CELLTOCELL REJUVENESCIMENTO ATRAVÉS DA COMUNICAÇÃO CELULAR. INCI name: Crocus Chrysanthus Bulb Extract (and) Acacia Senegal Gum (and) Aqua/Water

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1 CELLTOCELL REJUVENESCIMENTO ATRAVÉS DA COMUNICAÇÃO CELULAR INCI name: Crocus Chrysanthus Bulb Extract (and) Acacia Senegal Gum (and) Aqua/Water O envelhecimento cutâneo é caracterizado por uma diminuição da expressão de fatores de crescimento epidérmicos. Estas substâncias são vitais para o reparo e homeostase cutânea. Sua diminuição resulta no declínio da biossíntese de proteínas da matriz extracelular, como colágeno e elastina [1]. Os fatores de crescimento são na maioria dos casos, proteínas que agem como mensageiras e permitem a comunicação entre as células em nossos tecidos. Ao se ligar a receptores específicos na superfície de células epidérmicas, o fator de crescimento, ativa a proliferação ou a diferenciação destas células. Além disso, atuam no processo de cicatrização de feridas, na regeneração contínua e na reparação cutânea [2]. Geralmente, dermocosméticos compostos por fatores de crescimento possuem instabilidade e dificuldade de penetrar nas camadas mais profundas da pele, uma vez que são moléculas grandes, fazendo com que atuem somente no estrato córneo. Além disso, estudos demonstram que essas substâncias são instáveis em formulações cosméticas e rapidamente degradadas por enzimas proteases após aplicação tópica. Todas estas características fazem com que os fatores de crescimento possuam dificuldade em atingir os fibroblastos da derme, onde deveriam ligar-se aos receptores de membranas para induzir a síntese de proteínas da matriz. [1] Mediante a estas situações, a forma mais indicada para alcançar bons resultados, seria estimular as próprias funções fisiológicas da pele, a fim de provocar a produção natural do fator de crescimento da matriz dérmica, através da comunicação celular [3]. Neste sentido, CellToCell atua estimulando os queratinócitos através da comunicação celular de forma natural e não invasiva, a secretar fisiologicamente fatores de crescimento. Sendo assim, há melhora das propriedades biomecânicas da pele, restabelecendo a síntese de colágeno e elastina. Concentração de uso A concentração de uso indicada com base nos estudos de eficácia é de 2%, podendo variar de acordo com o tipo de formulação e associações. Indicações e Aplicações É indicado para tratamentos faciais e corporais específicos para peles crono e/ou fotoenvelhecidas, pós-procedimentos estéticos e para tratamentos intensivos em peles maduras. Cremes, loções, gel, gel-creme, géis de banhos, leites corporais; Maquiagem; Produtos para cuidados faciais; Protetor solar para rosto. Devido, e desta forma, sintetizam menos colágeno e elastina. Mecanismo de ação No processo de comunicação celular da derme, os queratinócitos e fibroblastos, são capazes de enviar e receber informações através de mensageiros como os fatores de crescimento e citocinas. Esta comunicação é essencial para a reparação, regeneração e renovação de tecidos. Com a idade há diminuição dos fatores de crescimento naturais cutâneos, desta forma, o processo de comunicação é reduzido. Isto afeta fortemente a matriz extracelular, responsável pela estrutura e propriedades biomecânicas da pele (elasticidade, firmeza), bem como a sua espessura e densidade. Além disso, na derme, passa a ter maior capacidade de gerar Metaloproteinases de Matriz (MMP), capaz de degradar a matriz existente. Isto leva a um desequilíbrio na renovação celular, onde a sua degradação ultrapassa a biossíntese,

