BIOLISA RUBÉOLA IgM K 124 INSTRUÇÕES DE USO

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1 BIOLISA RUBÉOLA IgM K 124 INSTRUÇÕES DE USO FINALIDADE Teste para determinação qualitativa de anticorpos IgM para Rubéola em soro ou plasma humano por enzimaimunoensaio em microplaca. Somente para uso diagnóstico in vitro. PRINCÍPIO DE AÇÃO Metodologia: Enzimaimunoensaio ou imunoenzimétrica. O KIT BIOLISA Rubéola IgM é um ensaio imunoenzimático em fase sólida baseado no princípio de imunocaptura para a detecção qualitativa de anticorpos IgM para rubéola em soro ou plasma humano. Anticorpos IgM para rubéola presentes na amostra, ligam-se aos anticorpos que revestem a microplaca formando complexos anti-igm humanos - anticorpos IgM anti-rubéola. Após a incubação inicial, a microplaca é lavada para remover os materiais não ligados. O conjugado enzimaantígeno de rubéola é adicionado à microplaca e então incubado. O Conjugado se liga ao Complexo imobilizado anti-igm humana - anticorpos IgM anti-rubéola presentes. É realizada nova lavagem para remover os excedentes. Após esta etapa, os Substratos A e B são adicionados e incubados, produzindo uma cor azul, que indica a quantidade de anticorpos IgG presentes nas amostras. A Solução de Parada é adicionada para interromper a reação havendo uma mudança de cor para amarelo, medida em um leitor de microplacas. REAGENTES 1- Placa Sensibilizada - Conservar entre 2 e 8ºC. 2- Conjugado - Conservar entre 2 e 8ºC. Antígenos recombinantes de Rubéola ligados a peroxidase; conservante. 3- Lavagem Concentrada - Conservar entre 2 e 8ºC. Solução tampão, surfactante e conservante. 4- Diluente de Amostra - Conservar entre 2 e 8ºC. Solução tampão; conservante. 5- Substrato A - Conservar entre 2 e 8ºC. Solução tampão contendo peróxido de hidrogênio; conservante. 6- Substrato B - Conservar entre 2 e 8ºC. Tampão contendo tetrametilbenzidina (TMB); conservante. 7- Solução de Parada - Conservar entre 2 e 8ºC. Ácido clorídrico 1M. 8- Calibrador Cut-Off - Conservar entre 2 e 8ºC. Anticorpos IgM anti- Rubéola diluídos; conservante. 9- Controle Negativo - Conservar entre 2 e 8ºC. Anticorpos IgM não reativos para Rubéola; conservante. 10- Controle Positivo - Conservar entre 2 e 8ºC. Anticorpos IgM anti- Rubéola; conservante. 11- Seladores de Placa APRESENTAÇÃO REAGENTES 1- Placa sensibilizada 96 CAVIDADES 192 CAVIDADES 480 CAVIDADES 1 Unidade 2 Unidades 5 Unidades 2- Conjugado 1 Frasco x 12 ml 2 Frascos x 12 ml 5 Frascos x 12 ml 3- Lavagem Concentrada 4- Diluente de amostra 1 Frasco x 20 ml 2 Frascos x 20 ml 4 Frascos x 20 ml 1 Frasco x 12 ml 2 Frascos x 12 ml 5 Frascos x 12 ml 5- Substrato A 1 Frasco x 8 ml 2 Frascos x 8 ml 5 Frascos x 8 ml 6- Substrato B 1 Frasco x 8 ml 2 Frascos x 8 ml 5 Frascos x 8 ml 7- Solução de Parada 8- Calibrador Cut-Off 1 Frasco x 8 ml 2 Frascos x 8 ml 4 Frascos x 8 ml 1 Frasco x 1 ml 2 Frascos x 1 ml 4 Frascos x 1 ml 9-Controle Negativo 1 Frasco x 1 ml 2 Frascos x 1 ml 4 Frascos x 1 ml 10-Controle Positivo 1 Frasco x 1 ml 2 Frascos x 1 ml 4 Frascos x 1 ml 11 - Seladores de Placa 3 unidades 5 unidades 10 unidades EQUIPAMENTOS E INSUMOS OPERACIONAIS Materiais contidos no kit: - Reagentes descritos no quadro anterior. - Instruções de uso (manual). Materiais necessários, mas não contidos no Kit: 1- Pipetas capazes de dispensar volumes de 5, 50 e 100 ml com precisão maior que 1,5%. 2- Repipetador para pipetagens repetitivas de volumes de 100 ml e 300 ml, com precisão maior que 1,5% (opcional) ou pipeta multicanal. 3- Lavadora de microplaca (opcional). 4- Leitora de ELISA com capacidade de absorbância em 450 e 630 nm de comprimento de onda. 5- Pipetas com volumes reguláveis (200 ml a 1000 ml) para preparação do Substrato. 6- Tubos de ensaio para a preparação dos Substrato A e B. 7- Papel absorvente para secar as microcavidades. 8- Cronômetro ou relógio. 9- Frasco para estocar a Solução de Lavagem após diluída. 10- Água destilada ou deionizada. 11- Ferramentas de Controle de Qualidade. 12- Incubadora de 37 C ± 2 C. CONDIÇÕES DE ARMAZENAMENTO E TRANSPORTE A temperatura de armazenamento deverá ser de 2 a 8 C. O transporte em temperaturas entre 15 e 30 C não deverá exceder a 72 (setenta e duas) horas. Não congelar. Manter ao abrigo da luz e evitar umidade. CUIDADOS ESPECIAIS 1- Somente para uso diagnóstico in vitro. 2- Seguir com rigor a metodologia proposta para a obtenção de resultados exatos. 3- O envelope contendo as tiras deve ser aberto somente após atingir a temperatura ambiente. Recolocar as tiras de microcavidades não utilizadas no invólucro de alumínio, vedar e estocar a 2-8 C. 4- A água utilizada na limpeza do material deve ser recente e isenta de contaminantes. 5- Colunas deionizadoras saturadas liberam água alcalina, íons diversos e agentes oxidantes e redutores, que podem alterar de forma significativa os resultados. 6- A Solução de Parada contém ácido clorídrico, que é um ácido forte. Portanto, manuseá-lo com devido cuidado. 7- Toda matéria-prima do produto é testada e deve ser não reagente para HBsAg, Anti-HIV 1&2 e Anti HCV. Entretanto, esses testes não oferecem total segurança da ausência de agentes infecciosos. A manipulação manual de todo produto que contém soro é potencialmente capaz de transmitir doenças. Portanto, é preciso tomar os devidos cuidados de biossegurança na manipulação desses produtos. 