CÂNCER DE PULMÃO NÃO PEQUENAS CÉLULAS

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1 II CURSO DE DE BIOLOGIA MOLECULAR 27 DE AGOSTO DE 2011 CÂNCER DE PULMÃO NÃO PEQUENAS CÉLULAS Clarissa Baldotto

2 xxx O MARCO MOLECULAR

3 xxx O QUE O CLÍNICO PRECISA SABER? IDENTIFICAR UM ALVO DE ONCOGÊNESE ENCONTRAR UM BIOMARCADOR ESTABELECER A EFICÁCIA

4 BIOLOGIA MOLECULAR DO CÂNCER DE PULMÃO xxx EGFR Descrição da via Como interpretar o laudo Perguntas mais frequentes (qual mutação buscamos, onde buscá-las,) Resistência aos TKIs (EGFR, cmet) EML4-ALK Descrição Métodos de diagnóstico BRAF e etc

5

6 VIA DO EGFR

7 ATIVAÇÃO DO EGFR

8 ALTERAÇÕES TESTADAS DO EGFR EXPRESSÃO DA PROTEÍNA POR IMUNOHISTOQUÍMICA NÚMERO DE CÓPIAS DO GENE EGFR POR FISH STATUS MUTACIONAL DO EGFR POR SEQUENCIAMENTO

9 QUAL TESTE UTILIZAR? VALIDAÇÃO EM ESTUDO CLÍNICO CAPACIDADE DE PREDIÇÃO

10 xxx EGFR QUAL É O MARCADOR PREDITIVO? Kobayashi S. NEJM 2006; 352: 786.

11 xxx EGFR QUAL É O MARCADOR PREDITIVO? INTEREST Pacientes com FISH +

12 xxx EGFR Resultados moleculares IPASS SLP

13 xxx EGFR Resultados moleculares IPASS FISH pos/ EGFR mut FISH pos/ EGFR selvagem

14 xxx EGFR Resultados moleculares IPASS FISH neg / EGFR mut FISH neg/ EGFR selvagem

15 MUTAÇÕES DE EGFR

16 MUTAÇÕES DE EGFR

17 DECIFRANDO O CÓDIGO

18 MUTAÇÕES DE EGFR

19 xxx EGFR Desmistificando o laudo Exon 21

20 xxx EGFR Desmistificando o laudo Exon 21

21 xxx EGFR Desmistificando o laudo Aminoácido 3 letras 1 letra

22 EXEMPLO

23 xxx TIPOS DE MUTAÇÕES DE EGFR ALTA SENSIBILIDADE CLASSIFICAÇÃO DE ACORDO COM A SENSIBILIDADE AO TKI Deleções exon 19 L858R (exon 21) L861Q (exon 21) G719S (exon 18) SENSIBILIDADE INTERMEDIÁRIA (erlotinibe > gefitinibe?) D761Y (exon 19) L747S (exon 19) RESISTÊNCIA T790M (exon 20) Inserções no exon 20

24 xxx MÉTODOS DE DETECÇÃO DA MUTAÇÃO MÉTODOS PCR/ Sequenciamento Nested PCR/ Sequenciamento PCR/HRMA/dHPLC (MELT) ARMS PNA/LNA Clamp SNAPSHOT ME PCR/ Sequenciamento TECNOLOGIAS DE SCREENING DETECÇÃO POR MUTAÇÃO ESPECIFICA

25 xxx O QUE O CLÍNICO PRECISA SABER? - EGFR IDENTIFICAR UM ALVO DE ONCOGÊNESE EGFR É UM DRIVER DA ONCOGÊNESE ENCONTRAR UM BIOMARCADOR A PESQUISA DE MUTAÇÃO DE EGFR É O PADRÃO OURO ESTABELECER A EFICÁCIA VÁRIOS ESTUDOS DE FASE III

26 DÚVIDAS CRUÉIS QUEM BIOPSIAR ONDE BIOPSIAR E QUANDO TUDO FALHAR?

27 xxx EM QUEM PESQUISAR? Frequência de mutação de EGFR por (A) carga tabágica e (B) sexo Não tabagista Tabagista Ex-tabagista Homens Mulheres JClinOncol 2011; DOI: /JCO

28 xxx O TUMOR É HOMOGÊNEO? Três pequenas áreas foram selecionadas nos 50 tumores Sem diferença de mutegfr Cinco tumores foram dissecados em 100 ou mais partes Sem diferença de mutegfr Yatabe Y. J Clin Oncol 29:

29 xxx PSEUDO-HETEROGENEIDADE TUMORAL MASI Yatabe Y. J Clin Oncol 29:

30 xxx RESISTÊNCIA AOS EGFR TKIS Primária (< 10%) Precoce Tardia Mecanismo desconhecido T790M : 50% Hiperexpressão de cmet : 20% Outros: 30%

31 xxx RESISTÊNCIA AOS EGFR TKIS

32 xxx EGFR Mutação T790M Mutação pontual adquirida Mudança de uma treonina para metionina no códon 790 do exon 20 Kobayashi S. NEJM 2006; 352: 786.