2 resultando em importantes alterações na pele como a perda da elasticidade, firmeza e densidade, levando a flacidez e afinamento. A melhor forma de restabelecer esta função é alcançar os fibroblastos via comunicação celular. Geralmente estas células não são facilmente alcançadas por cosméticos aplicados topicamente. No entanto, como se comunicam com queratinócitos que estão nas camadas mais superficiais da pele, poderiam ser atingidos através do processo de comunicação celular uma nova estratégia para cosméticos. CellToCell é um ativo desenvolvido a partir do extrato de bulbos de Crocus chrysanthus (açafrão), com capacidade de mimetizar e amplificar a atividade dos fatores de crescimento naturais da pele. Diversos estudos relatam que sua atividade sobre os fibroblastos é comparável à do fator de crescimento de transformação TGF-β, resultando no estimulo da sinalização celular. (colágeno e elastina). CellToCell possui atividade Factor-Like (Fator de Crescimento-Like), age na pele enviando os sinais para que as células secretem uma maior quantidade de fatores de crescimento a fim de reduzir o processo de envelhecimento cronológico da pele. Figura 1: Mecanismo da sinalização celular após estimulo com CellToCell Vantagens Reestabelece a comunicação celular cutânea Booster de colágeno e elastina Estimula os fatores de crescimento naturais da pele (TGF) Aumenta a resistência, a firmeza e a tonicidade da pele Melhora a textura e elasticidade cutânea 100% natural, livre de conservantes Ativo premiado: InCometics Europe, InCosmetics Asia e BSB Award.

3 Comprovações de eficácia 1. Benefícios sobre a epiderme Comunicação CelltoCell (in vitro) O efeito de CellToCell na comunicação entre queratinócitos e fibroblastos foi avaliado utilizando a tecnologia avançada de Microarray DNA (técnica de alta performance), comparado com o fator de crescimento TGF-β, sendo conduzido da seguinte forma: Queratinócitos e fibroblastos foram diretamente tratados com CellToCell. Fibroblastos foram indiretamente tratados com CellToCell, a fim de mimetizar os processos fisiológicos de comunicação. Para isso, fibroblastos foram incubados com o subproduto dos queratinócitos tratados primeiramente com CellToCell. Método: Foram utilizados queratinócitos de um doador de 50 anos de idade, onde as amostras foram tratadas ou não com CellToCell e submetidas a cultura por um período de 24 horas. As culturas destes queratinócitos foram centrifugadas para separar o subproduto das células a partir do sobrenadante. Em seguida, as células foram lavadas e a expressão de fatores de crescimento tipicamente expressa nestas células foram analisadas pelo método de PCR quantitativo. Da mesma forma, pool de fibroblastos de doadores de mais de 30 anos, foram tratados ou não com: Subprodutos previamente obtidos dos queratinócitos não tratados (controle). Subprodutos previamente obtidos dos queratinócitos tratados com CellToCell. TGF-β (controle positivo). CellToCell (controle interno) No final da incubação (24 horas), as células foram lavadas e a expressão das proteínas de matriz nestas células foi determinada pelo método PCR quantitativo. Figura 2: Os subprodutos gerados pelos queratinócitos humanos, foram adicionados nas culturas de fibroblastos, a fim de determinar o grau de comunicação celular e geração de fatores de crescimento comumente secretados por estas células. 2. Atividade Factor-Like - Fator de Crescimento-Like (in vitro) A análise de expressão gênica, realizada em fibroblastos incubados com os subprodutos dos queratinócitos humanos gerados no teste de 24 horas, mostrou que: O subproduto de queratinócitos não tratado com CellToCell, teve um efeito próenvelhecimento em fibroblastos (controle). Isto resultou em uma redução significativa da expressão de elastina e da enzima Lisil oxidase- Like (LOXL-2), enzima envolvida na formação de fibras elásticas. Como esperado, TGF-β teve um efeito anti-envelhecimento em fibroblastos, uma vez que provocou um forte aumento da expressão de elastina e da LOXL-2. O subproduto dos queratinócitos tratados com CellToCell, demonstrou um forte efeito anti-envelhecimento comparável à do TGF-β.

