SUBSTRATOS ALTERNATIVOS AO ÁGAR NO ENRAIZAMENTO IN VITRO DE FRAMBOESEIRA E AMOREIRA-PRETA

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1 SUBSTRATOS ALTERNATIVOS AO ÁGAR NO ENRAIZAMENTO IN VITRO DE FRAMBOESEIRA E AMOREIRA-PRETA Juliana Padilha da Silva 1 ; Mariana Larrondo Bicca 1 ; Laura Reisdörfer Sommer 1 ; Zeni Fonseca Pinto Tomaz 1 ; Adriane Marinho de Assis 1 ; Márcia Wulff Schuch 1 1 Universidade Federal de Pelotas UFPel, julianap.silva@hotmail; mary.bicca@hotmail.com; laurarsommer@hotmail.com; zfptomaz@yahoo.com.br; agroadri@ig.com.br; marciaws@hotmail.com Resumo: A amoreira-preta (Rubus spp.) e a framboeseira (Rubus idaeus) pertencem ao grupo das pequenas frutas. A propagação dessas espécies pode ser realizada por micropropagação; entretanto, em função do alto custo dos materiais e equipamentos utilizados, a técnica necessita mais informações quanto aos produtos alternativos que podem ser usados no preparo dos meios de cultura. Assim, a substituição do ágar por substratos alternativos pode ser uma pratica promissora no ponto de vista econômico e funcional. Com base nesses aspectos, objetivou-se avaliar novas alternativas de substratos para o enraizamento in vitro de amoreira-preta e framboeseira. Microestacas foram coletadas de culturas in vitro de amoreira-preta Tupy e framboeseira Fall Gold e foram submetidas ao enraizamento in vitro em substratos alternativos ao ágar, utilizando vermiculita e casca de arroz carbonizada adicionados ao meio de cultura. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado, com 5 repetições. Após 50 dias, as variáveis avaliadas foram: porcentagem de enraizamento (%), número de raízes e comprimento médio de raiz (cm). Não foram constatadas diferenças significativas entre os tratamentos testados para todas as variáveis analisadas, dessa forma os substratos alternativos utilizados nesse experimento podem ser alternativas para redução de custo na fase de enraizamento in vitro. Palavras chave: pequenas frutas; propagação; microestacas INTRODUÇÃO O Brasil é considerado o terceiro maior produtor mundial de frutas. Dentre as frutíferas de clima temperado encontra-se o grupo das pequenas frutas. As pequenas frutas como a amoreira-preta e a framboeseira pertencem à família Rosaceae e ao gênero Rubus, na qual existem outros gêneros (Malus, Prunus, Pyrus) de importância para a fruticultura brasileira (ANTUNES, 2006). A propagação destas espécies é um aspecto relevante a ser considerado, tendo em vista que a utilização de mudas de qualidade é primordial para o sucesso nas áreas de cultivo. A propagação da amora-preta e framboesa pode ser feita por estacas de raízes, estacas aéreas ou rebentos originados de plantas cultivadas (ANTUNES, 1999). A cultura de tecidos, por meio da micropropagação, se torna uma alternativa viável que possibilita a obtenção de plantas idênticas a planta matriz em larga escala e com qualidade fitossanitária em um curto período de tempo, além de 1

