Contagem de plaquetas Contagem de leucócitos. Citocinas:TNF alfa, IL 1 beta, IL-4, IL-10
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- Júlio César Gonçalves Madeira
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1 Métodos complementares no diagnóstico das Doenças Inflamatórias Intestinais. O que é importante no laboratório?
2 TIPO GRAVIDADE PROGNÓTICO RESPOSTA AO TRATAMENTO
3 Marcadores de Fase Aguda Marcadores Fecais Marcadores Sorológicos Marcadores Genéticos
4 Marcadores Biológicos na DII Proteínas de fase aguda PCR VHS Alfa 2 globulina Alfa 1 antitripsina Lactoferrina citocinas: IL-6, IL-1Beta,TNF alfa,il-8,il-10, interferon gama,tgf beta fibrinogênio Marcadores fecais calprotectina lactoferrina lisozima mieloperoxidade Reagentes de fase aguda Contagem de plaquetas Contagem de leucócitos Albumina sérica Outras proteínas fecais M2-PK S100A12 Alfa 1 antitripsina Citocinas:TNF alfa, IL 1 beta, IL-4, IL-10 Marcadores sorológicos panca ASCA Anticorpos pancreáticos Anti-OMP Anti-12 Cbir1:Flagelina ALCA,ACCA, AMCA: Anti- anticorpo de carboidrato (anti-glican)
5 PCR Aumenta durante a inflamação. Componente do sistema imunológico inato Produzido no fígado em resposta a circulação de IL-6 (IL-1beta, TNF alfa) Meia vida de 19 horas 20% tem polimorfismo do gene e não produz Mendoza JL; AbreuMT. Gastroent Clin et Biol. 2009;33(3):s158.
6 PCR PCR no diagnóstico da RCUI = risco de colectomia 1 Normal PCR= subótima resposta ao anti-tnf na DC 1 PCR hs preditor de atividade endoscópica=0,79(p=0,04) 1 PCR associada a sinais de inflamação mesentérica 2 1.Jones et. Clin Gastroenterol Hep.2008;6: Colombel et al. GUT.2006;55:1561
7 PCR e Avaliação Histológica Vieira A et al, BMC Research Notes.2009;2:221 DC RCUI p = 0, (67%) 4 (28,6%) PCR elevada 8 (33%) 10 (71,4%) PCR normal 14 (50%) 3 (25%) PCR elevada 14 (50%) 9 (75%) PCR normal Avaliação histológica Atividade inflamatória + Avaliação Atividade 7 inflamatória + Atividade inflamatória - histológica Atividade inflamatória -
8 PCR Prediz recidiva em DC tratada com terapia convencional PCR associado a alto risco de recidiva após parar AZA. PCR associado a alto risco de recidiva após parar IFX. Tretonet al. Clin Gastroenterol Hep.2009;7:80. Louis et al. GUT.2008;57:A66.
9 VHS Eficácia questionada. Ação indireta Fatores que interferem no VHS Sexo feminino Idade avançada anemia Fatores técnicos fibrinogênio temperatura Problema dilucional acantose macrocitose esferocitose microcitose inflamação leucocitose infecção malignidade policitemia Vibração durante o teste hiperviscosidade Mendoza JL; AbreuMT. Gastroent Clin et Biol. 2009;33(3):s158.
10 Outros marcadores Plaquetas Alfa 1 antitripsina, lactoferrina, fibrinogênio,macroalbuminúria, etc Resultados conflitantes Mendoza JL; AbreuMT. Gastroent Clin et Biol. 2009;33(3):s158.