4 Gráfico 1. Expressão dos genes em comparação ao controle após 24 horas: CellToCell promoveu um aumento de cerca de 12 vezes das fibras de elastina em fibroblastos humanos e provou um aumento de mais de 4 vezes da expressão da enzima LOXL-2, em relação ao controle. Durante o estudo descrito anteriormente, o gene de expressão que codifica o Fator de Crescimento do Tecido Conjuntivo (CTGF) também foi analisado em fibroblastos após 24h e 72h de incubação com os mesmos subprodutos dos testes anteriores. CTGF estimula a produção de colágeno pelos fibroblastos, que é significativamente reduzido na pele envelhecida. Subprodutos de queratinócitos não tratados apresentaram um efeito de envelhecimento, reduzindo significativamente a expressão de CTGF. Da mesma forma, secreções de queratinócitos tratados com CellToCell apresentaram um efeito semelhante a TGF-β, promovendo um aumento da expressão de CTGF. Isto indica que o efeito estimulador sobre a síntese de proteínas da matriz é devido aos compostos secretados pelos queratinócitos tratados com o ativo, comprovando que CellToCell pode reverter o processo de envelhecimento, estimulando a comunicação entre queratinócitos e fibroblastos na pele envelhecida. Gráfico 2. CellToCell promoveu um aumento de cerca 460% da estimulação de CTGF em fibroblastos humanos após 72h, comprovando o potente efeito de comunicação celular entre estas células. Outros estudos observaram a análise do gene de matriz conduzida em queratinócitos. Os resultados demonstraram que CellToCell através da comunicação celular, aumentou a expressão de fatores de crescimento importantes na diferenciação além do crescimento de queratinócitos nos tecidos, reparando e restabelecendo a comunicação entre a derme e epiderme: Assim, o efeito antienvelhecimento de CellToCell depende da estimulação dos queratinócitos para otimizar a liberação dos fatores de crescimento. Estes fatores de crescimento abaixo são capazes de aumentar a síntese de proteínas da matriz na derme. Fator de crescimento de fibroblastos 5 (FGF-5). Fator de crescimento de fibroblastos 7 (FGF-7). Fator de crescimento do Tecido Conjuntivo (CTGF). Fator de crescimento da proteína de ligação Insulina-Like 6 (ILGFBP6).

5 Gráfico 3. Estimulação dos fatores de crescimento em queratinócitos humanos, promovidos por CellToCell. 3. Rejuvenescimento da matriz após duas semanas de tratamento com CellToCell (in vivo) Um creme contendo 0,4% de CellToCell foi aplicado duas vezes ao dia no lado interior do antebraço de uma mulher de 53 anos de idade, enquanto o seu outro braço foi tratado com placebo. A análise da matriz da pele foi realizada utilizando um microscópio 3D de alta resolução. Esta técnica inovadora não invasiva visualiza em três dimensões (3D) as estruturas mais profundas da pele. Colágeno e elastina foram visualizadas antes e depois das duas semanas de tratamento e o seu conteúdo foi medido na derme papilar e na parte superior da derme reticular. Os resultados mostraram, já após duas semanas de tratamento, que CellToCell aumentou o teor dos dois componentes principais da estrutura da pele em comparação ao placebo: Mais de 115%** de colágeno Mais de 25%*** de elastina **p < 0.001, ***p < 0.01 CellToCell é o único ativo no mundo com comprovação de eficácia in vivo para aumento de produção de colágeno e elastina. Gráfico 3. Aumento significativo do colágeno e elastina promovido por CellToCell, em comparação ao placebo (**p < 0.001, ***p < 0.01).