8- Pipetar os reagentes sempre na mesma ordem para minimizar a diferença de tempo de reação entre as microcavidades. 9- Por medida de proteção, pode-se cobrir a placa durante a reação. Caso opte por este procedimento, é necessário que seja estabelecido como rotina. 10- Deve-se assegurar que o fundo da cavidade esteja limpo e seco e que não haja bolhas na superfície do líquido antes de ler a placa. Não permitir que as cavidades sequem durante o ensaio. 11- Não exponha os reagentes, especialmente o substrato, à luz forte ou vapores de hipoclorito durante armazenamento ou etapas de incubação. 12- Recomendamos aplicar as normas locais, estaduais e federais de proteção ambiental para que o descarte dos reagentes e do material biológico seja feito de acordo com a legislação vigente. 13- Para obtenção de informações relacionadas à biossegurança ou em caso de acidentes com o produto, consultar as FISPQ (Ficha de Informações de Segurança de Produtos Químicos) disponibilizadas no site ou através de solicitação pelo SAC (Serviço de Assessoria ao Cliente) da Quibasa. AMOSTRAS Utilizar soro ou plasma (EDTA ou Heparina). Amostras hemolisadas ou altamente lipêmicas não devem ser usadas. As amostras podem ser conservadas sob refrigeração, entre 2 e 8ºC, pelo período máximo de 5 dias. Se as amostras não puderem ser analisadas dentro de 5 dias, podem ser estocadas por até 30 dias a temperatura de -20ºC (freezer). DESCRIÇÃO DO PROCESSO PREPARO DOS REAGENTES DE TRABALHO Solução de Lavagem Diluir o conteúdo do frasco Nº3 (Lavagem Concentrada) em 1000 ml de água destilada ou deionizada. Estocar entre 2 e 8ºC até a data de validade impressa no frasco original. Pode ser armazenada em temperatura ambiente. Caso ocorra cristalização, aquecer a 37 C até dissolução. Substrato Solução de Trabalho Determinar a quantidade de cavidades a serem utilizadas para preparo de um volume adequado. Preparar a solução misturando partes iguais do Substrato A e Substrato B 15 minutos antes de sua utilização. Mantenha-o protegido da luz até ser utilizado. Para cada microcavidade (teste), utilizar: 50 L de Substrato A + 50 L de Substrato B Por exemplo: misture 1 ml de Substrato A e 1 ml de Substrato B para duas tiras de 8 microcavidades (16 testes). Ocorre sobra de reagente. Usar no máximo até uma (1) hora após preparo. TÉCNICA Antes de iniciar o ensaio, colocar todos os reagentes, amostras e controles para estabilizarem em temperatura ambiente (15 30ºC) por no mínimo 40 minutos. Retornar as tiras da microplaca que não foram utilizadas para a embalagem original selada. 1- Separar as cavidades a serem utilizadas considerando: Calibrador, controles e amostras. (podendo ser testadas em duplicata). 2- Separar a primeira cavidade para Branco (OPCIONAL). 3- Adicionar 100 ml de calibrador Cut-off, controle negativo, controle positivo nas cavidades determinadas. 4- Pipetar 100 ml de Diluente de Amostra nas cavidades determinadas para as amostras e em seguida, pipetar 5 ml de amostra. 5- Homogeneizar gentilmente durante ± 30 segundos. Ocorre mudança de cor de verde para azul nas cavidades das amostras. Cobrir as cavidades com o selador de placa. 6- Incubar por 30 minutos ± 2 minutos em uma incubadora a 37 C ± 2 C. 7- Retirar o selador de placa das cavidades; 8- Descartar o conteúdo das cavidades por aspiração (Lavadora) ou por decantação ( manual); Usar 300 ml aproximadamente de Solução de Lavagem, previamente preparado,* para efetuar um total de cinco (5) ciclos de lavagem. Para a garantia da secagem da placa, ao final da lavagem, bater a placa por alguns segundos em papel absorvente. Nota: Lavagem/secagem deficiente pode causar resultados inadequados. 9- Pipetar 100 ml de Conjugado em cada cavidade exceto na cavidade do branco (se tiver feito a opção). 10- Homogeneizar gentilmente durante ± 30 segundos. Cobrir as cavidades com o selador de placa. 11- Incubar por 30 minutos ± 2 minutos em uma incubadora 37 C ± 2 C. 12- Retirar o selador de placa das cavidades. 13- Repetir o item ATENÇÃO Siga um dos seguintes procedimentos: A) Pipetar 100 ml de substrato previamente preparado* Solução de trabalho (A+ B) em cada cavidade. *Vide PREPARO DOS REAGENTES DE TRABALHO. Ou B) Pipetar 50 ml de Substrato A em cada cavidade. Pipetar 50 ml de Substrato B em cada cavidade. 15- Homogeneizar gentilmente durante ± 30 segundos. Cobrir as cavidades com o selador de placa. 16- Incubar por 10 minutos ± 1 minuto em uma incubadora a 37 C ± 2 C. 17- Retirar o selador de placa das cavidades. 18- Pipetar 50 ml de Solução de Parada em cada cavidade. 19- Homogeneizar gentilmente durante ± 30 segundos. 20- Leia a 450 nm (filtro primário) / 630 nm (filtro secundário) em até no máximo 30 minutos. VERIFICAÇÃO DA TÉCNICA Verifique se os resultados obtidos para leitura do Branco, Controles e Calibrador estão compatíveis com os valores apresentados abaixo: ABSORBÂNCIA Cavidade Branco < 0,050 Controle Negativo < 0,100 Calibrador Cut-Off > 0,150 e < 0,450 Controle Positivo > 0,500 As absorbâncias para os controles e calibradores foram obtidas após a diminuição da absorbância do branco. Para a leitura em filtro único (450 nm) considerar limite de branco < 0,100. Caso os valores se encontrem fora dos valores esperados, deve-se repetir a técnica. CÁLCULOS QUALITATIVO Considerar como Cut-Off a absorbância média obtida com o Calibrador Cut-Off.