11 Marcadores Fecais Calprotectina é o melhor marcador validado para diferenciar SII de outras afecções orgânicas(acurácia de 80-90%) Ótima correlação com endoscopia, imagem, excreção leucócitária e cintilografia Baixos valores= cicatrização da mucosa Von Roonet al.am J Gastroent.2007;102:803 Roseth et al. Scand J Gastroenterol.2004;39:1017
12 Calprotectina e Avaliação Histológica 20 (83,3%) DC 0 4 (16,7%) 14 (100%) 20 (71,4%) RCUI 8 (28,6%) p = 0, (100%) Calprotectina + Calprotectina - Calprotectina + Calprotectina - 0 Avaliação histológica Atividade inflamatória + Atividade inflamatória - Avaliação histológica Atividade inflamatória + 12 Atividade inflamatória -
13 Calprotectina (nota de corte área sob a curva = 0,939) Vieira A et al, BMC Research Notes.2009;2:221
14 Calprotectina e intensidade da inflamação p = 0,000 Vieira A et al, BMC Research Notes.2009;2:221
15 Lactoferrina e Avaliação Histológica DC RCUI 22 (92%) 2 (14,3%) 2 (8%) 12 (85,7%) 25 (89,3%) p = 0, (100%) (10,7%) Lactoferrina + Lactoferrina - Lactoferrina + Lactoferrina - 0 Avaliação histológica Atividade inflamatória + Atividade inflamatória - Avaliação histológica Atividade inflamatória + 15 Atividade inflamatória -
16 Vieira A et al, BMC Research Notes.2009;2:221
17 Fecal calprotectin for screening of patients with suspected inflammatory bowel disease: diagnostic meta-analysisanalysis Van Rheenen P; Van de Vijver E; Fidler V 13 estudos 670 adultos e 371 crianças DII foi confirmada(colono) em 32% dos adultos e 61% das crianças Sens/espec da calprotectina= 0,93/0,9696 adultos e 0,92/0,76 crianças O screening reduziu 67% dos adultos colono Teste útil principalmente em adultos para screening de pacientes com suspeita de DII
18 Pacientes com suspeita de DII Screening com calprotectina colonoscopia Iniciar tratamento para DII Planejar outras investigações
19 Causas de resultados anormais de calprotectina além da DII Infecções Giardia Lamblia Gastroenterocolite viral Malignidade Câncer colon Carcinoma gástrico Drogas AINH Alergia alimentar não tratada Outras doenças gastrointestinais DRGE Fibrose cística Doença celíaca não tratada Polipose juvenil Idade menor que 5 anos Disenteria bacteriana Gastrite H pylori Linfoma intestinal IBP Doença diverticular Enteropatia perdedora de proteína Enteropatia autoimune Cirrose hepática
20 Marcadores Fecais Calprotectina preditor de recidiva na DII 6 estudos prospectivos Sensibilidade: DC 43-90% RCUI 69-90% Especificidade: DC 43-88% RCUI 69-83% Acurácia: DC 63% RCUI 70% D Inca et al. Am J Gastroenterol.2008;103:2007. Costa et al. GUT 2005;54:366. Tibble et al. Gastroenterol.2000;119:15.Gisbert et al. Inflamm Bowel Dis Walkiewicz et al. Inflamm Bowel Dis.2008;14:669. Louis et al.gut 2008;57:A66.
21 Marcadores Fecais Calprotectina preditor de gravidade na RCUI Valores elevados: colectomia nos pacientes com colite grave tratados com esteróides e IFX. Ho et al. Am J Gastroenterol 2009;104:673. Cacheux et al. Am J Gastroenterol 2008;103:637.
22 Marcadores Sorológicos % Patients with Positive ASCA and ANCA Test Results ASCA Specific for CD ANCA Sensitive For Colitis Anti-saccharomyces cervisiae antibody (ASCA) Perinuclear anti-neutrophil cytoplasmic antibody (p-anca) CD UC Miscellaneous Controls (n=100) (n=101) non-ibd (n=163) (n=28) Quinton J-F etal. Gut. 1998;42:
23 Acurácia do panca e do ASCA em diferenciar DC de RCUI Porcentagem (%) Sensibilidade Especicidade VPP ASCA+ (CD) panca+ (UC) ASCA+/pANCA- (CD) panca+/asca- (UC) PeetersM, et al. Am J Gastroenterol. 2001;96:
24 O valor dos marcadores sorológicos na CI Estudo 97 pacientes com CI de 3 centros analizados pelo panca and ASCA Pacientes prospetivamente analizados desde Tempo de seguimento: 1 ano para cada paciente Média da duração da doença até a publicação: 10,7 anos Marcador ASCA + / panca ASCA / panca + Diagnóstico Sens Espec VPP VNP CD 67% 78% 80% 64% UC 78% 67% 64% 80% Joossens S, et al. Gastroenterology. 2002;122:
25 O valor dos marcadores sorológicos na CI Diagnóstico CD Marcador ASCA+/ panca VPP 67% UC panca+/ ASCA 70% 72% mantém CI Joossens SB, et al. Gastroenterology. 2003;124(suppl1):A Abstract M1174.