2 necessitar pequeno espaço físico (SANTOS & RASEIRA, 1988; FACHINELLO et al., 2005). No método convencional de micropropagação, o enraizamento in vitro de culturas é uma das fases do protocolo; segmentos são enraizados em meio de cultura geleificado com ágar, com a posterior aclimatização e transferência das plantas enraizadas para casa de vegetação. Dentre as fases críticas na micropropagação está o enraizamento e aclimatização das culturas; tendo em vista que grande parte do material utilizado no Brasil é importado, resultando em um alto custo, assim essas etapas devem ser otimizadas visando a produção de mudas micropropagadas de amoreira-preta e framboeseira. (FERRI et al., 1998; LIMA- NISHIMURA et al., 2003). Dessa forma, a substituição do ágar por substratos no meio de cultura poderá ser uma alternativa promissora para reduzir custos na micropropagação. Diante do exposto, o objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito de substratos a base de vermiculita e casca de arroz carbonizada, como alternativa ao uso do ágar, na fase de enraizamento in vitro de plantas de amoreira-preta e framboeseira. MATERIAIS E MÉTODOS O experimento foi realizado de março a dezembro de 2015, no Laboratório de Propagação de Plantas Frutíferas da Faculdade de Agronomia Eliseu Maciel (FAEM), da Universidade Federal de Pelotas (UFPel). Para o estudo, foram utilizados segmentos nodais de amoreira-preta 'Tupy' e de framboeseira 'Fall Gold' oriundos de plantas matrizes micropropagadas. O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado com três tratamentos, constituídos por ágar, vermiculita e casca de arroz carbonizada, com cinco repetições (5 explantes por repetição). Culturas foram seccionadas e os segmentos nodais, de aproximadamente 2,5 cm, foram repicados para frascos de vidro (300 ml), correspondendo a uma repetição, contendo meio de cultura WPM Wood Plant Media (LLOYD & McCOWN, 1980) suplementado com 0,1 g.l -1 de mio-inositol, 30 g.l -1 de sacarose e 3,0 μm L -1 de ácido 3-indolbutírico (AIB), o ph do meio de cultura foi ajustado para 5,8. Após o ajuste do ph, para cada frasco foi adicionado 30 ml de meio de cultura líquido e os respectivos tratamentos, que consistiram no uso de três substratos para o desenvolvimento de raízes, o ágar na concentração de 6 g.l -1 ; 8 g de vermiculita por frasco (granulometria média) e 12 g de casca de arroz carbonizada por frasco (Figura 1). Os substratos utilizados foram previamente autoclavados a 121ºC e 1,5 atm de pressão, por 1 hora. Após a adição dos substratos os meios de enraizamento foram autoclavados a 121ºC e 1,5 atm de pressão por 20 min. Depois dos segmentos nodais repicados para os respectivos meios, os frascos foram vedados na parte superior com papel alumínio e envoltos com filme plástico (PVC) foram cultivados em sala de crescimento, com fotoperíodo de 16 horas, temperatura de 25 ± 2ºC e intensidade luminosa de 27 μmol.m-2s -1. Após 50 dias de cultivo, as culturas foram retiradas dos frascos e foram avaliados os seguintes parâmetros: porcentagem de enraizamento (%), número de raízes e comprimento médio de raízes principais (cm). 2

3 Os resultados foram submetidos à análise de variância e as médias, quando significativas, comparadas entre si pelo teste de Tukey a 5% de probabilidade. Fig. 1. Frascos de vidro contendo explantes de framboeseira Fall Gold (A) e amoreira-preta Tupy (B) em meio de cultura contendo ágar, vermiculita e casca de arroz carbonizada, respectivamente, no momento da instalação do experimento. FAEM-UFPel, Pelotas-RS, Foto: Juliana Padilha, RESULTADOS E DISCUSSÃO Para variável porcentagem de enraizamento, número de raízes e comprimento médio de raiz, não houve diferença significativa entre os tratamentos utilizados para a amoreira-preta e framboeseira (Tabela 1). Caldas et al. (1998), mencionaram que, na fase de enraizamento in vitro a vermiculita, umedecida com solução nutritiva pode favorecer a formação de raízes, provavelmente pela maior aeração que possui. De acordo com Hartmann et al. (2002), um substrato adequado para o enraizamento deve ser suficientemente poroso, a fim de permitir trocas gasosas eficientes, o que confirma os resultados obtidos neste experimento. O meio em que a planta irá se desenvolver, seja substrato ou meio de cultura, é muito importante para o crescimento vegetal, a principal característica é suprir as necessidades da planta em nutrientes, permitindo o desenvolvimento e a distribuição das raízes, resultando em plantas mais vigorosas. O efeito dos substratos na qualidade das raízes está relacionado, principalmente, com a porosidade, a qual afeta o teor de água retido e o seu equilíbrio com a aeração (HOFFMANN et al., 1994). 3

