Informe Técnico - Macal Nutrição Animal Elaborado por Marcia Dias 1
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- Leandro di Azevedo Affonso
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1 Informe Técnico - Macal Nutrição Animal Elaborado por Marcia Dias 1 Estratégias de suplementação de vacas primíparas de corte Marcia Dias 1 1 Médica Veterinária - CRMV-MS nº2820, mestranda em Nutrição de Ruminantes da UFV 1. Introdução O Brasil é um país com grande potencial para a produção de carne bovina, no entanto apresenta baixa eficiência, tendo propriedades onde as matrizes têm idade ao primeiro parto entre 36 e 42 meses e intervalo de partos variando de 18 a 24 meses. De acordo com Gonçalves (2003), esses índices são decorrentes da pouca importância que é dada ao manejo de matrizes, que muitas vezes é colocado em segundo plano e esquece-se da importância da tríade do manejo (sanitário, reprodutivo e nutricional), uma vez que a mesma é responsável pela obtenção de bons índices. Segundo esse mesmo autor, a antecipação da idade ao primeiro parto e a obtenção de menores intervalos de partos são pontos fundamentais na produtividade da pecuária de corte. Neste último segmento as matrizes com seu primeiro bezerro ao pé e submetidos ao segundo entoure constituem o gargalo da atividade de cria, pois, tanto o baixo índice de matrizes prenhes ao final da estação, bem como um maior intervalo de parto refletem na baixa eficiência da atividade. Isto se torna ainda mais evidente quando se melhora geneticamente estes animais, seja na precocidade sexual ou acabamento de carcaça e, sem oferecer aos mesmos as mínimas garantias de suas exigências de mantença e produção. Embora alcancem a puberdade mais cedo, estes animais, ainda estarão em crescimento por volta do seu segundo entoure, exigindo níveis adequados de proteína e energia para sua manutenção e principalmente para o retorno da atividade reprodutiva. Outro desafio para a pecuária de corte brasileira é a busca de maior eficiência produtiva nos rebanhos de cria de forma economicamente viável. Neste propósito, a recria das fêmeas ganha maior magnitude na medida que se busca reduzir idade ao primeiro acasalamento, intervalo entre partos e aumentar a produção de terneiros. O desafio na fase de recria é possibilitar desenvolvimento adequado para o sistema de acasalamento a ser empregado, utilizando-se ao máximo os recursos forrageiros existentes na região, todavia, em situações de forragem limitante, o uso da suplementação pode proporcionar importante incremento no desenvolvimento das novilhas (Pilau et al., 2004). O uso estratégico de
2 Informe Técnico - Macal Nutrição Animal Elaborado por Marcia Dias 2 suplementos pode produzir impacto global no sistema de produção ao acelerar o crescimento de fêmeas no período pós-desmama. Para a obtenção de elevada eficiência nos sistemas de produção de bovinos de corte, altas taxas reprodutivas são fundamentais. No Brasil, as baixas taxas de natalidade são conseqüência, fundamentalmente, do prolongado anestro pós-parto, fenômeno de especial relevância nas vacas de primeira cria. O que pode ser observado quando se trabalha com estação de monta fixa que quanto mais cedo a vaca vier a parir, mais tempo vai dispor para voltar a ciclar até o início do próximo período de acasalamento. Assim, em um mesmo nível nutricional, as vacas cujos partos ocorrem mais cedo, têm maior chance de reconcepção. Novilhas que concebem cedo no seu primeiro acasalamento e, portanto, vêm a parir nos primeiros dias da estação de nascimentos do ano seguinte, desmamam bezerros mais pesados e em maior número ao longo de sua vida produtiva. Para cumprir este propósito, as novilhas devem ter uma concepção precoce durante sua primeira estação reprodutiva. Para atingir esta meta a grande maioria das novilhas deve estar ciclando regularmente já ao início desta estação. Como a nutrição tem efeito decisivo sobr e este evento, a obtenção do peso crítico de acasalamento para as novilhas é medida prioritária para o sucesso reprodutivo desta categoria (Quadros e Lobato, 2004). Ao fazer essa revisão de literatura, teve-se o objetivo de demonstrar a importância da nutrição para vacas primíparas e a importância das mesmas na produtividade da bovinocultura de corte. 2. Estratégias para melhorar o desempenho reprodutivo Uma maneira passível de aplicação imediata e que poderá em curto prazo elevar substancialmente os índices reprodutivos de um rebanho, seria a eliminação de vacas que apresentam problemas reprodutivos, estabelecimento de idades e/ou pesos específicos para o início da atividade reprodutiva, de épocas mais propícias para a produção e comercialização dos produtos, avaliação clínica e andrológica dos reprodutores, entre outras medidas (Andrade, 2001). O monitoramento do escore de condição corporal (ECC) no pré-parto, de maneira que os animais possam parir em boa condição corporal e que se mantenham adequadame nte no pós-parto promove rápida manifestação do primeiro cio. Se o retorno da atividade ovariana
