EVENTOS CO e PÓS TRADUCIONAIS

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1 EVENTOS CO e PÓS TRADUCIONAIS

2 EVENTOS CO e PÓS TRADUCIONAIS Enovelamento natural e assistido (Chaperonas e HSPs) Ubiquitinação e degradação via proteassomo de proteínas não enoveladas Endereçamento (peptídeo sinal e glicosilação) Digestão de pró-proteínas Hidroxilação Fosforilação

3 O Paradoxo de Levinthal (1968) Uma proteína não pode experimentar todas as possíveis conformações entre o estado desenovelado e o estado nativo. Imagine uma proteína com 150 aa que experimentam apenas as 3 conformações previstas no plote de Ramachandran. Cada conformação se interconverteria na outra em picoseg (10-12 s). Essa proteína, então, possuiria possíveis conformações (= ). Para experimentar todas essas conformações seriam necessários x seg = seg = anos!!! O enovelamento demora de 0.1 a 1000 seg in vivo e in vitro. O enovelamento é, portanto, dirigido passando por rotas cinéticas e intermediários bem definidos escapando de conformações irrelevantes.

4 Gráfico de Ramachandran

5 Os três mecanismos clássicos de enovelamento A. Fersht and V. Daggett, 2002, Cell

6 Enovelamento co-traducional

7 Opções de Enovelamento

8 Chaperoninas (HSP60): Caixa de Enovelamento

9 HSP70 ligação à áreas hidrofóbicas

10 Caminhos de Enovelamento

11 Degradação de Proteínas não Enoveladas Ubiquitinação Created by Roger B. Dodd

12 Degradação de Proteínas não Enolveladas Proteassomo

13 Via secretora Endereçamento e Peptídeo Sinal (eucariotos) CIT RE H 2 N-Met-Met-Ser-Phe-Val-Ser-Leu-Leu-Leu-Val-Gly-Ile-Leu-Phe-Trp- Ala-Thr-Glu-Ala-Glu-Gln-Leu-Thr-Lys-Cys-Glu-Val-Phe-Gln-Protein Golgi RE Protein -Lys-Asp-Glu-Leu-COOH Via Celular CIT Nucleo CIT MIT H 2 N-(...)-Pro-Pro-Lys-Lys-Lys-Arg-Lys-Val-Protein H 2 N-Met-Leu-Ser-Leu-Arg-Gln-Ser-Ile-Arg-Phe-Phe-Lys-Pro-Ala-Thr- Arg-Thr-Leu-Cys-Ser-Ser-Arg-Tyr-Leu-Leu-Protein CIT Perox CIT Perox Protein -Ser-Lys-Leu-COOH H 2 N-(...)-Arg-Leu-X 5 -His-Leu-Protein

14 Endereçamento de Proteínas (eucariotos) Via secretória Retículo endoplasmático Endereçamento de proteínas sintetizadas em ribossomos aderidos ao retículo endoplasmático As proteínas da via secretória possuem uma sequência sinal (peptídeo sinal) que direciona os ribossomos que as estão sintetizando para a membrana do retículo endoplasmático

15 Endereçamento de Proteínas Via secretória > Retículo endoplasmático

16 Endereçamento de Proteínas Via secretória : Proteínas de Membrana Proteína unipasso

17 Endereçamento de Proteínas Via secretória : Proteínas de Membrana Proteína multipasso

18 Endereçamento de Proteínas (eucariotos) Via secretória : 1ª destino : Proteínas do RE Toda as proteínas residentes no reticulo endoplasmático possuem na região C-terminal uma sequência sinal extra denominada KDEL (LYS-ASP-GLU-LEU).

19 Endereçamento de Proteínas (eucariotos) Via secretória : outros destinos No Complexo de Golgi, as proteínas podem ser: - reencaminhadas para o retículo endoplasmático (sinal extra KDEL) - retidas no Complexo de Golgi (sinal extra desconhecido) - enviadas para os lisossomos (Sinal extra = manose-6-fosfato) - encaminhadas para vesículas de secreção (sinal extra desconhecido) - encaminhadas para membrana plasmática ou meio extracelular (SEM SINAL extra)

20 Endereçamento de Proteínas (eucariotos) Via secretória : Glicosilação no RE - Após Golgi => Enviadas para os lisossomos (Sinal extra = manose-6-fosfato)

21 Endereçamento de Proteínas (eucariotos) Via celular Citosol e organelas Proteína citosólica madura Mitocôndria Ribossomos livres no citoplasma Proteínas citosólicas não possuem nenhum tipo de sinal de endereçamento Cloroplasto Núcleo Peroxissomo

22 Endereçamento de Proteínas em Eucariotos 2) Ribossomos livres Proteína citosólica madura Mitocôndria 1) Ribossomos aderidos ao RE Retículo endoplasmático Cloroplasto Complexo de Golgi Superfície celular (secretada) Lisossomos VIA SECRETORA Membrana citoplasmático Núcleo Peroxissomo

23 Endereçamento de Proteínas em Procariotos - Citoplasma: sem sinal - Membrana plasmática ou espaço intermembranar: com sinal Poteínas da membrana e espaço intermembranar são sintetizadas em ribossomos aderidos à membrana

24 Ativação Proteolítica de Proteínas Digestão da Insulina

25 Hidroxilação de Proteínas Exemplo do Colágeno

26 Fosforilação de Proteínas Enzimas responsáveis pela adição de um grupamento fosfato em radicais Ser, Thr e Tyr de proteínas. ATP Proteína Kinases Fosfatases Proteína PO 4-3 PO 4-3

27 Fosforilação de Proteínas Exemplo das Lipases

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