2 Calibrador Cut-Off ABSORBÂNCIA A1= 0,250 A2= 0,260 Absorbância média do Calibrador Cut-Off (0,250 +0,260) / 2 = 0,255 Calcular o Índice dividindo a absorbância da amostra pelo valor de Cut- Off. Exemplo: ABSORBÂNCIA Amostra 0,812 Valor de Cut-Off 0,255 Índice: Amostra/Valor de Cut-Off 0,812/0,255 = 3,18 QUALITATIVO ÍNDICE Negativo <0,9 Positivo >1,1 Indeterminado 0,9 e 1,1 Observação: No caso de resultado indeterminado, a amostra deve ser reanalisada. As amostras que obtiverem resultados repetidamente indeterminados devem ser retestadas utilizando um método alternativo. Se os resultados permanecerem indeterminados, deve-se coletar uma nova amostra em duas semanas. Se a nova amostra for positiva, a amostra deve ser considerada positiva. LIMITAÇÕES DO PROCESSO A interpretação de um teste diagnóstico, não deve ser estabelecida com base em um único ensaio. Devem-se incluir outros testes de confirmação, antes que uma amostra seja considerada positiva. Um resultado negativo não exclui a possibilidade de exposição. Enfim, todos os resultados devem ser interpretados em conjunto com outras informações clínicas disponíveis. CONTROLE INTERNO DE QUALIDADE O Laboratório Clínico deve possuir um programa interno de controle da qualidade, onde procedimentos, normas, limites e tolerância para variações sejam claramente estabelecidos. É importante ressaltar que todos os sistemas de medição apresentam uma variabilidade analítica característica, que deve ser monitorada pelos próprios laboratórios. Para tanto, é recomendável a utilização de controles, que permitem avaliar a precisão e a exatidão das dosagens. DESEMPENHO DO PRODUTO CONTROLE DE QUALIDADE SENSIBILIDADE E ESPECIFICIDADE CLÍNICA O Kit BIOLISA Rubéola IgM analisou amostras clínicas em comparação com outro método de EIA. Os resultados mostram que a sensibilidade clínica do Kit BIOLISA Rubéola IgM é 90,0%, e a especificidade clínica é de 94,9%. BIOLISA RUBÉOLA IGM MÉTODO BIOLISA Rubéola IgM x EIA Referência EIA REFERENCIA RESULTADO POSITIVO NEGATIVO TOTAL POSITIVO NEGATIVO RESULTADO TOTAL Sensibilidade Clínica: 90,0% (55,5-99,8%) * Concordância global: 94,2% (85,8-98,4%) * Especificidade Clínica: 94,9% (85,8-98,9%) * *95% Intervalo de confiança Precisão REPETIBILIDADE Foram realizadas 20 dosagens sucessivas com três amostras, utilizando o mesmo lote, obtendo-se os seguintes resultados: REPETIBILIDADE AMOSTRA Média 0,764 1,920 4,489 Desvio padrão 0,029 0,074 0,171 Coeficiente de variação (%) 3,807 3,879 3,807 REPRODUTIBILIDADE Foram realizadas 20 dosagens durante 3 dias consecutivos com três amostras, utilizando o mesmo lote, obtendo-se os seguintes resultados: REPRODUTIBILIDADE AMOSTRA Média 0,754 1,926 4,420 Desvio padrão 0,009 0,010 0,062 Coeficiente de variação (%) 1,179 0,510 1,403 SIGNIFICADO DIAGNÓSTICO A Rubéola é um vírus de RNA, esférico, envelope pequeno, pertencente à família Togaviridae. É vulgarmente conhecido como alemão ou sarampo de 3 dias. A infecção pelo vírus de Rubéola é transmitida através de gotículas de saliva, resultando em erupção contagiosa leve em crianças ou jovens adultos. Na infância, a infecção é uma doença auto-limitante, benigna, caracterizada por febre baixa, dor de cabeça, linfadenopatia, artralgia e conjuntivite. No entanto, a infecção durante a gravidez, especialmente no primeiro trimestre, pode levar ao aborto espontâneo, infecção intrauterina causando a morte fetal, ou anomalias congênitas. A Rubéola congênita depende do período em que a infecção ocorre e pode resultar em complicações graves, incluindo a surdez, problemas oculares, incluindo cataratas e glaucoma, cardiopatia congênita e retardo mental. Os anticorpos IgM contra a rubéola são produzidos inicialmente, podendo atingir níveis detectáveis dentro de 2-3 dias e pico de dias após o início dos sintomas que permanecem detectáveis durante as próximas 4-8 semanas. O diagnóstico de infecção ativa ou recente pode ser obtido pela presença de anticorpos IgM em amostra inicial. Depois de vários dias, os anticorpos IgG aparecem depois da IgM, com pico de dias, persistindo níveis variados para toda a vida. A presença de anticorpos IgG anti-rubéola é indicativo de infecção prévia e/ou imunidade. NÚMERO DE TESTES Apresentação 1 96 testes Apresentação testes Apresentação testes REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS 1. Herrmann, KL. Rubella Virus. In: Manual of Clinical Microbiology. American Society for Microbiology 4th Edition (1985) Turgeon, ML. Rubella Infection. In: Immunology and Serology in Laboratory Medicine. 2nd Edition (1996) Chernesky, MA, Mahony JB. Rubella Virus. In: Manual of Clinical Microbiology. 6th Edition (1995) Voller, A, Bidwell, DE, A simple Method for Detecting Antibodies to Rubella. Brit. J. Exp. Pathol. (1975) 56: Rawls WE, Chernesky MA. Rubella Virus. Manual Clinical Immunology (1976) Millian, SJ, Wegman D. Rubella Serology: Applications, Limitations, and Interpretations. Amer. J. Pub. Health (1972) Bioclin Dados de arquivos GARANTIA DE QUALIDADE Antes de serem liberados para consumo, todos os reagentes Bioclin são testados pelo Departamento de Controle de Qualidade. A qualidade dos reagentes é assegurada até a data de validade mencionada na embalagem de apresentação, desde que armazenados e transportados nas condições adequadas. DADOS DO FABRICANTE QUIBASA QUÍMICA BÁSICA Ltda Rua Teles de Menezes, 92 - Santa Branca CEP Belo Horizonte - MG - Brasil Tel.: ( 31 ) Fax: ( 31 ) bioclin@bioclin.com.br CNPJ: / Indústria Brasileira ATENDIMENTO AO CONSUMIDOR Serviço de Assessoria ao Cliente Tel.: sac@bioclin.com.br Número de Registro do Kit BIOLISA Rubéola IgM na ANVISA: Revisão: Maio/12

