Patologia Molecular dos Tipos Histológicos Especiais de Câncer de Mama. Dr. Felipe Geyer

Transcrição

1 Patologia Molecular dos Tipos Histológicos Especiais de Câncer de Mama Dr. Felipe Geyer

2 Sumário Heterogeneidade do câncer de mama Tipos especiais de carcinomas de mama vs subtipos moleculares entidades distintas Tipos especiais como modelo para identificação de alvos terapêuticos

3 Heterogeneidade de câncer de mama RE- RE+

4 Classificação molecular Hu et al. BMC Genomics 2006;7:96

5 Taxonomia de microarrays foi baseada em Ductal Lobular Tubular Medular Micropapilífero Lobular pleomórfico Mucinoso Rico em lipídeos Metaplásico Secretor

6 Tipos especiais de câncer de mama 17 tipos especiais morfológicos 25-30% de todos carcinomas Implicações clínicas e prognósticas importantes Características biológicas distintas

7 Questionamentos Têm os tipos histológicos especiais subtipos moleculares distintos? São os tipos histológicos especiais entidades moleculares distintas?

8 Têm os tipos especiais subtipos moleculares distintos?

9 113 tumores incluindo 11 tipos especiais Operon arrays 24,650 genes TMAs 22 marcadores imuno-histoquímicos

10 Tipos especiais são mais homogêneos ao nível transcriptômico Luminal Basal-like Mol apócrino Mucinoso A CLI clássico/ Tubular Mucinoso B Neuroendócrino Micropapilífero Adenóide cístico Medular Metaplásico CLI pleomórfico Apócrino Weigelt et al. J Pathol 2008

11 Tipos especiais vs subtipos moleculares Neuroendócrino Mucinoso Luminal Tubular CLI clássico Micropapilífero HER2 Apócrino CLI pleomórfico Adenóide cístico Molecular apócrino Secretor Medular Metaplásico Basal-like Weigelt, Geyer & Reis-Filho Mol Oncol 2010

12 CLI vs CDI pareados por grau e subtipo molecular CDI CLI Weigelt et al. J Pathol 2010

13 CA mucinoso vs CA neuroendócrino vs CDI pareados por grau e subtipo molecular CDI mucinoso/neuroendócrino IPA Network: Desenvolvimento e função de tecido conjuntivo, desenvolvimento e função de sistema muscular esquelético, desenvolvimento de tecidos Weigelt et al. Mod Pathol 2009

14 CA metaplásico vs CDIs de subtipo basal Carcinomas metaplásicos apresentam menor expressão de PTEN e TOP2A: Possível causa para baixa resposta a antracíclicos? Weigelt et al. BCRT 2009

15 CA tubular vs CDI G1 pareados por subtipo molecular CA tubular Via do RE hiperexpressa INPP4B: gene supressor tumoral com atividade inibitória na via PI3K Hipótese: melhor prognóstico de CAs tubulares poderia estar associado à maior ativação da via do RE e ativação menos robusta da via PI3K? Lopez-Garcia et al. J Pathol 2010

16 São os tipos histológicos especiais entidades moleculares distintas?

17 Carcinoma secretor t(12;15) (p13;q25) ETV6 split apart ETV6-NTRK3 fusão Reis-Filho et al. Histopathology 2008

18 Carcinomas adenóide císticos t(6;9) (q22-23;p23-24) t(6;9)(q22 23;p23 24) MYB-NFIB Persson et al. PNAS November 2009

19 Carcinoma micropapilífero 1-3% de todos carcinomas mamários, 7% em carcinomas mistos padrão de crescimento inside-out associação frequente com invasão angiolinfática alta incidência de metástase linfonodal estágio avançado na apresentação pior prognóstico mesmo em casos com histologia mista

20 Carcinoma micropapilífero puro Marchio et al. J Pathol 2008 Subtipo Luminal B

21 Marchio et al. J Pathol 2008 Carcinoma micropapilífero vs CDI

22 Carcinoma micropapilífero misto

23 Componentes micropap e ñ-micropap de carcinomas micropapilíferos mistos Marchio et al. J Pathol 2009 Componentes micropapilíferos e não-micropapilíferos são praticamente idênticos ao nível genético

24 Carcinoma micropapilífero vs CDI Pure and mixed MPC cluster Carcinomas micropapilíferos puros e mistos são distintos de CDIs pareados para RE e grau histológico Marchio et al. J Pathol 2009

