Relatório de Amostra Externa. Atividade Bactericida EN Princípio ativo: Cloreto de polihexametileno biguanida (0,1%) e mistura de
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- Maria das Dores de Barros Farias
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1 Relatório de Amostra Externa Atividade Bactericida EN 1040 Dados do produto Cliente: Indústria Farmacêutica Rioquímica Ltda. Nome do Produto: Germi Rio. Fabricante: Indústria Farmacêutica Rioquímica Ltda. Princípio ativo: Cloreto de polihexametileno biguanida (0,1%) e mistura de tensoativos catiônicos (0,55%). Período do teste Data da entrega do produto: Julho Data da realização do teste: 19/10/2015. Condições experimentais Controle de esterilidade do produto Para o controle de esterilidade do produto, esse foi semeado em ágar sangue e em meio líquido TSB (Tryptone soya broth) e incubados por até 48 horas a 37ºC.
2 Teste de eficiência do neutralizante: A eficiência do neutralizante foi testada pelo método de validação C, preconizado pela EN Teste de eficácia do desinfetante Método: Diluição-neutralização de acordo com EN Técnica: Pour plate. Concentrações do produto testadas: 0,44% (concentração ativa) e 0,22% (concentração não ativa). Diluente: Água destilada. Neutralizante: Polissorbato 80 (30 g/l), dodecil sulfato de sódio (4 g/l), lecitina (3 g/l) em tampão fosfato 2,5 mmol/l. Temperatura do teste: 20º C. Tempo de contato: 5 minutos. Leitura dos testes: 24 e 48 horas. Cepas controles do teste: ATCC (American Type Culture Collection) 6538 Staphylococcus aureus Critério para avaliação da atividade bactericida: Redução igual ou superior a 5 unidades logarítmicas entre Na e N0, onde: Redução logarítmica do teste (Log R) = Log N0 Log Na Log R 5: o produto apresenta atividade bactericida na concentração testada
3 Log R < 5: o produto não apresenta atividade bactericida na concentração testada N0 Contagem de colônias bacterianas em unidades formadoras de colônia (UFC) por ml da suspensão bacteriana inicial; Na Contagem de colônias bacterianas em UFC/ ml da suspensão bacteriana após a exposição à concentração do Germi Rio testada. Resultados Controle de esterilidade do produto: Foi observada ausência de crescimento bacteriano. Teste de eficiência do neutralizante: O neutralizante mostrou-se ativo frente ao produto em questão, já que a contagem de UFC/mL do inóculo inicialmente utilizado como controle foi igual àquela observada após adição do mesmo inóculo ao biocida neutralizado. Teste de eficácia do desinfetante Cepas bacterianas 1. ATCC 6538 Staphylococcus aureus A Pseudomonas aeruginosa (produtora de SPM-1) A contagem de UFC/mL da suspensão bacteriana inicial utilizada para a realização dos testes e a contagem da UFC/mL das placas resultantes do teste estão demonstradas na Tabela 1. A conversão logarítmica da contagem da UFC/mL encontra-se na Tabela 2. O resultado da redução logarítmica do inóculo bacteriano nas duas concentrações testadas do desinfetante pode ser
4 observada na Tabela 3. As fotografias das placas dos testes realizados encontram-se anexas a esse relatório. Tabela 1. Contagem de colônias bacterianas em UFC/mL da suspensão bacteriana inicial e da suspensão bacteriana após a exposição à concentração do Germi Rio testada. CEPAS N0 Na 0,44% Na 0,22% S. aureus ATCC ,2 x 10 7 < 140 < 140 P. aeruginosa A SPM-1 4,9 x 10 7 < 140 < 140 Tabela 2. Conversão logarítmica dos valores N0 e Na. CEPA Log N0 Log Na 0,44% Log Na 0,22% S. aureus ATCC ,62 < 2,15 < 2,15 P. aeruginosa A SPM-1 7,69 < 2,15 < 2,15 Tabela 3. Redução logarítmica (LogR) entre N0 e Na nas duas concentrações testadas do Germi Rio. CEPA Log Na 0,44% Log Na 0,22% S. aureus ATCC 6538 > 5,47 > 5,47 P. aeruginosa A SPM-1 > 5,54 > 5,54 Conclusão A solução de Germi Rio testada demonstrou atividade bactericida nas duas concentrações utilizadas contra os organismos Staphylococcus aureus ATCC 6538 e Pseudomonas aeruginosa A produtora de SPM-1.
5 Profª Drª Ana Cristina Gales Diretora do Laboratório Alerta Professora Adjunta da Disciplina de Infectologia Referências Bibliográficas European Committee for Standardization European Standard. Chemical desinfectants and antiseptics Quantitative suspension test for the evaluation of basic bactericidal activity of chemical desinfectants and antiseptics. EN Management Centre, Brussels:1-40. Toleman MA, Simm AM, Murphy TA, Gales AC, Biedenbach DJ, Jones RN, Walsh TR Molecular characterization of SPM-1, a novel metallo-beta-lactamase isolated in Latin America: report from the SENTRY antimicrobial surveillance programme. J Antimicrob Chemother. Nov;50(5):673-9.
6 Anexo Germi Rio Figura 1. ATCC 6538 Staphylococcus aureus. (A) Placa da contagem de UFC/mL da suspensão inicial; (B) placa da contagem de UFC/mL na concentração 0,44% do desinfetante; (C) placa da contagem de UFC/mL na concentração 0,22% do desinfetante. A B C Figura 2. Pseudomonas aeruginosa A produtora de SPM-1. (A) Placa da contagem de UFC/mL da suspensão inicial; (B) placa da contagem de UFC/mL na concentração 0,44% do desinfetante; (C) placa da contagem de UFC/mL na concentração 0,22% do desinfetante. A B C
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