3 BIOLISA - RUBÉOLA IgM K 124 INSTRUCCIONES DE USO FINALIDAD Test para determinación cualitativa de anticuerpos IgM para Rubéola en suero o plasma humano, por enzimainmunoensayo, en microplaca. Solamente para uso diagnóstico in vitro. PRINCIPIO DE ACCIÓN Metodología: Enzimainmunoensayo o inmunoenzimétrica. El KIT BIOLISA Rubéola IGM es un ensayo inmunoenzimático en fase sólida basado en el principio de inmunocaptura para la detección cualitativa de anticuerpos IgM para rubéola en suero o plasma humano. Anticuerpos IgM para rubéola presentes en la muestra, se ligan a los anticuerpos que revisten la microplaca formando complejos anti-igm humanos - anticuerpos IgM anti-rubéola. Después de la incubación inicial, la microplaca es lavada para remover los materiales no ligados. El Conjugado Enzima-antígeno de rubéola es adicionado a la microplaca y entonces es incubado. El Conjugado Enzima-antígeno de Rubéola se liga al Complejo inmobilizado anti-igm humana - anticuerpos IgM anti-rubéola presentes. Es realizado nuevo lavado para remover los excedentes. Después de esta etapa, los Sustratos A y B son adicionados e incubados, produciendo un color azul, que indica la cantidad de anticuerpos IgG presentes en las muestras. La solución de parada es adicionada para interrumpir la reacción ocurriendo un cambio de color para amarillo, medido en un lector de microplacas. REACTIVOS 1- Placa sensibilizada - Almacenar entre 2 y 8ºC. 2- Conjugado - Almacenar entre 2 y 8ºC. Antígenos recombinantes de Rubéola ligados a peroxidasa; conservante. 3- Solución de Lavado Concentrado - Almacenar entre 2 y 8ºC. Solución tapón, surfactante y conservante. 4- Diluyente de Muestra - Almacenar entre 2 y 8ºC. Solución tapón; conservante. 5- Sustrato A - Almacenar entre 2 y 8ºC. Solución tapón conteniendo peróxido de hidrógeno; conservante. 6- Sustrato B - Almacenar entre 2 y 8ºC. Tapón conteniendo tetrametilbenzidina (TMB); Conservante. 7- Solución de Parada - Almacenar entre 2 y 8ºC. Ácido clorídrico 1M. 8- Calibrador Cut-Off - Almacenar entre 2 y 8ºC. Anticuerpos IgM anti- Rubéola diluidos. Conservante. 9- Control Negativo - Almacenar entre 2 y 8ºC. Anticuerpos IgM no reactivos para Rubéola; Conservante. 10- Control Positivo - Almacenar entre 2 y 8ºC. Anticuerpos IgM anti- Rubéola. Conservante. 11- Selladores de Placa PRESENTACIÓN REACTIVOS 1- Placa sensibilizada 96 CAVIDADES 192 CAVIDADES 480 CAVIDADES 1 Unidad 2 Unidades 5 Unidades 2- Conjugado 1 Frasco x 12 ml 2 Frascos x 12 ml 5 Frascos x 12 ml 3- Solución de Lavado Concentrado 4- Diluyente de muestra 1 Frasco x 20 ml 2 Frascos x 20 ml 4 Frascos x 20 ml 1 Frasco x 12 ml 2 Frascos x 12 ml 5 Frascos x 12 ml 5- Sustrato A 1 Frasco x 8 ml 2 Frascos x 8 ml 5 Frascos x 8 ml 6- Sustrato B 1 Frasco x 8 ml 2 Frascos x 8 ml 5 Frascos x 8 ml 7- Solución de Parada 1 Frasco x 8 ml 2 Frascos x 8 ml 4 Frascos x 8 ml 8- Calibrador Cut-Off 1 Frasco x 1 ml 2 Frascos x 1 ml 4 Frascos x 1 ml 9-Control Negativo 1 Frasco x 1 ml 2 Frascos x 1 ml 4 Frascos x 1 ml 10-Control Positivo 1 Frasco x 1 ml 2 Frascos x 1 ml 4 Frascos x 1 ml 11 - Selladores de Placa EQUIPOS E INSUMOS OPERACIONALES Materiales contenidos en el kit: - Reactivos descritos en el cuadro anterior. - Instrucciones de uso (manual). 3 unidades 5 unidades 10 unidades Materiales necesarios, pero no contenidos en el Kit: 1- Pipetas capaces de dispensar volúmenes de 5, 50 y 100 ml con precisión mayor que 1,5%. 2- Repipetadores para pipetajes repetitivas de volúmenes de 100 ml y 300 ml, con precisión mayor que 1,5% (opcional) o pipeta multicanal. 3- Lavadora de microplaca (opcional). 4- Lectora de ELISA con capacidad de absorbancia en 450 y 630 nm de longitud de onda. 5- Pipetas con volúmenes regulables (200 ml a 1000 ml) para preparación de Sustrato. 6- Tubos de ensayo para la preparación del Sustrato A y B. 7- Papel absorbente para secar las microcavidades. 8- Cronómetro o reloj. 9- Frasco para almacenar la Solución de Lavado después de diluida; 10- Agua destilada o deionizada. 11- Herramientas de Control de Calidad. 12- Incubadora de 37 C ± 2 C. CONDICIONES DE ALMACENAMIENTO Y TRANSPORTE La temperatura de almacenamiento deberá ser de 2 a 8 C. El transporte a temperaturas entre 15 y 30 C no deberá exceder a 72 (setenta y dos) horas. No congelar. Mantener al abrigo de la luz y evitar la humedad. CUIDADOS ESPECIALES 1- Solamente para uso diagnóstico in vitro. 2- Seguir con rigor la metodologia propuesta para la obtención de resultados exactos. 3- El sobre conteniendo las tiras debe ser abierto solamente después de alcanzar la temperatura ambiente. Recolocar las tiras de microcavidades no utilizadas en la envoltura de aluminio, sellar y almacenar a 2-8 C. 4- El agua utilizada en la limpieza del material debe ser reciente e exenta de contaminantes. 5- Columnas deionizadoras saturadas liberan agua alcalina, iones diversos y agentes oxidantes y reductores, que pueden alterar de forma significativa los resultados. 6- La Solución de Parada contiene ácido Clorídrico, que es un ácido fuerte. Por lo tanto, manosearlo con el debido cuidado. 7- Toda matéria prima del producto es probado y debe ser no reactivo para HBsAg, Anti-HIV 1&2 y Anti-HCV. Sin embargo, esos tests no ofrecen total seguridad de la ausencia de agentes infecciosos. La manipulación manual de todo producto que contiene suero es potencialmente capaz de transmitir dolencias. Por lo tanto, es necesario tomar los debidos cuidados de bioseguridad en la manipulación de esos productos. 8- Pipetear los reactivos siempre en el mismo orden para minimizar la diferencia de tiempo de reacción entre las microcavidades. 9- Por medida de protección, se puede cubrir la placa durante la reacción. Caso opte por este procedimiento, es necesario que sea establecido como rutina. 10- Asegurar que el fondo de la cavidad este limpio y seco y que no haya burbujas en la superficie del líquido antes de leer la placa. No permitir que las cavidades sequem durante el ensayo. 11- No exponga los reactivos, especialmente el sustrato, a la luz fuerte o vapores de hipoclorito durante el almacenamiento o etapas de incubación. 12- Se recomienda la aplicación de la ley local, estatal y federal de protección ambiental para la eliminación de reactivos y material biológico se hace de acuerdo con la legislación vigente. 13- Para obtener información relacionada con la seguridad biológica o en caso de accidentes con el producto, consultar la FISPQ (Ficha de Informaciones de la Seguridad de Productos Químicos) disponibles en el site o solicitando a través del SAC (Servicio de Asesoría al Cliente) de Quibasa. MUESTRAS Utilizar suero o plasma (EDTA o Heparina). Muestras hemolizadas o altamente lipémicas no deben ser usadas. Las muestras pueden ser conservadas bajo refrigeración, entre 2 y 8ºC, por el período máximo de 5 días. Si las muestras no pudieran ser analizadas dentro de 5 dias, pueden ser almacenadas por hasta 30 días a temperatura de -20ºC (freezer). DESCRIPCIÓN DEL PROCESO PREPARO DE LOS REACTIVOS DE TRABAJO Solución de Lavado Diluir el contenido del frasco Nº3 (Solución de Lavado Concentrado) en 1000mL de agua destilada o deionizada. Almacenar entre 2 y 8ºC hasta la fecha de validad impresa en el frasco original. Puede ser almacenada a temperatura ambiente. Caso ocurra cristalización, calentar a 37 C hasta su disolución. Sustrato Solución de Trabajo Determinar la cantidad de cavidades a ser utilizadas para preparo de un volúmen adecuado. Preparar la solución mezclando partes iguales de Sustrato A y Sustrato B, 15 minutos antes de su utilización. Manténgalo protegido de la luz hasta ser utilizado. Para cada microcavidad (test), utilizar: 50 L de Sustrato A + 50 L de Sustrato B Por ejemplo: mezcle 1mL de Sustrato A y 1mL de Sustrato B para dos tiras de 8 microcavidades (16 tests). Ocurre sobra de reactivo. Usar máximo hasta una (1) hora luego del preparo. TÉCNICA Antes de iniciar el ensayo, colocar todos los reactivos, muestras y controles para que se estabilicen a temperatura ambiente (15 30ºC) mínimo por 40 minutos. Retornar las tiras no utilizadas para el embalaje original sellada. 