26 Marcadores Sorológicos ASCA+ panca - : diagnóstico de DC Sens: 49-64% Espec: 94-97% 97% ASCA- panca + : diagnóstico de CU Sens: 44-57% Espec: 94-97% 97% ASCA sempre positivo: Doença Celíaca/ Tuberculose intestinal Títulos altos de panca : risco de bolsite Sandborn et al. Inflamm Bowel Dis.2001;7:192. Linskens et al. Eur J Gastroenterol Hepatol.2002;14:1013. Toumi et al. Scand J Gastroenterol.2007;42:821. Makharia et al. Dig Dis Sci.2007;52:33.
27 Títulos altos de panca : risco de bolsite Acute pouchitis Incidência de bolsite (%) High (100) Medium (40-100) Chronic pouchitis 6 16 Low (< 40) Fleshner PR et al., Gut 2001;49:234.
28 Outros marcadores sorológicos Antibody Antigen Non-IBD (%) CD (%) UC (%) DNase Sensitive panca ASCA Histone H 1, bacterial antigen? Anti-Saccharomyces cerevisiae antibody <5% 10 25% 50 65% 5% 55 65% 5% OmpC E. coli <5% 38 50% 2% Anti-I2 Pseudomonas fluorescens <5% 54% 2% Anti-Flagellin CBir 1 Antigen 8-14% 50% 6% Landers et al, Gastro. 2002;123:
29 Inter-relação relação entre os marcadores ASCA + OmpC + 9% 12% 7% 26% 9% 13% 2% I 2 + CBir1??? All Negative 22% Landers et al, Gastro. 2002;123:
30 Novos marcadores sorológicos: antígenos carboidratos Anti-glycan antibodies: Anti-laminaribioside carbohydrate (ALCA) ALCA 8.9% Only gasca 43.9% Anti-chitobioside carbohydrate (ACCA) Anti-mannobiodside (AMCA) 6.8% ACCA 2.7% 4.9% 8.9% 8.0% 15.9% AMCA gasca positive CD n=515 Ferrante et al. GUT.2007;56:
31 Marcadores individuais gasca ALCA ACCA AMCA Sens Spec PPV Sens Spec PPV Sens Spec PPV Sens Spec PPV CD vs UC IBD vs non-ibd GI IBD vs HC Marcadores combinados CSS 1.0 CSS 1.5 CSS 2.0 CSS 2.5 Sens Spec PPV Sens Spec PPV Sens Spec PPV Sens Spec PPV CD vs UC IBD vs non-ibd GI IBD vs HC Ferrante et al. GUT.2007;56:
32 100 Complicated disease course Need for abdominal surgery ,7 83, , ,0 56, , ,2 0 Group A (n=181) Group B (n=200) Group C (n=184) Group D (n=173) 0 Group A (n=181) Group B (n=200) Group C (n=184) Group D (n=173) Score <1.5 Score 1,5-2,0 Score 2,5-3,0 Ferrante et al. GUT.2007;56: Score >3,0 Score <1.5 Score 1,5-2,0 Score 2,5-3,0 Score >3,0
33 Marcadores Genéticos NOD2 /CARD15 DLG5 OCTN 1 e 2(novel organic cation transporter) CARD4 (NOD1) IL23R ATG16L1 TLR (Toll- like receptor) Mendoza JL; Abreu MT. Gastroent Clin et Biol. 2009;33(3):s158.
34 CONCLUSÕES PCR: bom marcador de inflamação, correlação com atividade da doença e risco de recidiva principalmente na DC VHS: acessa indiretamente a inflamação. Usar apenas na falta do PCR. Marcadores fecais: não invasivos, utéis para diferenciar SII de outras afecções. Prediz recidiva ASCA/pANCA/anti-OmpC: específicos para diferenciar DC de RCU. Sensibilidade baixa. Anti glycan: associação aumenta a especificidade. Marcadores genéticos?
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