25 Tipos especiais como modelo para identificação de alvos terapêuticos

26 Subgrupo estudado Tipos especiais de câncer de mama perfil molecular mais homogêneo menos hits genéticos meio para identificação de alvos terapêuticos Carcinoma lobular invasivo 10-15% de todos carcinomas RE+/ RP+/ HER2- Perfil molecular luminal A ganho de 1q perda de 16q Inativação de CDH1 (E-caderina) Opções terapêuticas limitadas tamoxifeno / inibidores de aromatase pouca resposta à quimioterapia

27 Carcinoma lobular invasivo clássico N=13 Análise do número de cópias acgh 5.8K array Chromosome 8 Tiling Path Arrays

28 8p11

29 MDA-MB-134 tem um fenótipo luminal, 16q-, deleção de E-caderina FGFR1

30 Integração de CGH e expressão gênica Gene Expression data SPFH domain protein 2 precursor PROSC G protein-coupled receptor RNA polymerase III transcription initiation factor BRF2 NA Rab11-FIP Eukaryotic translation initiation factor 4E-binding protein 1 (4E-BP1) NA Set1/Ash2 histone methyltransferase complex subunit ASH Steroidogenic acute regulatory protein, mitochondrial precursor NA Small nuclear ribonuclear CaSm NA BAG-4 NA DDHD domain containing HTPAP WHSC1L leucine zipper-ef-hand containing transmembrane protein 2 NA FGFR Transforming, acidic coiled-coil containing protein Pleckstrin homology domain containing BBP-like protein 1 (BLP1) ADAM ADAM ADAM ADAM 3A Indoleamine-pyrrole 2,3-dioxygenase C8orf4 (Thyroid cancer protein 1) zinc finger, matrin type 4 NA Secreted frizzled-related protein 1 NA golgi autoantigen, golgin subfamily a, SLD AGP acyltransferase

31 Inibição de FGFR1 diminui sobrevida de células MDA-MB-134 cal51 ZR75.1 mcf7 mda134 *: p<0.05 Reis-Filho et al. Clin Cancer Res 2006

32 Amplificação/ hiperexpressão de FGFR1 está associada à tumores RE+, RP-, Ki67 alto, pior sobrevida e resistência à terapia endócrina Tumores RE+ - DFS Elbauomy Elsheikh et al. Breast Cancer Res 2007 Turner et al. Cancer Res 2010

33 Amplificação de FGFR1 está associada à resistência à terapia endócrina Turner et al. Cancer Res 2010

34 Ensaio clínico fase II de inibidor de FGFR1 sugere ação anti-tumoral em pctes com tumor RE+/FGFR1+ A multicenter, open-label phase II trial of dovitinib, a fibroblast growth factor receptor 1 (FGFR1) inhibitor, in FGFR1- amplified and nonamplified metastatic breast cancer (BC). Dovitinib (TKI258) em ca de mama metastático HER2-77 pacientes Grupo 1 FGFR1+/ HR pctes Grupo 3 FGFR1-/ HR pctes Grupo 4 FGFR1-/ HR pctes Resultados 13% de resposta parcial no grupo 1 44%, 29% e 11% de doença estável em grupos 1, 3 e 4, respectivamente Andre F et al JCO 2011/ ASCO abstract

35 Conclusões Tipos especiais de câncer de mama Boa correlação com subtipos moleculares Entidades morfológicas e moleculares distintas Carcinoma secretório translocação específica Carcinoma adenóide cístico translocação específica Carcinoma micropapilífero perfil fenotípico e genético de luminal B Meio para identificação de alvos terapêuticos FGFR1 é um potencial alvo terapêutico em carcinomas RE+

36 Agradecimentos HIAE Angela Vergara de Oliveira Alanna M. P. S. Bezerra Christina Shiang Denise da C. Pasqualin Ebe Christie de Oliveira José Norberto Stavale Leandro A. L. Martins Lidiane V. Marins Marcos Takeo Obara Marcus V. N. Corpa Renee Zon Filippi Ricardo S. Macarenco Vanderlei Segatelli ICESP Fernando Aguiar Evandro Sobroza Ibere C. Soares Juliana Ravanini Leika Miyahara Marcelo Gianotti Raphael Medeiros Romulo Loss Mattedi ICR Jorge S Reis-Filho Maryou Lambros Rachael Natrajan Radost Vatcheva Caterina Marchio Konstantin Dedes Daniel Wetterskog Magali Lacroix-Triki M. Angeles Lopez-Garcia Kay Savage

37 Take home messages Cada tipo especial de câncer de mama é mais homogêneo ao nível molecular Luminal: Tubular, CLI clássico, neuroendócrino e mucinoso Basal-like: Medular, metaplásico, secretório e adenóide cístico Molecular apócrino e HER2: Apócrino e CLI pleomórfico