3 Informe Técnico - Macal Nutrição Animal Elaborado por Marcia Dias 3 acontecer entre 60 a 90 dias pós-parto possibilita intervalo de partos de, aproximadamente 12 meses, com taxa de prenhes acima de 90% (Ruas et al., 2000). Assim, os animais deverão ficar gestantes nos primeiros dias da estação de monta, para que suas crias sejam produzidas nos primeiros dias da estação de nascimento, de tal forma que possam ter o tempo necessário para a perfeita recuperação do trato genital bem como dos estresses da gestação anterior e assim se apresentarem em condições de serem servidas e fecundadas logo nos primeiros dias da estação de monta subseqüente (Andrade, 2001). No entanto, para que as novilhas atinjam bom ECC, é necessário garantir um manejo nutricional adequado, uma vez que o peso e a idade ao início do acasalamento são os principais fatores que apresentam efeito sobre a freqüência de cio em novilhas de corte. Novilhas com maior idade, ganho diário médio e boa condição corporal inicial normalmente tem um menor intervalo entre o início do acasalamento e a manifestação de estro (Suñe et al., 2004). Andrade (2001) recomenda que após a puberdade, para que as novilhas entrem ao rebanho de reprodução e possam continuar seu desenvolvimento, atingindo a maturidade fisiológica em boas condições físicas e fisiológicas, tornam-se assim produtoras regulares ao longo de suas vidas produtivas, recomenda -se entoura -las quando atingirem determinados pesos de acordo com o nível nutricional disponível (Tabela 1). Tabela 1 Pesos recomendados para novilhas no início da estação de monta, de acordo com o nível nutricional Nível nutricional Peso recomendado Adequado 50-55% do peso adulto Razoável 60-70% do peso adulto Inadequado 75-80% do peso adulto Considerando o peso adulto de 500 kg Nível nutricional ótimo kg Nível nutricional razoável kg Nível nutricional inadequado kg Fonte: Andrade (2001). Analisando a Tabela 1, quando o nível nutricional for adequado, pode-se colocar a novilha em reprodução quando atingir 50 a 55% do seu peso adulto. Se, no entanto, o nível
4 Informe Técnico - Macal Nutrição Animal Elaborado por Marcia Dias 4 nutricional for apenas razoável, como acontece na grande maioria das condições brasileiras, deve-se esperar até que a novilha atinja de 60 a 70% do seu peso adulto. Finalmente, quando o nível nutricional for bastante inadequado, como ocorre em grande número de rebanhos, devese esperar até que a novilha atinja no mínimo 75 a 80% do seu peso antes de se promovê-la ao rebanho de reprodução. Já considerando que para as raças zebuínas o peso adulto está em torno de 500 kg, estima-se que as novilhas somente deverão ser promovidas ao rebanho de reprodução quando alcançarem no mínimo, 250, 300 e 375 kg, respectivamente, para os três níveis nutricionais mencionados. Entretanto, a decisão de qual sistema de acasalamento adotar dependerá da situação existente em cada caso. A interação existente entre taxa de natalidade e intervalo entre partos em sistemas com 50% de natalidade e novilhas parindo pela primeira vez aos quatro anos, mostrou que a redução do intervalo entre partos para três anos teve um impacto produtivo equivalente ao aumento da taxa de natalidade em 30%. Porém, em sistemas com primeiro parto aos três anos, com rebanhos apresentando baixa taxa de natalidade, foi possível aumentar a produtividade de forma significativa com base na melhoria da eficiência reprodutiva. Somente com altas taxas de natalidade foi justificado, do ponto de vista biológico, adiantar em mais um ano a idade ao parto. Não há sentido em investir em um manejo intensivo da novilha e da vaca primípara, como o do sistema de onde as novilhas são acasalada com 12 meses, quando ainda é possível aumentar a taxa de natalidade com base em medidas também técnicas, mas mais simples (Beretta et al., 2001). 3. Suplementação de vacas primíparas Como a ingestão de nutrientes atendem a ordem de prioridade para o organismo do animal: 1-metabolismo basal; 2-manutenção; 3-crescimento; 4-energia básica de reservas; 5- gestação; 6-lactação; 7-acúmulo de reservas; 8-atividade reprodutiva, com o início dos ciclos e gestação; e 9-acúmulo de gordura. Os nutrientes ingeridos só serão utilizados para a atividade reprodutiva depois de atendidos as exigências das outras prioridades, sendo prioritário apenas para o acúmulo de gor duras. Desta forma, a suplementação de vacas primíparas torna-se de fundamental importância para que esses animais atinjam uma idade a primeiro parto mais precoce e garanta índices reprodutivos satisfatórios. Pois, segundo Short et al. (1990), a ingestão de forragem de baixa qualidade estaria apenas atendendo os primeiros