1- Separar las cavidades a ser utilizadas considerando: Calibrador, controles y muestras (pudiendo ser probados en duplicado). 2- Separar la primera cavidad para Blanco (OPCIONAL). 3- Adicionar 100 ml de calibrador Cut-0ff, Control Negativo, Control Positivo en las cavidades determinadas. 4- Pipetear 100 ml de Diluyente de Muestra en las cavidades determinadas para las muestras y en seguida, pipetar 5 ml de muestra. 5- Homogenizar gentilmente durante ± 30 segundos. Ocurre cambio de color de verde para azul en las cavidades de las muestras. Cubrir las cavidades con el sellador de placas. 6- Incubar por 30 minutos ± 2 minutos en una incubadora a 37 C ± 2 C. 7- Retirar el sellador de placa de las cavidades. 8- Desechar el contenido de las cavidades por aspiración (Lavadora) o por decantación (manual); Usar 300 ml aproximadamente de Solución de Lavado, previamente preparado*, para un total de cinco (5) ciclos de lavado. Para la garantia del secado de la placa, al final del lavado, batir la placa por algunos segundos en papel absorbente. Nota: Lavado/secado deficiente puede causar resultados inadecuados. 9- Pipetear 100 ml de Conjugado en cada cavidad excepto en la cavidad Blanco (OPCIONAL) Caso haya hecho la opción. 10- Homogenizar gentilmente durante ± 30 segundos. Cobrir las cavidades con el sellador de placa. 11- Incubar por 30 minutos ± 2 minutos en una incubadora 37 C ± 2 C. 12- Retirar el sellador de placa de las cavidades. 13- Repetir el item ATENCIÓN Siga uno de los siguientes procedimientos. A) Pipetear 100 ml de Sustrato previamente preparado* Solución de Trabajo (A + B) en cada cavidad. *Ved PREPARO DE REACTIVOS DE TRABAJO O B) Pipetear 50 ml de Sustrato A en cada cavidad. Pipetear 50 ml de Sustrato B en cada cavidad. 15- Homogenizar gentilmente durante ± 30 segundos. Cubrir las cavidades con el sellador de placa. 16- Incubar por 10 minutos ± 1 minuto en una incubadora a 37 C ± 2 C. 17- Retirar el sellador de placa de las cavidades. 18- Pipetear 50 ml de Solución de Parada en cada cavidad. 19- Homogenizar gentilmente durante ± 30 segundos. 20- Lea a 450 nm (filtro primario) / 630 nm (filtro secundario) en hasta máximo 30 minutos. VERIFICACIÓN DE LA TÉCNICA Verifique si los resultados obtenidos para lectura Blanco, Controles y Calibrador son compatibles con los valores presentados abajo: ABSORBANCIA Cavidad Blanco < 0,050 Control Negativo < 0,100 Calibrador Cut-Off > 0,150 y < 0,450 Control Positivo > 0,500 La absorbancia de los controles y calibradores fueron obtenidos después de la disminución de la absorbancia del blanco. Para lectura en un solo filtro (450 nm) considerar límite de blanco < 0,100. Caso los valores se encuentren fuera de los valores esperados, se debe repetir la técnica. CÁLCULOS CUALITATIVO Considerar como Cut-Off la absorbancia promedio obtenida con el Calibrador Cut-Off. Calibrador Cut-Off ABSORBANCIA A1= 0,250 A2= 0,260 Absorbancia promedio del Calibrador Cut-Off (0,250 +0,260) / 2 = 0,255

4 Calcular el Índice dividiendo la absorbancia de la muestra por el valor de Cut-Off. Ejemplo: ABSORBANCIA Muestra 0,812 Valor de Cut-Off 0,255 Índice: Muestra/ Valor de Cut-Off 0,812/ 0,255 = 3,18 CUALITATIVO ÍNDICE Negativo <0,9 Positivo >1,1 Indeterminado 0,9 y 1,1 Observación: En el caso de resultado indeterminado, la muestra debe ser reanalizada. Las muestras que obtuvieran resultados repetidamente indeterminados deben ser provados de nuevo utilizando un método alternativo. Si los resultados permanecieran indeterminados, se debe recoger una nueva muestra en dos semanas. Si la nueva muestra fuera positiva, la muestra debe ser considerada positiva. LIMITACIONES DEL PROCESO La interpretación de un test diagnóstico, no debe ser establecida con base en un único ensayo. Se deben incluir otros tests de confirmación, antes que una muestra sea considerada positiva. Un resultado negativo no excluye la posibilidad de exposición. Por último, todos los resultados deben ser interpretados en conjunto con otras informaciones clínicas disponibles. CONTROL INTERNO DE CALIDAD El Laboratorio Clínico debe poseer un programa interno de control de calidad, donde procedimientos, normas, límites y tolerancia para variaciones sean claramente establecidos. Es importante resaltar que todos los sistemas de medición presentan una variabilidad analítica característica, que debe ser vigilada por los propios laboratorios. Por lo tanto, es recomendable la utilización de controles, que permiten la evaluación, la precisión y la exactitud de las dosificaciones. DESEMPEÑO DEL PRODUCTO CONTROL DE CALIDAD SENSIBILIDAD Y ESPECIFICIDAD CLÍNICA El Kit BIOLISA - Rubéola IgM analizó muestras clínicas en comparación con otro kit de EIA. Los resultados muestran que la sensibilidad clínica del Kit BIOLISA Rubéola IgM es 90,0%, y la especificidad clínica es de 94,9%. BIOLISA RUBÉOLA IgM MÉTODO BIOLISA Rubéola IgM x EIA Referencia EIA REFERENCIA RESULTADO POSITIVO NEGATIVO TOTAL POSITIVO NEGATIVO RESULTADO TOTAL Sensibilidad Clínica: 90,0% (55,5-99,8%) * Concordancia global: 94,2%% (85,8-98,4) * Especificidad Clínica: 94,9% (85,8-98,9%) * *95% Intervalo de confianza Precisión REPETIBILIDAD Fueron realizadas 20 dosis sucesivas con tres muestras, utilizando el mismo lote, obteniéndose los siguientes resultados: REPETIBILIDAD MUESTRA Promedio 0,764 1,920 4,489 Desvio patrón 0,029 0,074 0,171 Coeficiente de variación (%) 3,807 3,879 3,807 REPRODUCTIBILIDAD Fueron realizadas 20 dosis durante 3 días consecutivos con tres muestras, utilizando el mismo lote, obteniéndose los siguientes resultados: REPRODUCTIBILIDAD MUESTRA Promedio 0,754 1,926 4,420 Desvío patrón 0,009 0,010 0,062 Coeficiente de variación (%) 1,179 0,510 1,403 SIGNIFICADO