CÂNCER DE PULMÃO NÃO PEQUENAS CÉLULAS
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- André Balsemão Fidalgo
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1 II CURSO DE DE BIOLOGIA MOLECULAR 27 DE AGOSTO DE 2011 CÂNCER DE PULMÃO NÃO PEQUENAS CÉLULAS Clarissa Baldotto
2 xxx O MARCO MOLECULAR
3 xxx O QUE O CLÍNICO PRECISA SABER? IDENTIFICAR UM ALVO DE ONCOGÊNESE ENCONTRAR UM BIOMARCADOR ESTABELECER A EFICÁCIA
4 BIOLOGIA MOLECULAR DO CÂNCER DE PULMÃO xxx EGFR Descrição da via Como interpretar o laudo Perguntas mais frequentes (qual mutação buscamos, onde buscá-las,) Resistência aos TKIs (EGFR, cmet) EML4-ALK Descrição Métodos de diagnóstico BRAF e etc
5
6 VIA DO EGFR
7 ATIVAÇÃO DO EGFR
8 ALTERAÇÕES TESTADAS DO EGFR EXPRESSÃO DA PROTEÍNA POR IMUNOHISTOQUÍMICA NÚMERO DE CÓPIAS DO GENE EGFR POR FISH STATUS MUTACIONAL DO EGFR POR SEQUENCIAMENTO
9 QUAL TESTE UTILIZAR? VALIDAÇÃO EM ESTUDO CLÍNICO CAPACIDADE DE PREDIÇÃO
10 xxx EGFR QUAL É O MARCADOR PREDITIVO? Kobayashi S. NEJM 2006; 352: 786.
11 xxx EGFR QUAL É O MARCADOR PREDITIVO? INTEREST Pacientes com FISH +
12 xxx EGFR Resultados moleculares IPASS SLP
13 xxx EGFR Resultados moleculares IPASS FISH pos/ EGFR mut FISH pos/ EGFR selvagem
14 xxx EGFR Resultados moleculares IPASS FISH neg / EGFR mut FISH neg/ EGFR selvagem
15 MUTAÇÕES DE EGFR
16 MUTAÇÕES DE EGFR
17 DECIFRANDO O CÓDIGO
18 MUTAÇÕES DE EGFR
19 xxx EGFR Desmistificando o laudo Exon 21
20 xxx EGFR Desmistificando o laudo Exon 21
21 xxx EGFR Desmistificando o laudo Aminoácido 3 letras 1 letra
22 EXEMPLO
23 xxx TIPOS DE MUTAÇÕES DE EGFR ALTA SENSIBILIDADE CLASSIFICAÇÃO DE ACORDO COM A SENSIBILIDADE AO TKI Deleções exon 19 L858R (exon 21) L861Q (exon 21) G719S (exon 18) SENSIBILIDADE INTERMEDIÁRIA (erlotinibe > gefitinibe?) D761Y (exon 19) L747S (exon 19) RESISTÊNCIA T790M (exon 20) Inserções no exon 20
24 xxx MÉTODOS DE DETECÇÃO DA MUTAÇÃO MÉTODOS PCR/ Sequenciamento Nested PCR/ Sequenciamento PCR/HRMA/dHPLC (MELT) ARMS PNA/LNA Clamp SNAPSHOT ME PCR/ Sequenciamento TECNOLOGIAS DE SCREENING DETECÇÃO POR MUTAÇÃO ESPECIFICA
25 xxx O QUE O CLÍNICO PRECISA SABER? - EGFR IDENTIFICAR UM ALVO DE ONCOGÊNESE EGFR É UM DRIVER DA ONCOGÊNESE ENCONTRAR UM BIOMARCADOR A PESQUISA DE MUTAÇÃO DE EGFR É O PADRÃO OURO ESTABELECER A EFICÁCIA VÁRIOS ESTUDOS DE FASE III
26 DÚVIDAS CRUÉIS QUEM BIOPSIAR ONDE BIOPSIAR E QUANDO TUDO FALHAR?
27 xxx EM QUEM PESQUISAR? Frequência de mutação de EGFR por (A) carga tabágica e (B) sexo Não tabagista Tabagista Ex-tabagista Homens Mulheres JClinOncol 2011; DOI: /JCO
28 xxx O TUMOR É HOMOGÊNEO? Três pequenas áreas foram selecionadas nos 50 tumores Sem diferença de mutegfr Cinco tumores foram dissecados em 100 ou mais partes Sem diferença de mutegfr Yatabe Y. J Clin Oncol 29:
29 xxx PSEUDO-HETEROGENEIDADE TUMORAL MASI Yatabe Y. J Clin Oncol 29:
30 xxx RESISTÊNCIA AOS EGFR TKIS Primária (< 10%) Precoce Tardia Mecanismo desconhecido T790M : 50% Hiperexpressão de cmet : 20% Outros: 30%
31 xxx RESISTÊNCIA AOS EGFR TKIS
32 xxx EGFR Mutação T790M Mutação pontual adquirida Mudança de uma treonina para metionina no códon 790 do exon 20 Kobayashi S. NEJM 2006; 352: 786.
