PUBVET, Publicações em Medicina Veterinária e Zootecnia. Utilização de sêmen sexado em protocolos de IATF. Luciano Bastos Lopes

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1 PUBVET, Publicações em Medicina Veterinária e Zootecnia. Utilização de sêmen sexado em protocolos de IATF Luciano Bastos Lopes Médico Veterinário Doutor em Ciência Animal Resumo A inseminação artificial pode ser considerada umas das mais importantes biotécnicas reprodutivas aplicadas rotineiramente em rebanhos bovinos. Devido às diferenças em seu DNA, os espermatozóides podem ser separados através do citômetro de fluxo viabilizando a sexagem do sêmen. Este avanço biotecnológico pode proporcionar um incremento significativo no desempenho da pecuária, entretanto, há grande variação nas taxas de prenhes deve ser avaliada no momento da escolha do melhor programa reprodutivo a ser empregado. Foram utilizados 59 animais - novilhas virgens, vacas primíparas e multíparas - da raça Simental para avaliação da utilização de sêmen sexado em protocolos reprodutivos de Inseminação Artificial em Tempo Fixo (IATF). Palavras-chave: Sêmen sexado, reprodução, bovinos Timed artifitial insemination protocols using sexed semen Abstract Artificial insemination may be considered one of the most important biotechniques in reproduction often applied in cattle herds. According to some

2 differences on DNA, male reproductive cells can be seperated through cytometre flow equipment enabling semen sorting. This advance in biotechnology can provide a significant improvement on cattle production performance, however, the variation on the results must be evaluated before choosing the best reproduction program to be applied. It were used 59 animals (Simental) heifers, primiparous and multiparous cows to evaluate use of sexed semen in reproductive protocols (Fixed Time Artificial Insemination). Keywords: Sexed semen, reproduction, bovine Introdução O nascimento de bezerras em fazendas pode colaborar, de forma bastante significativa, na disponibilidade de novilhas para reposição ou venda de animais de alto valor genético. Procurando atender esta demanda do mercado, técnicas de biotecnologia têm viabilizado a utilização de sêmen sexado em escala comercial. A separação dos espermatozóides com o cromossomo Y dos espermatozóides com o cromossomo X é possível devido às diferenças no conteúdo do DNA dessas células espermáticas. O espermatozóide com cromossomos XX ( ) possui cerca de 4% mais material genético que o espermatozóide com cromossomos XY ( ). Alguns avanços na técnica também contribuíram no processo de separação dos gametas X e Y (Garner et al., 2006). Entretanto, para maior eficiência do processo de separação as doses sexadas são congeladas com 2x10 6 espermatozóides por palheta ao invés de aproximadamente 10x10 6 utilizados no sêmen convencional. Alguns autores relataram em seus trabalhos queda de fertilidade em razão da menor concentração de células por palheta, mas segundo os resultados encontrados por Doyle et al. (1999), outros fatores podem estar envolvidos, pois foram encontradas menores taxas de prenhês mesmo com a utilização de doses com a mesma concentração de espermatozóides. Segundo Kurykin e colaboradores (2007), o local de deposição do sêmen influenciou significativamente a taxa de concepção quando utilizado sêmen sexado na Inseminação Artificial. Uma das possíveis razões da diminuição dos índices de fertilidade após o uso de sêmen

3 sexado é o menor tempo de viabilidade associado com diferentes padrões de motilidade espermática (Schenk et al., 2006). Segundo os resultados encontrados por Lu et al. (2004) o sêmen sexado necessita de menor tempo para a capacitação devido ao processo de separação por citometria de fluxo. Uma das possibilidades de diminuir a variação do momento da ovulação é o emprego de técnicas de sincronização, o que poderia colaborar na eficiência de programas de inseminação artificial com sêmen sexado. Este relato teve como objetivo apresentar os resultados referentes à utilização de sêmen sexado em protocolos reprodutivos de Inseminação Artificial em Tempo Fixo (IATF) em vacas primíparas e multíparas além de novilhas virgens da raça Simental. Material e métodos Em uma propriedade de gado de corte situada no Município de Pedro Leopoldo (MG), 59 animais da raça Simental foram submetidos a um protocolo reprodutivo durante a estação de monta. Foi realizado o exame ginecológico de todo o rebanho através de palpação retal. Os animais que apresentaram condição uterina e ovariana insatisfatória de acordo com a avaliação ginecológica não foram protocolados. O escore corporal dos animais do rebanho era bastante satisfatório, em torno de 3,5 (escala 1,0-5,0). O protocolo utilizado está descrito na Tabela 1. A inseminação foi realizada no dia previsto pelo protocolo IATF recomendado pela empresa fabricante do implante de progesterona. Todos os animais apresentaram sinais claros de estro conforme a programação inicial. O sêmen comercial sexado ( ) foi depositado no corpo uterino dos animais de ambos os lotes. Dentre os 59 animais, 21 pertenciam ao lote de vacas paridas. O segundo lote (Lote 2) de 38 matrizes era composto por novilhas virgens. Depois de transcorridos 60 dias da inseminação, foram realizados os diagnósticos de gestação pelo médico veterinário através de palpação retal.

4 Tabela 1. Protocolo de Inseminação Artificial em Tempo Fixo (IATF) utilizado nos animais testados. 36 DIA O DIA 8 DIA 9 HORAS Implante de 1 ml de Benzoato Retirada do implante IATF Progesterona de Estradiol ml de Benzoato 2 ml de ECG de Estradiol + 5 ml de Dinoprost Trometamina Resultados A taxa de concepção dos animais protocolados foi de 15%, nove animais gestantes no total. Destes, todos faziam parte do Lote 2. Quando analisados apenas os animais do Lote 2, a taxa de concepção melhorou substancialmente, subiu para 24%, embora insatisfatória para condição ginecológica que os animais apresentavam na época em que foram submetidos ao protocolo hormonal. Conclusões Os resultados aqui descritos reforçam a maior viabilidade de se utilizar o sêmen sexado em novilhas virgens em razão da maior fertilidade desta categoria quando comparada com a fertilidade de vacas. Entretanto, a utilização do sêmen sexado em associação com protocolos reprodutivos não parece ser a melhor estratégia reprodutiva a ser empregada como rotina nas fazendas. Os índices encontrados demonstram haver necessidade de estudos mais aprofundados sobre o assunto.

5 Referências bibliográficas BARUSELLI, P.S.; SOUZA, A.H; MARTINS, C.M.; GIMENES. L.M.; SALES, J.N.S.; AYRES, H.; ANDRADE, A.F.S.; RAPHAE, C.F, ARRUDA, R.P. Sêmen sexado: inseminação artificial e transferência de embriões. Rev. Bras. Reprod. Anim., v.31, n.2, abril/jun DOYLE SP, SEIDEL JR GE, SCHENK JL, HERICKHO LA, CRAN DG, GREEN RD. Artificial insemination of lactating Angus cows with sexed semen. Proceedings, Western Section, American Society of Animal Science, v.50, p , KURYKIN, Ü. JAAKMA, M. JALAKAS, M. AIDNIK, A. WALDMANN, L. MAJAS. Pregnancy percentage following deposition of sex-sorted sperm at different sites within the uterus in estrus-synchronized heifers. Theriogenology, v. 67, p , LU, K. H., SEIDEL JR, G. E. Effects of heparin and sperm concentration on cleavage rates of bovine oocytes inseminate with flow-cytometrically-sorted bovine sperm. Theriogenology, v.62, p SCHENK JL, SUH TK, SEIDEL JR. Embryo production from superovulated cattle following insemination of sexed sperm. Theriogenology, v.65, p , 2006.