatografia de aminoácidos padrões 5.2. Cromatografia de aminoácidos desconhecidos 6. Identificação de um aminoácido pela curva de titulação 6.1. Emprego do potenciômetro 6.2. Emprego de solução tampão para se calibrar o aparelho 7. Pesquisa qualitativa dos constituintes químicos das proteínas (ex: leite) 7.1. Extrações 7.2. Reconhecimento da porção protéica do leite 7.3. Pesquisa de glúcides redutores 7.4. Pesquisa de fósforo 7.5. Pesquisa de cálcio 7.6. Pesquisa de cloretos 7.7. Efeito da força iônica sobre a solubilidade das proteínas (clara de ovo "in natura") Solubilização ("salting in) Precipitação ("salting out") 8. Pesquisa dos constituintes do ovo 8.1. Determinação da porcentagem de proteínas na gema 8.2. Determinação da porcentagem de lipídeos na gema 8.3. Determinação da porcentagem de proteínas na clara 8.4. Determinação do valor calórico do ovo. 2

3 8.5. Determinação do ponto isoelétrico da albumina do ovo 8.6. Precipitação de albumina do ovo por diferentes agentes. 9. Extração e caracterização de lipídeos 9.1. Extração de lipídeos de semente de soja e amendoim 9.2. Caracterização (saponificação - hidrólise alcalina) de triacil - gliceróis ou triglicerídeos Propriedades dos sabões Abaixamento de tensão superficial Precipitação de ácidos graxos Precipitação de sabões de cálcio Precipitação por excesso de eletrólitros 9.3. Esteróides: caracterização e dosagem do colesterol Reação de Salkowski (qualitativa) Reação de Liebermann - Burchard (quantitativa) 10. Determinação de proteínas por colorimetria Preparação do sobrenadante de fermento Determinação da atividade da sacarase de fermento Efeito da temperatura na atividade da sacarase de fermento Efeito do ph na atividade da sacarase de fermento Efeito da [S] na atividade da sacarase de fermento. 11. Propriedades das Enzimas (cinética enzimática) Caracterização da enzima amilase salivar Influência da temperatura sobre a atividade enzimática Influência do ph sobre a atividade enzimática Especificidade enzimática Termolabilidade Influência da concentração de enzimas Influência da concentração do substrato 12. Inibição do ciclo de Krebs Análise visual da atividade metabólica celular em presença de oxigênio, utilizando-se alguns substratos e inibidores enzimáticos, tendo-se como indicador desta atividade o azul de metileno 13. Fermentação alcoólica (fermento de padaria) 14. Propriedades das Proteínas Desnaturação pelo calor Precipitação pelos agentes alcalóides Precipitação de proteínas pelos sais de metais pesados Precipitação de proteínas por sulfato de amônio Precipitação isoelétrica das proteínas METODOLOGIA DE ENSINO: - Aulas práticas realizadas em grupos de 3 a 4 alunos envolvendo ensaios relacionados com as aulas teóricas já desenvolvidas ou em desenvolvimento. Exercícios anexo no roteiro e/ou relatório que deverá ser feito no decorrer da aula prática. PODERÁ SER INCLUÍDO ESTÁGIO DE DOCÊNCIA. 3

4 BIBLIOGRAFIA BÁSICA E COMPLEMENTAR: (de tal forma que as primeiras sejam concisas e dêem conta do conteúdo programático das disciplinas) BÁSICA: CONN, E.E. & STUMPF, P.K. Introdução a Bioquímica. Ed. Edgard Blucker Ltda. São Paulo, LEHNINGER, A.L. Bioquímica. São Paulo, Elsevier, 1995, 839p. LEHNINGER, A.L. Princípios de Bioquímica. Sarvier Editora. São Paulo, 4 a edição, SACKHEIM,G.I.; LEHMAN,D.D. Química e Bioquímica para Ciências Biomédicas. 8ed. São Paulo, Ed. Manole, p. STRYER, L. Bioquímica. Rio de Janeiro. Guanabara Koogan, 1992, 881p. VIEIRA, E.C., GAZZINELLI, G., MARES-GUIA, M. Bioquímica Celular e Biologia Molecular. São Paulo, Editora Atheneu, 1991, vol.1, 360p. VILLELLA, G.G., BACILA, M. & TASTALDI, H. Bioquímica. Guanabara/Koogan. Rio de Janeiro, VOET, D.; VOET, J.G.; BIOCHEMISTRY, 2 nd. Ed. John Viley L Sons, Inc CAMPBELL, M., Bioquímica, 3ª ed.; Ed. Artes Medicas, Porto Alegre, CRITÉRIOS DE AVALIAÇÃO DA APRENDIZAGEM: - Três provas: P1, P2 e P3; - Trabalhos e/ou Relatórios; - MP: Média das Provas - MR e/ou MT: Média dos Relatórios e/ ou Média dos trabalhos - A media final será calculada segundo a fórmula: Média Final: MF = (0,7 x MP) + (0,3 x MR e/ou MT) MF 5,0 aprovado MF < 5,0 reprovado OBS - Haverá uma prova de recuperação a qual abrangerá todo o conteúdo ministrado. Neste caso a média final será a nota da prova de recuperação. 4

5 EMENTA: (Tópicos que caracterizam as unidades do programa de ensino) Caracterização, separação e propriedades de proteínas, enzimas, aminoácidos, carboidratos e lipídios APROVAÇÃO: CONSELHO DE DEPARTAMENTO em: / / CONSELHO DE CURSO CONGREGAÇÃO Prof. Dr. Haroldo Naoyuki Nagashima Chefe do Departamento de Física e Química 5

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