Resistência aos antimicrobianos em Salmonella spp.

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1 Resistência aos antimicrobianos em Salmonella spp.

2 Síntese das investigações desde a descoberta de novos antimicrobianos Final do século XIX: Pasteur efetuou relatos sobre antagonismo entre diferentes bactérias e entre bactérias e fungos; 1929: Alexander Fleming: observação da propriedade antagônica e uso de filtrado de Penicillum sp. com finalidade terapêutica; dificuldades na purificação da penicilina; 1939: Pesquisadores britânicos: purificação da penicilina Início da 2 a guerra mundial: investimento USA com a purificação da penicilina; A partir de 1945: milhares de antibióticos, naturais, descobertos e em torno de 150 com atividade terapêutica; Investimento anual da indústria farmacêutica: >500 milhões de dólares;

3 Classificação dos antimicrobianos De acordo com a origem Naturais: obtidos a partir de microrganismos; Semi-sintéticos: modificados quimicamente a partir daqueles extraídos naturalmente; Sintéticos: obtidos por síntese química. De acordo com espectro de ação Amplo espectro: atua sobre elevado número de espécies bacterianas; Espectro intermediário: número limitado de espécies; Espectro reduzido: pequeno número de espécies microbianas.

4 Classificação dos antimicrobianos De acordo com o efeito Bacteriostático: concentração máxima alcançada impede a multiplicação: retoma o crescimento caso ocorra redução na concentração da droga. Auxilia no mecanismo inato do hospedeiro. Bactericida: atuação letal sobre os microrganismos. De acordo com o mecanismo de ação Inibem ou interferem na síntese da parede celular. Alteram a permeabilidade da membrana citoplasmática. Interferem na síntese protéica. Interferem na síntese e replicação de ácidos nucléicos.

5 Classificação química dos antimicrobianos Derivados de aminoácidos Derivados de açucares Derivados de acetatos e propionatos Outros Relevância: Drogas pertencentes ao mesmo grupo apresentam mecanismo de ação semelhante, sugerindo ocorrência de resistência cruzada. Fidedignidade dos resultados em teste de suscetibilidade para drogas relacionadas quimicamente.

6 Conseqüências da resistência antimicrobiana Vantagens para os microrganismos Transferência pequena parcela do DNA para a célula receptora; Adaptação as condições ambientais; Redução dos efeitos da mutação. Desvantagens para o homem Mortalidade: aumento dos índices morbidade; Morbidade: prolongamento da infecção e possibilidade de disseminação; Aumento de custos; Perspectiva de soluções limitadas em algumas infecções a curto e médio prazo.

7 Fatores que contribuem com a disseminação da resistência antimicrobiana 1. A- Qualidade de vida da população; B- Países desenvolvidos e emergentes 2. Falhas na Indústria Farmacêutica; 3. Falhas na Clínica Humana; 4. Falhas na Clínica Veterinária; 5. Utilização na Indústria de Alimentos; 6. Aumento na produção animal e vegetal com objetivo ornamental, doméstico para atender a demanda interna ou de exportação; 7. Atividade migratória animal.

8 Método Bauer-Kirby: atualização anual pelo CLSI(NCCLS) Tradução para português disponível no site ANVISA

9 Método usualmente empregado na rotina para avaliação: Bauer-Kirby Tem como base a difusão de um antimicrobiano previamente impregnado em disco de concentração foi previamente estabelecida. Sua deposição sobre a superfície de Agar Muller Hinton (meio indicado para a realização do teste) forma através da difusão, um gradiente de concentração do fármaco. A sensibilidade é indicada através de um halo de inibição de crescimento do microrganismo previamente semeado.

10 Controle de qualidade interno na avaliação da suscetibilidade antimicrobiana É um processo contínuo que deve ser realizado no Laboratório visando monitorar: A precisão na rotina das atividades; Qualidade dos insumos e equipamentos; O desempenho do pessoal que executa a atividade; Os resultados antes de sua liberação para os clínicos; A necessidade de avaliar os resultados para permitir a oferta de subsídios para ações de vigilância cabíveis;

11 Parâmetros para controle do teste de Bauer-Kirby Meio de cultura; Controle de ph do meio; Controle de cations bivalentes; Controle de timina-timidina; Controle do volume de meio de cultura; Controle de umidade do meio de cultura; Controle de esterilidade; Controle de crescimento no meio de cultura; Controle da densidade do inóculo;

12 Falhas resultantes da qualidade dos discos empregados Controle de ph do meio

13 Falhas resultantes da qualidade dos discos empregados Controle de cations bivalentes Concentração inadequada de cátions: alteração do halo de inibição

14 Falhas resultantes da qualidade dos discos empregados Controle de timina-timidina Concentração adequada Timidina em excesso falsa resistência

15 Falhas resultantes da qualidade dos discos empregados Controle do vencimento de antimicrobianos Antimicrobianos vencidos: falsa resistência Antimicrobianos com validade correta

16 Falhas resultantes da qualidade dos discos empregados Controle no tempo de incubação Tempo de incubação correto Tempo de incubação incorreto

17 Falhas resultantes da qualidade dos discos empregados Controle da densidade do inóculo

18 Falhas resultantes da qualidade dos discos empregados Variação dos halos de acordo com a concentração do antimicrobiano

19 Falhas resultantes da qualidade dos discos empregados Meio de Cultura Tempo de envase do AMH: >20 dias Tempo de envase do AMH: 3 dias

20 Falhas resultantes da qualidade dos discos empregados Tipo de meio de cultura SUL SUL Agar Caseína de Soja Agar Muller Hinton

21 Vantagens de sua utilização em Salmonella spp. Avaliação presuntiva da produção de β-lactamase Avaliação presuntiva quando da resistência a produção de β- lactamase de espectro ampliado-asbl: resistência a ampicilina e sensibilidade a cefuroxima ou cefalosporinas de 3ª geração: (TEM-1, TEM-2, SHV-1) Avaliação presuntiva quando da resistência a produção de β- lactamase de espectro estendido- ESBL podendo ser inibidos por sulbactam, clavulanato e tazobactam (Amp-1)

22 Vantagens de sua utilização em Salmonella spp. Conhecer a circulação de cepas com capacidade de resistência antimicrobiana; Surpreender a introdução de sorovares com características exóticas ou epidêmicas; Conhecer o perfil de suscetibilidade de isolados de diferentes fontes da cadeia alimentar e indiretamente a relevância de seu uso na agricultura e veterinária; Ofertar subsídios para avaliação quanto a efetividade do tratamento empírico;

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