38 Take home messages Carcinoma secretório translocação cromossômica recorrente específica Carcinoma micropapilífero entidade morfológica e molecular distinta características fenotípicas e genéticas de luminal B presença de um componente micropapilífero em carcinoma misto características fenotípicas e genéticas micropapilares-símile

39 Take home messages Carcinoma adenóide cístico entidade morfológica e molecular distinta triplo negativo por imuno-histoquímica basal-like por microarrays fusão gênica MYB-NFIB recorrente poucas alterações de número de cópias de DNA ausência de disfunção de BRCA1

40 Take home messages Cerca de 50% dos CLIs apresentam amplificação de FGFR1. Cerca de 10% dos carcinomas RE+ apresentam amplificação de FGFR1. PR- KI67 alto pior sobrevida resistência à terapia endócrina FGFR1 é um potencial alvo terapêutico em carcinomas RE+.

41 FGFR1 é hiperexpresso quando amplificado

42 Tipos especiais: entidades distintas ou apenas figuras bonitas?

43 Carcinoma adenóide cístico 0,1 1% de todos carcinomas mamários morfologia semelhante à glândula salivar maioria de baixo grau histológico comportamento clínico excelente

44 Carcinomas adenóide císticos apresentam perfil triplo negativo Trendell Smith et al., 1999 (N=6) Arpino et al., 2002 (N=28) Mastropasqua et al., 2005 (N=20) Crisi et al., 2005 (N=6) Azoulay et al., 2005 (N=18) Weigelt et al, 2008 (N=4) Kahnfir et al, 2011 (n=61) RE + 0% 46% 15% 0% 0% 0% 4% RP + 0% 36% 10% 0% 0% 0% 7% HER2 + 0% NA 0% 0% 0% 0% 0% p63 + NA NA 85% NA 100% 50% NA Citoqueratina 5/6 + NA NA NA NA 100% 75% NA c-kit (CD117) + NA NA 95% 100% 100% 100% NA Marchio et al. JCP 2010 (atualizado em agosto 2011)

45 Carcinomas adenóide císticos são do subtipo basal-like por microarrays Basal-like Adenóide cístico Weigelt et al. J Pathol 2008

46 A translocação t(6;9) resulta em hiperexpressão do mrna e proteína de MYB Persson et al. PNAS 2009

47 Nem todos carcinomas adenóide císticos de cabeça e pescoço apresentam fusão gênica MYB-NFIB Study Cases MYB-NIFB + MYB-NFIB- Persson et al. PNAS (Frozen) 7 (100%) 0 (0%) Mitani et al. Clin Cancer Res (Frozen) 20 (28%) 52 (72%) West et al. Am J Surg Pathol 2011 Brill et al. Mod Pathol (FFPE) 18 (49%) 19 (51%)* (6 casos c/ rearranjo de MYB) 29 (Frozen) 28 (FFPE) 25 (86%) 12 (43%) 4 (14%) 16 (57%)

48 Carcinomas adenóide císticos de mama apresentam fusão gênica MYB-NFIB 13 casos revistos por 3 patologistas 12 mostraram a fusão gênica MYB-NFIB Wetterskog et al. J Pathol 2011

49 Carcinomas adenóide císticos mostram perfil genômico distinto de CDIs pareados por grau histológico CDI GH1 Ca Ad Cístico vs CDI pareado por GH Carcinomas adenóide císticos Wetterskog et al. J Pathol 2011

50 Carcinomas adenóide císticos mostram perfil genômico distinto de CDIs triplo negativo e basal-like CDI triplo negativo Ca Ad Císticos vs CDIs triplo negativo Carcinoma adenóide cístico Wetterskog et al. J Pathol 2011

51 Carcinomas adenóide císticos não apresentam disfunção de BRCA1 Non-TNBC TNBC Turner et al. Oncogene 2007 Wetterskog et al. J Pathol 2011

52 MDA-MB-134 é sensivel ao inibidor de FGFR1 SU5402 cal51 ZR75.1 mcf7 mda134 *: p<0.05 Reis-Filho et al. Clin Cancer Res 2006

53 Tipos especiais vs imunofenótipo Mucinoso Neuroendócrino Micropapilífero Papilífero Medular Metaplásico Secretor Adenóide cístico Apócrino CLI pleomórfico Células acinares Reis-Filho et al., Histopathology 2006; Rakha E, Reis-Filho JS, Ellis IO. JCO, 2008; Lae et al. Mod Pathol 2008; Weiget et al., J Pathol 2008; Weigelt et al., Breast Cancer Res Treat 2008