DIAGNÓSTICO La Rubéola es un vírus de RNA, esférico, sobre pequeño, perteneciente a la familia Togaviridae. Es vulgarmente conocido como alemán o sarampión de 3 días. La infección por el vírus de Rubéola es transmitida a través de gotículas de saliva, resultando en erupción contagiosa leve en crianças o jovenes adultos. En la infancia, la infección es una dolencia auto-limitante, benigna, caracterizada por fiebre baja, dolor de cabeza, linfadenopatía, artralgia y conjuntivitis. Sin embargo, la infección durante el embarazo, especialmente en el primer trimestre, puede llevar al aborto espontáneo, infección intra-uterina causando la muerte fetal, o anomalias congénitas. La Rubéola congénita depende del período en que la infección ocurre y puede resultar en complicaciones graves, incluyendo la sordez, problemas oculares, incluyendo cataratas y glaucoma, cardiopatía congénita y retardo mental. Los anticuerpos IgM contra la rubéola son producidos inicialmente, pudiendo alcanzarr niveles detectables dentro de 2-3 días y pico de días después del inicio de los síntomas que permanecen detectables durante las próximas 4-8 semanas. El diagnóstico de infección activa o reciente puede ser obtenido por la presencia de anticuerpos IgM en muestra inicial. Después de varios días, los anticuerpos IgG aparecen luego de la IgM, con pico de días, persistiendo niveles variados para toda la vida. La presencia de anticuerpos IgG anti-rubéola es indicativo de infección previa y/o inmunidad. NÚMERO DE PRUEBAS Presentación 1 96 pruebas Presentación pruebas Presentación pruebas REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS 1. Herrmann, KL. Rubella Virus. In: Manual of Clinical Microbiology. American Society for Microbiology 4th Edition (1985) Turgeon, ML. Rubella Infection. In: Immunology and Serology in Laboratory Medicine. 2 nd Edition (1996) Chernesky, MA, Mahony JB. Rubella Virus. In: Manual of Clinical Microbiology. 6th Edition (1995) Voller, A, Bidwell, DE, A simple Method for Detecting Antibodies to Rubella. Brit. J. Exp. Pathol. (1975) 56: Rawls WE, Chernesky MA. Rubella Virus. Manual Clinical Immunology (1976) Millian, SJ, Wegman D. Rubella Serology: Applications, Limitations, and Interpretations. Amer. J. Pub. Health (1972) Bioclin Dados de arquivos GARANTÍA DE CALIDAD Antes de ser liberado para el consumo, todos los reactivos Bioclin son testados por el Departamento de Control de Calidad. La calidad de los reactivos es asegurada hasta la fecha de validad mencionada en el embalaje de presentacion, desde que sean almacenados y transportados en las condiciones adecuadas. DATOS DEL FABRICANTE QUIBASA QUÍMICA BÁSICA Ltda Rua Teles de Menezes, 92 - Santa Branca CEP Belo Horizonte - MG - Brasil Tel.: +55 ( 31 ) Fax: +55 ( 31 ) bioclin@bioclin.com.br CNPJ: / Industria Brasileña ATENDIMIENTO AL CONSUMIDOR Servicio de Asesoría al Cliente Tel. : sac@bioclin.com.br Registro de BIOLISA Rubéola IgM en el ANVISA: Revisión: Mayo/12

5 BIOLISA RUBELLA IgM K124 USAGE INSTRUCTIONS FUNCTION Test for quantitative and qualitative of Rubella IgG antibody in human serum or plasma by immunoassay in micro plates. For in vitro diagnostic use only. PRINCIPLE OF ACTION Methodology: Enzyme immunoassay or immunoenzymetric. The BIOLISA Rubélla IgM Kit is a solid phase enzyme immunoassay based on the indirect quantitative and qualitative detection of IgM antibodies for Rubella in human serum or plasma. IgM antibodies for rubeolla present in the sample bind to the antigen coated on the micro plate forming antigen-antibodies IgM. After the initial incubation, the micro plate is washed to remove unbound materials. The human enzyme conjugate anti-igm is added to micro plate and then incubated. The human antibody - enzyme conjugate anti IgM antibodies bind to immobilized IgM by antigens present. It is performed to remove the new dry surpluses. After this step, the substrates A and B are added and incubated producing a blue color indicating that the amount of IgM in the samples. The Stop Solution is added to stop the reaction having a color change to yellow, measured in a micro plate reader. REAGENTS 1- Sensitized Plate - Store between 2 and 8 C. 2- Conjugate - Store between 2 and 8 C. Recombinant Antigens linked to peroxidase; preservative. 3- Concentrated Washing Solution - Store between 2 and 8 C. Buffer sdution, surfactant and preservative. 4- Sample Diluents - Store between 2 and 8ºC. Buffer solution; preservative. 5- Substrate A - Store between 2 and 8 C. Buffer containing hydrogen peroxide and preservative. 6- Substrate B - Store between 2 and 8 C. Buffer containing tetramethylbenzidine (TMB) and preservative. 7- Stop Solution - Store between 2 and 8 C. Chloridric Acid 1M. 8- Cut-Off Rubella IgM Calibrator - Store between 2 and 8 C. Diluted IgM antibodies anti-rubella; 9- Negative Control Rubella IgM - Store between 2 and 8 C. Nonreactive IgM antibodies anti-rubella; 10- Positive Control Rubella IgM - Store between 2 and 8 C. IgM antibodies anti-rubella; 11- Plate Sealers PRESENTATION REAGENTS 1 Sensitized Plate 96 CAVITIES 192 CAVITIES 480 CAVITIES 1 unit (96 cavities) 2 units (96 cavities) 5 units (96 cavities) 2 Conjugate 1 Flask x 12 ml 2 Flasks x 12 ml 5 Flasks x 12 ml 3 Concentrated Washing Solution 1 Flask x 20 ml 2 Flasks x 20 ml 4 Flasks x 20 ml 4 Sample Diluents 1 Flask x 12 ml 2 Flasks x 12 ml 5 Flasks x 12 ml 5 Substrate A 1 Flask x 8 ml 2 Flasks x 8 ml 5 Flasks x 8 ml 6 Substrate B 1 Flask x 8 ml 2 Flasks x 8 ml 5 Flasks x 8 ml 7 Stop Solution 1 Flask x 8 ml 2 Flasks x 8 ml 4 Flasks x 8 ml 8 Cut-Off Calibrator 1 Flask x 1 ml 2 Flasks x 1 ml 4 Flasks x 1 ml 9 Negative Control 1 Flask x 1 ml 2 Flasks x 1 ml 4 Flasks x 1 ml 10 Positive Control 1 Flask x 1 ml 2 Flasks x 1 ml 4 Flasks x 1 ml 11 Plate sealers 3 units 5 units 10 units EQUIPMENTS AND OPERATIONAL INPUTS Materials in the kit: - Reagents described in the above table - Operating instructions (manual) Required materials not contained in the Kit: 1- Pipette capable of dispensing volumes of 5, 50 and 100 ml with a precision greater than 1,5%. 2- Re-pipettor for repetitive pipetting volumes of 100 ml and 300 ml, with precision greater than 1,5% (Optional) or multichannel pipette. 3- Micro plate washer (optional). 4- ELISA reader capable of absorbance at 450 and 630 nm wavelength. 5- Adjustable volume pipettes (200 ml to 1000 ml) for preparation of the substrate. 6- Test tubes for preparation of the substrates A and B. 7- Paper towel to dry cavities 8- Watch or stopwatches. 