4 Tabela 1. Enraizamento (%), número de raízes e comprimento médio de raiz (cm), durante o enraizamento in vitro de amoreira-preta Tupy e framboeseira Fall Gold. Pelotas-RS, Enraizamento (%) Ágar 100,00 ns 92,00 ns Vermiculita 96,00 92,00 Casca de arroz carbonizada 100,00 96,00 Número de raízes Ágar 9,52 ns 4,04 ns Vermiculita 7,56 3,12 Casca de arroz carbonizada 6,08 2,64 Comprimento médio de raiz (cm) Ágar 2,72 ns 3,83 ns Vermiculita 1,41 2,87 Casca de arroz carbonizada 2,55 2,37 ns não significativo. O uso de substratos inertes, como por exemplo a vermiculita, auxiliam na redução dos custos em protocolos de micropropagação (GRATTAPAGLIA & MACHADO, 1998). Resultados similares com o uso de substratos alternativos foram reportados por Damiani e Schuch (2009), observaram que para o uso de substratos alternativos, como a vermiculita e perlita favorecem o desenvolvimento de raízes de cultivares de mirtilo. Assim, a substituição do ágar por outros materiais, pode ser uma alternativa promissora, devendo levar em consideração o menor custo e a disponibilidade desses materiais na região em que a propagação será realizada. CONCLUSÕES A vermiculita e a casca de arroz carbonizada podem ser utilizados em substituição ao ágar no enraizamento in vitro de amoreira-preta Tupy e framboeseira Fall Gold, sem afetar negativamente as taxas de enraizamento. REFERÊNCIAS ANTUNES, L.E.C. Aspectos fenológicos, propagação e conservação póscolheita de frutas de amoreira-preta (Rubus spp.) no sul de Minas Gerais p. Tese (Doutorado em Fitotecnia) - Universidade Federal de Lavras, Lavras, ANTUNES, L.E.C. Amora-preta (Rubus spp.). In: Revista Brasileira de Fruticultura, Jaboticabal, v. 28, n. 3,

5 CALDAS, L. S.; HARIDASAN, P.; FERREIRA, M. E. Meios nutritivos. In: TORRES, A. C.; CALDAS, L. S.; BUSO, J. A. (Ed.). Cultura de tecidos e transformação genética de plantas. Brasília: Embrapa-SPI/EmbrapaCNPH, p DAMIANI, C.R.; SCHUCH, M.W. Diferentes substratos e ambientes no enraizamento in vitro de mirtilo. Ciência Rural, Santa Maria, v. 39, n.2, p , FACHINELLO, J.C.; HOFFMANN, A.; NACHTIGAL, J.C. (Ed.). Propagação de plantas frutíferas. Brasília: Embrapa Informação Tecnológica, p.221 FERRI, V.C.; CENTELLAS, A.Q.; HELBIG, V.E.; FORTES, G. R. L. Uso de ágar, amido e ácido indolbutírico no enraizamento in vitro do porta-enxerto de macieira MM 111. Ciência Rural, Santa Maria, v.28, n.4, p , GRATTAPAGLIA, D.; MACHADO, M.A. Micropropagação. In: TORRES, A.C. et al. Cultura de tecidos e transformação genética de plantas. Brasília: Embrapa-SPI / Embrapa-CNPH, V.1, p HARTMANN, H.T.; KESTER, D. E.; DAVIES JR, R.T.; GENEVE, R. L. Plant propagation: principles e practices. 7. ed. New Jersey: Prentice Hall, 2002, 880p. HOFFMANN, A. Propagação de mirtilo (Vaccinium ashei Reade) através de estacas f. Dissertação (Mestrado em Agronomia) - Faculdade de Agronomia Eliseu Maciel, Universidade Federal de Pelotas, Pelotas, RS. LIMA-NISHIMURA, N.; QUOIRIN, M.; NADDAF, Y.G.; et al. A xyloglucan from seeds of the native Brazilian species Hymenaea courbaril for micropropagation of Marubakaido and Jonagored apples.plant Cell Reports, New York, v.21, p , LLOYD, G.; McMCOWN, Commercially feasible micropropagation of mountain laurel, kalmia latifólia, by use of shoot-tip culture. Journal Combined Proceedings Plant Propagators Society, v. 30, p , SANTOS, A. M.; RASEIRA, M. do C. B. Lançamento de cultivares de amoreirapreta. Pelotas: EMBRAPA-CNPFT, Não paginado (Informativo 23). 5