6 4. Efeito firmador promovido por CellToCell (in vivo) Foram recrutadas 20 mulheres com idades entre anos (média: 47,1) aplicaram um creme contendo ou não CellToCell na concentração de 2%, duas vezes ao dia durante 28 dias no lado de dentro do antebraço. A melhora da firmeza da pele foi determinada utilizando um Cutometer (sonda não invasiva para medições da pele), onde os resultados mostraram que CellToCell aumentou significativamente a firmeza da pele: Mais de 11% após 14 dias **. Cerca de 13% ** após 28 dias. ** p < 0.05 versus placebo Gráfico 4. A análise comprova o rápido efeito firmador da pele promovido por CellToCell (28 dias) em comparação ao placebo (** p < 0.05 versus placebo). Os estudos clínicos mostraram resultados promissores, mesmo após 2 semanas de tratamento com CellToCell, onde houve um aumento muito significativo do conteúdo de colágeno e elastina e a firmeza da pele foi melhorada. Desta forma, CellToCell pode rejuvenescer a pele, graças a sua atividade de comunicação celular, estimular a síntese de fatores de crescimento naturais da matriz cutânea, e assim preservar e melhorar as propriedades biomecânicas da pele, bem como o viço e maciez. 5. Avaliação de eficácia percebida Foram avaliadas 42 mulheres, com idade entre 50 e 60 anos. As voluntárias foram divididas em dois grupos. No primeiro grupo, as mulheres aplicaram na face uma emulsão contendo 2% de CellToCell durante 56 dias, duas vezes ao dia. O mesmo protocolo foi seguido pelo segundo grupo, porém utilizando placebo. No final do estudo, as voluntárias responderam um questionário que avaliava se haviam percebido alguma melhora em alguns critérios específicos.

7 Celltocell Redimensionada** Parece mais jovem** Mais firme*** Preenchido* Tonificada*** Figura 3: Percepção do efeito firmador CellToCell 71% das voluntárias que utilizaram CellToCell, consideraram um aumento da firmeza cutânea. 67% notaram melhora no tônus. 67% disseram perceber aparência mais jovem. 6. Efeito antirrugas visível Onze mulheres com idades entre 40 e 57 anos, aplicaram um creme contendo 2% de CellToCell, duas vezes ao dia, durante 28 dias. Foram tiradas fotos, antes e após o final do tratamento. A análise das imagens apresentou visível redução da profundidade das rugas e pés de galinha em comparação com as imagens observadas no início do tratamento. Início Após 28 dias Figura 4: Avaliação fotográfica de redução de rugas. Recomendações farmacotécnicas CellToCell apresenta-se na forma pó, é facilmente solúvel em água a temperatura ambiente. Pode ser adicionado previamente dissolvido, em bases prontas ou no final do processo de manipulação da base em temperaturas abaixo de 50ºC. ph de estabilidade: 4,0 7,0.

8 Deve-se atentar a quantidade de água utilizada na solubilização, pois algumas vezes pode ser que a viscosidade das bases seja diminuída, principalmente em casos de bases de caráter hidrossolúvel. Associações CellToCell pode ser associado com hidratantes, emolientes, formadores de filme, outros ativos com ação antienvelhecimento, antioxidantes, vitaminas destinadas ao uso tópico (A, E e C, etc.), entre outros. Quando adicionado em formulações para o rosto, o ideal é combinar com bases mais leves e de alta penetração; Neste caso a sugestão de bases dermatológicas é Equilibrium e Facility. Quando adicionado em formulações para o corpo, é mais indicada a Nostrabase Loção. Pode também ser formulado para rosto e corpo juntamente com filtro solar, e para isso a indicação é a Nostrabase Filtro FPS30. Como as aplicações são diversas, existem várias possibilidades de fragrâncias, tais como Amber Romance (corpo) e Melão & Orquidea (rosto). Para produtos masculinos a fragrância sugerida é a Perola Prata. Referências bibliográficas 1. SCHMID D, SACHER R, et al. Stimulation of Growth Factor Communication between epidermis and dermis by Crocus chrysanthus bulb extract. Mibelle Biochemistry, June WERNER S, KRIEG T, et al. J Invest Dermatol, 127, pp , METHA RC and FITZPATRICK RE. Dermatologic Therapy 20, PP , Material do Fabricante Mibelle Biochemistry/ Suiça Última atualização: 18/11/2014GD. 16/01/2014 MJD.

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