9- Flask to store the washing solution after diluted. 10- Distilled or deionized water. 11- Tools of Quality Control. 12- Incubator 37 C ± 2 C. TRANSPORTATION AND STORAGE CONDITIONS The storage temperature should be 2 to 8 C. The transport at temperatures between 15 and 30 C must not exceed 72 (seventy two) hours. Do not freeze. Keep away from light and avoid moisture. SPECIAL CARE 1- For in vitro diagnostic use only. 2- Strictly follow the methodology proposed to obtain accurate results. 3- The envelope containing the strips should be opened only after it reaches room temperature. Place the strip with unused cavities in the aluminum bag, seal and store at 2-8 C. 4- The water used in material cleaning must to be recent and free of contaminants. 5- Deionized and saturated columns release alkaline water, several ions and oxidizing and reducing agents that can significantly alter the results; 6- Stop Solution contains hydrochloric acid, which is a strong acid. Handle it with care. 7- All the raw material of product is tested and should be nonreactive for HBs Antigen, HIV 1 & 2 and Anti HCV. However, these tests do not provide total assurance of the absence of infectious agents. The manual manipulation of any product containing human serum is potentially capable of transmitting diseases. Therefore, we must take due care in handling the bio safety of these products. 8- Always add reagents in the same order to minimize the difference in reaction time between the cavities. 9- As a safety measure, you can cover the plate during the reaction. If you opt for this procedure it must be established as routine. 10- You must ensure that the bottom of the cavity is clean and dry and there are no bubbles on the surface fluid before reading the plate. Do not let the cavities run dry during the test. 11- Do not expose reagents, especially the substrate, to strong light or hypochlorite fumes during storage or incubation steps. 12- We recommend applying the local, state and federal rules for environmental protection, so that disposal of reagents and biological material can be made in accordance with current legislation. 13- To obtain information related to biosafety or in case of accidents with the product, consult the MSDS (Material Safety Data Sheet) available on the website or upon request by the SAC (Advisory Service Customer) of Quibasa. SAMPLES Use serum or plasma (EDTA or Heparin). Hemolyzed or highly lipemic samples should not be used. Samples may be refrigerated at between 2 and 8 C for a maximum of 5 days. If samples can not be analyzed within 5 days, they can be stored for up to 30 days at -20ºC (freezer). PROCESS DESCRIPTION PREPARATION OF WORKING REAGENTS Washing Solution Dilute the contents of the Flask N o 3 (Concentrated Washing Solution) in 1000mL of distilled water or deionized water. Store between 2 and 8 C until expiration date printed on the original bottle. Can be stored at room temperature. In case of crystallization, heat it at 37 C until dissolution. Substrate - Working Solution Determine the amount of cavities to be used for preparation of an appropriate volume. Prepare the solution by mixing equal parts of Substrate A and Substrate B, 15 minutes before use. Keep it protected from light until used. To each cavity (test), use: 50 L of substrate A + 50 L of substrate B For example: mix 1 ml of Substrate A and 1 ml of Substrate B to two strips with 8 cavities (16 tests). Leftover reagent occurs. Use no later than one (1) hour after preparation. TECHNIQUE Before starting the assay, bring all reagents, samples, Standard References and controls to stabilize at room temperature (15-30 C) for at least 40 minutes. Return the strips of the plate will not be used for the original sealed packaging. 1- Select the wells to be used considering: Standards, controls and samples (either tested in duplicate); 2- Select the first cavity for Blank (OPTIONAL); 3- Add 100 ml of calibrator cut-off, negative control, positive control in the determined cavities; 4- Pipette 100 ml of Sample Diluents in certain cavities for samples and then pipette 5 ml of sample; 5- Mix gently for ± 30 seconds; Change occurs in color from green to blue in the cavities of the samples. Cover wells with plate sealer; 6- Incubate for 30 minutes ± 2 minutes in an incubator at 37 C ± 2 C; 7- Remove the sealing of wells; 8- Discard the contents of the wells by aspiration (Washer) or by decanting (manual); Use approximately 300 ml of Washing Solution, previously diluted to perform a total of five (5) washing cycles. To ensure drying of the plate at the end of the wash, hit the board for a few seconds on absorbent paper. Note: Poor washing and drying can cause inadequate results. 9- Pipette 100 ml of Conjugate into each well except in the Blank cavity (if you made this option); 10- Mix gently for ± 30 seconds. Cover cavities with plate sealer; 11- Incubate for 30 minutes ± 2 minutes in an incubator at 37 C ± 2 C; 12- Remove the sealer from plate cavities; 13- Repeat item 8; 14- WARNING Do one of the following: A) Pipette 100 ml of prepared substrate* - Working Solution (A+B) in each cavity. * See PREPARATION OF WORKING REAGENT Or B) Pipette 50 ml of Substrate A to each cavity. Pipette 50 ml of Substrate B into each cavity; 15- Shake gently for ± 30 seconds. Cover wells with plate sealer; 16- Incubate for 10 minutes ± 1 minute. In an incubator at 37 C ± 2 C; 17- Remove the sealer from plate cavities; 18- Pipette 50 ml of Stop Solution to each cavity; 19- Mix gently for ± 30 seconds; 20- Perform Reading: 450 nm (primary filter) / 630 nm (secondary filter) within 30 minutes (maximum). TECHNIQUE VERIFICATION Verify if the results obtained by the reading of the Reference Standards are compatible to the values below: ABSORBANCE Blank Cavity < 0,050 Negative Control < 0,100 Cut-Off Calibrator > 0,150 and < 0,450 Positive Control > 0,500 The absorbancies for the Reference Standards were obtained after the reduction of the blank absorbance. For a single filter reading (450 nm) consider a blank limit of < 0,100. If the values fall out from the expected values, technique must be repeated. CALCULATIONS QUALITATIVE Cut-Off regarded as the mean absorbance obtained with the Standard Reference B. Cut-Off Calibrator ABSORBANCE A1 = 0,250 A2 = 0,260 Average Absorbance from Cut-Off Calibrator (0, ,260) / 2 = 0,255 Calculate the index by dividing the sample absorbance by the value of the Cut-Off.