33 xxx RESISTÊNCIA AOS EGFR TKIS

34 xxx INCIDÊNCIA DA MUTAÇÃO T790M

35 SIGNIFICADO DA MUTAÇÃO T90M INICIAL SLP MEDIANA T790M positiva T790M negativa ROSELL, ASCO 2010

36 SIGNIFICADO DA MUTAÇÃO T90M ADQUIRIDA SLP MEDIANA SG MEDIANA T790M positiva: 19 meses T790M negativa: 12 meses T790M positiva: 39 meses T790M negativa: 26 meses Oxnard et al. CCR publication on line Dez 2010

37 xxx OPÇÕES ATUAIS DE TRATAMENTO Continuar TKI Continuar TKI e adicionar QT Continuar TKI e Adicionar CETUXIMABE Parar TKI e adicionar QT TKI irreversível (estudo) Estudos Clínicos

38 xxx OPÇÕES ATUAIS DE TRATAMENTO Continuar TKI Continuar TKI e adicionar QT Continuar TKI e Adicionar CETUXIMABE Parar TKI e adicionar QT TKI irreversível (estudo) Estudos Clínicos

39 xxx PROBLEMA DE RECIST ASPIRATION STUDY CPNPC avançado EGFR mutado n=204 ERLOTINIBE PD pelo RECIST ERLOTINIBE PD por decisão médica PFS 1

40 xxx OPÇÕES ATUAIS DE TRATAMENTO Continuar TKI Continuar TKI e adicionar QT Continuar TKI e Adicionar CETUXIMABE Estudo fase II (BIBW e Cetuximabe)) Parar TKI e adicionar QT TKI irreversível (estudo) Estudos Clínicos

41 xxx REVERTENDO A RESISTÊNCIA H1650 Deleção exon 19 H1975 Exon 20 T790M Exon 21 L858R Mok et al. Dados não publicados. WCLC 2011.

42 xxx BIBW Cetuximabe Jangijian et al. ASCO Abst # 7525

43 BIBW CETUXIMABE: Resposta

44 xxx Met

45 xxx MET - EGFR

46

47 xxx cmet - MetMAb Inibe a estimulação da via pelo HGF

48 xxx MET Mab: IHQ

49 xxx MET Mab em pacientes com IHQpos

50 xxx O QUE O CLÍNICO PRECISA SABER? - MET IDENTIFICAR UM ALVO DE ONCOGÊNESE A HIPEREXPRESSÃO DE C-MET ESTÁ ASSOCIADA A CRESCIMENTO TUMORAL ENCONTRAR UM BIOMARCADOR IHQ É PROMISSORA PARA MetMab ESTABELECER A EFICÁCIA ESTUDOS PROMISSORES DE FASE II FASE III EM ANDAMENTO

51 xxx ESTUDO IDEAL T790M TKI irreversível RESISTÊNCIA A TKI BIÓPSIA MANDATÓRIA C-MET MetMab + TKI Outro Quimioterapia

52 xxx TRANSLOCAÇÕES DE ALK 1) 2)

53 xxx TRANSLOCAÇÕES DE ALK

54 xxx TESTE PARA IDENTIFICAR ALK - FISH

55 xxx TESTE PARA IDENTIFICAR ALK - FISH

56 xxx TESTE PARA IDENTIFICAR ALK - FISH CRITÉRIOS DE POSITIVIDADE A separação (split) de 3 ALK/5 ALK ocorre quando os sinais verde/vermelho estão separados por um intervalo > 2 sinais de diâmetro A amostra é positiva para o rearranjo de ALK quando os sinais de split ou sinais isolados de 3 ALK estão presentes em > 15% das células tumorais CONSIDERAÇÕES Mínimo de 50 células tumorais Validado em estudo clínico (Kwak et al. NEJM, 2010) Reconhece outros parceiros de fusão

57 xxx TESTE PARA IDENTIFICAR ALK FUTURO?

58 xxx Sobrevida Global Criotinibe 2 a e 3 a linhas

59 xxx ESTUDOS CLÍNICOS COM CRIZOTINIBE

60 xxx O QUE O CLÍNICO PRECISA SABER? EML4 - ALK IDENTIFICAR UM ALVO DE ONCOGÊNESE EML4-ALK É UM DRIVER DA ONCOGÊNESE ENCONTRAR UM BIOMARCADOR FISH É O PADRÃO OURO A IHQ É PROMISSORA ESTABELECER A EFICÁCIA ESTUDOS DE FASE II PROMISSORES ESTUDOS DE FASE III EM ANDAMENTO

61 xxx BRAF

62 xxx BRAF CARACTERÍSTICAS CLÍNICAS Paik et al. J Clin Oncol 29:

63 xxx BRAF MUTAÇÕES A: CPNPC B: Melanoma Paik et al. J Clin Oncol 29:

64 xxx II CURSO DE BIOLOGIA MOLECULAR Doutor, aqui está meu perfil molecular Clarissa Baldotto

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