33 xxx RESISTÊNCIA AOS EGFR TKIS
34 xxx INCIDÊNCIA DA MUTAÇÃO T790M
35 SIGNIFICADO DA MUTAÇÃO T90M INICIAL SLP MEDIANA T790M positiva T790M negativa ROSELL, ASCO 2010
36 SIGNIFICADO DA MUTAÇÃO T90M ADQUIRIDA SLP MEDIANA SG MEDIANA T790M positiva: 19 meses T790M negativa: 12 meses T790M positiva: 39 meses T790M negativa: 26 meses Oxnard et al. CCR publication on line Dez 2010
37 xxx OPÇÕES ATUAIS DE TRATAMENTO Continuar TKI Continuar TKI e adicionar QT Continuar TKI e Adicionar CETUXIMABE Parar TKI e adicionar QT TKI irreversível (estudo) Estudos Clínicos
38 xxx OPÇÕES ATUAIS DE TRATAMENTO Continuar TKI Continuar TKI e adicionar QT Continuar TKI e Adicionar CETUXIMABE Parar TKI e adicionar QT TKI irreversível (estudo) Estudos Clínicos
39 xxx PROBLEMA DE RECIST ASPIRATION STUDY CPNPC avançado EGFR mutado n=204 ERLOTINIBE PD pelo RECIST ERLOTINIBE PD por decisão médica PFS 1
40 xxx OPÇÕES ATUAIS DE TRATAMENTO Continuar TKI Continuar TKI e adicionar QT Continuar TKI e Adicionar CETUXIMABE Estudo fase II (BIBW e Cetuximabe)) Parar TKI e adicionar QT TKI irreversível (estudo) Estudos Clínicos
41 xxx REVERTENDO A RESISTÊNCIA H1650 Deleção exon 19 H1975 Exon 20 T790M Exon 21 L858R Mok et al. Dados não publicados. WCLC 2011.
42 xxx BIBW Cetuximabe Jangijian et al. ASCO Abst # 7525
43 BIBW CETUXIMABE: Resposta
44 xxx Met
45 xxx MET - EGFR
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47 xxx cmet - MetMAb Inibe a estimulação da via pelo HGF
48 xxx MET Mab: IHQ
49 xxx MET Mab em pacientes com IHQpos
50 xxx O QUE O CLÍNICO PRECISA SABER? - MET IDENTIFICAR UM ALVO DE ONCOGÊNESE A HIPEREXPRESSÃO DE C-MET ESTÁ ASSOCIADA A CRESCIMENTO TUMORAL ENCONTRAR UM BIOMARCADOR IHQ É PROMISSORA PARA MetMab ESTABELECER A EFICÁCIA ESTUDOS PROMISSORES DE FASE II FASE III EM ANDAMENTO
51 xxx ESTUDO IDEAL T790M TKI irreversível RESISTÊNCIA A TKI BIÓPSIA MANDATÓRIA C-MET MetMab + TKI Outro Quimioterapia
52 xxx TRANSLOCAÇÕES DE ALK 1) 2)
53 xxx TRANSLOCAÇÕES DE ALK
54 xxx TESTE PARA IDENTIFICAR ALK - FISH
55 xxx TESTE PARA IDENTIFICAR ALK - FISH
56 xxx TESTE PARA IDENTIFICAR ALK - FISH CRITÉRIOS DE POSITIVIDADE A separação (split) de 3 ALK/5 ALK ocorre quando os sinais verde/vermelho estão separados por um intervalo > 2 sinais de diâmetro A amostra é positiva para o rearranjo de ALK quando os sinais de split ou sinais isolados de 3 ALK estão presentes em > 15% das células tumorais CONSIDERAÇÕES Mínimo de 50 células tumorais Validado em estudo clínico (Kwak et al. NEJM, 2010) Reconhece outros parceiros de fusão
57 xxx TESTE PARA IDENTIFICAR ALK FUTURO?
58 xxx Sobrevida Global Criotinibe 2 a e 3 a linhas
59 xxx ESTUDOS CLÍNICOS COM CRIZOTINIBE
60 xxx O QUE O CLÍNICO PRECISA SABER? EML4 - ALK IDENTIFICAR UM ALVO DE ONCOGÊNESE EML4-ALK É UM DRIVER DA ONCOGÊNESE ENCONTRAR UM BIOMARCADOR FISH É O PADRÃO OURO A IHQ É PROMISSORA ESTABELECER A EFICÁCIA ESTUDOS DE FASE II PROMISSORES ESTUDOS DE FASE III EM ANDAMENTO
61 xxx BRAF
62 xxx BRAF CARACTERÍSTICAS CLÍNICAS Paik et al. J Clin Oncol 29:
63 xxx BRAF MUTAÇÕES A: CPNPC B: Melanoma Paik et al. J Clin Oncol 29:
64 xxx II CURSO DE BIOLOGIA MOLECULAR Doutor, aqui está meu perfil molecular Clarissa Baldotto
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