6 Example: RESULTS ABSORBANCE Sample 0,812 Cut-off Value 0,255 Index: Sample / Cut-off Value 0,812 / 0,255 = 3,18 RESULTS QUALITATIVE INDEX Negative < 0,9 Positive > 1,1 Undetermined 0,9 and 1,1 Note: In case of undetermined results, the sample must be retested. Samples that results have been obtained repeatedly undetermined should be retested using an alternative method. If the results remain uncertain, a new sample must be collected in two weeks. If the new sample is positive, the sample should be considered positive. PROCEDURE LIMITATIONS The interpretation of a diagnostic test, there should not be based on a single run. This should include confirmation of other tests before a sample is considered positive. A negative result does not exclude the possibility of exposure. Finally, all results should be interpreted in conjunction with other clinical information available. INTERNAL QUALITY CONTROL The Clinical Laboratory must have an internal quality control, where all procedures, rules, limits and tolerance to variations be clearly established. It is important to mention that all measurement systems present a analytical variety, and it must be monitor by the laboratory. Therefore, it is recommendable the use of controls, allowing the precision and accuracy of the dosages. PRODUCT PERFORMANCE QUALITY CONTROL CLINICAL SENSITIVITY AND SPECIFICITY BIOLISA Rubella IgM Kit analyzed clinical samples in comparison with other methods of EIA. The results show that the clinical sensitivity of the BIOLISA Rubella IgM kit is > 96,4% and clinical specificity is 99,9%. BIOLISA RUBELLA IgM METHOD BIOLISA Rubella IgM X Reference EIA REFERENCE EIA RESULTS POSITIVE NEGATIVE TOTAL POSITIVE NEGATIVE TOTAL RESULTS Clinical Sensitivity: 90,0% (55,5-99,8%)* Overall Agreement: 94,2% (85,8-98,4)* Clinical Specificity: 94,9% (85,8-98,9%)* * 95% Confidence Interval Accuracy REPEATABILITY 20 successive measurements were performed with three samples, using the same lot, resulting in the following results: REPEATABILITY SAMPLE Average 0,764 1,920 4,489 Standard Deviation 0,029 0,074 0,171 Coefficient of Variation (%) 3,807 3,879 3,807 REPRODUCIBILITY 20 measurements were performed for 3 consecutive days with three samples, using the same lot, obtaining the following results: REPRODUCIBILITY SAMPLE Average 0,754 1,926 4,420 Standard Deviation 0,009 0,010 0,062 Coefficient of Variation (%) 1,179 0,510 1,403 DIAGNOSTIC SIGNIFICANCE Rubella is a RNA virus, spherical, small envelope, which belongs to the Togaviridae family. It is commonly known as German or 3 days measles. The rubella virus infection is transmitted through droplets of saliva, resulting in mild contagious rash in children or young adults. In childhood, infection is a self-limiting, benign condition characterized by fever, sore head, lymphadenopathy, arthralgia, and conjunctivitis. However, infection during pregnancy, especially in the first quarter, can lead to miscarriage, intrauterine infection causes fetal death, or congenital anomalies. Congenital rubella depends on the period in which infection occurs and can result in complications disorders, including deafness, eye problems, including cataracts and glaucoma, congenital heart disease and mental retardation. IgM antibodies against rubella are produced initially, reaching detectable levels within 2-3 days and peak within days after onset of symptoms that remain detectable during the next 4-8 weeks. The diagnosis of recent infection or can be obtained by the presence of IgM antibodies in the initial sample. After several days, IgG antibodies appear after IgM, with a peak of days, varying levels persist for a lifetime. The presence of anti-rubella IgG antibodies is indicative of infection and / or immunity. NUMBER OF TESTS Presentation 1-96 tests Presentation tests Presentation tests BIBLIOGRAPHIC REFERENCES 1. Herrmann, KL. Rubella Virus. In: Manual of Clinical Microbiology. American Society for Microbiology 4th Edition (1985) Turgeon, ML. Rubella Infection. In: Immunology and Serology in Laboratory Medicine. 2nd Edition(1996) Chernesky, MA, Mahony JB. Rubella Virus. In: Manual of Clinical Microbiology. 6th Edition (1995) Voller, A, Bidwell, DE, A simple Method for Detecting Antibodies to Rubella. Brit. J. Exp. Pathol. (1975) 56: Rawls WE, Chernesky MA. Rubella Virus. Manual Clinical Immunology (1976) Millian, SJ, Wegman D. Rubella Serology: Applications, Limitations, and Interpretations. Amer. J. Pub. Health (1972) Bioclin Dados de arquivos QUALITY ASSURANCE Before being released for consumption, all Bioclin reagents are tested by the Department of Quality Control. The quality of reagents is assured until expiration date stated on the presentatio packaging, when stored and transported under appropriate conditions. MANUFACTURER S DATA QUIBASA QUÍMICA BÁSICA Ltda Rua Teles de Menezes, 92 - Santa Branca CEP Belo Horizonte - MG - Brasil Phone.: +55 (31) Fax: +55 (31) bioclin@bioclin.com.br CNPJ: / Indústria Brasileira CUSTOMER SERVICE Customer Advisory Service Phone.: sac@bioclin.com.br ANVISA registration for BIOLISA Rubella IgM Kit: Review: May/12