5 Informe Técnico - Macal Nutrição Animal Elaborado por Marcia Dias 5 degraus desta escala e a medida que se melhora a qualidade e quantidade de forragens alcançam-se os degraus superiores. Desta forma, o plano nutricional das bezerras do pósdesmame até o primeiro acasalamento tem um papel determinante para o início da puberdade. Este deve ser programado de forma que possibilite um ganho necessário para atingir o mais cedo possível a maturidade sexual. Segundo Beretta e Lobato (1998), dependendo do peso à desmama e do tipo racial, este ganho poderá variar entre 0,4 e 0,8 kg/dia. Como a pastagem é o recurso nutricional mais abundante no Brasil e com melhor relação custo/benefício para o produtor, estudos sobre o desempenho de novilhas a pasto são de fundamental importância. Neste sentido, a suplementação com concentrados energéticos - protéico pode ter distintos objetivos como aumentar a oferta de forragem, quando esta apresentar baixa disponibilidade, ou atender as exigências nutricionais para obtenção de melhor desempenho. A primeira destas opções implica em ganhos de peso individuais moderados e elevados ganhos por área, enquanto a segunda implica em ganhos individuais máximos, devido ao aumento no consumo de energia. O risco da dependência exclusiva de pasta gens estabelecidas anualmente é maior para determinadas categorias animais como bezerras de corte para acasalamento com um ano de idade. Para esta categoria é indispensável um nível alimentar alto e contínuo, o qual poderia ser assegurado através do fornecimento de suplementação. Considerando-se que os custos de implantação das pastagens são relativamente altos, é necessário que tanto o manejo como os recursos sejam utilizados da maneira mais eficiente e racional possível (Frizzo et al., 2003; Nicodemo et al., 2003). 4. Efeito da suplementação em fêmeas de reposição De acordo com Lamb (1999), do ponto de vista da nutrição, energia, proteína, minerais e vitaminas podem afetar a reprodução por vários mecanismos ao afetar o hipotálamo, pituitária e/ou ovários. Recentemente, tornou-se claro que o status nutricional ou a condição corporal pode ser transmitido ao cérebro através de peptídeos hormonais produzidos na periferia e no próprio cérebro. Estes peptídeos, tais como a leptina e o neuropeptídeo Y (NPY), atuam regulando o eixo reprodutivo central e o comportamento alimentar. A leptina é produzida pelas células adiposas e afeta profundamente a secreção de LH na hipófise, provavelmente através dos efeitos hipotâmicos diretos. Um dos principais mediadores da açã o da leptina no cérebro é o NPY. Em caso de intensa restrição do consumo
6 Informe Técnico - Macal Nutrição Animal Elaborado por Marcia Dias 6 de energia, a síntese e a secreção de leptina também caem, o nível de NPY aumenta e o comportamento alimentar é estimulado. Em bovinos, quedas intensas das condições corporais continuam a diminuir a síntese e a secreção de leptina devido às perdas de massa adiposa (Williams, 2001 citado por Gonçalves, 2003). Um dos principais efeitos da suplementação em fêmeas de reposição na pecuária de corte é a redução da idade ao primeiro acasalame nto, que por sua vez irá melhorar a eficiência da produção, uma vez que está positivamente relacionada com a produção durante a existência da vaca. Short et al. (1994) citado por Fries e Albuquerque (1999) apresentam as principais vantagens e desvantagens de acasalar novilhas mais jovens. Como vantagens podem ser citadas: menor intervalo para obter-se um retorno do investimento; aumento da vida produtiva de cada vaca; aumento do número de bezerros por ano; menor demanda de pastos para fêmeas de reposição, que passam a serem manejadas juntas com o rebanho de reprodução. As desvantagens seriam: aumento dos custos (manejo e alimentação) para que a novilha possa entrar em reprodução mais jovem; aumento da perda de bezerros devido a partos distócicos (dificuldade de parto) e outros problemas relacionados, incluindo custos; as vacas de 2 anos de idade teriam uma menor taxa de retorno ao cio, quando comparadas com vacas mais velhas; as fêmeas de dois anos produziriam um menor número de bezerros que seriam desmamados com menor peso. Um bom exemplo, que demonstra as vantagens da redução da idade ao acasalamento, é um trabalho conduzido por Beretta et al. (2001) mediante simulação computacional, onde avaliaram a produtividade e a eficiência biológica de três sistemas pecuários-criadores diferindo na idade das fêmeas de reposição ao primeiro parto (IP): Sistema Tradicional (ST), IP = 4 anos; Sistema Melhorado (SM), IP = 3 anos, e Sistema Um Ano (SU), IP = 2 anos. Esses autores concluíram que os sistemas com primeir o parto das novilhas aos dois anos apresentaram maior produtividade em relação àqueles com o primeiro parto aos três anos, e
7 Informe Técnico - Macal Nutrição Animal Elaborado por Marcia Dias 7 estes a sistemas com primeiro parto aos quatro anos (Figura 1). Porém, a magnitude da resposta foi dependente da taxa de natalidade (TN) do rebanho de cria, sendo registrado o maior impacto para valores de TN entre 60-70% e o mínimo para TN acima de 80%. A uma mesma TN, a redução da IP de quatro para três anos representou aumento proporcionalmente maior do que reduzi-la de três para dois anos. Enquanto que maior TN e menor IP das novilhas reduziram a permanência de categorias improdutivas no sistema de produção, liberando áreas para outras categorias e reduzindo o custo energético por unidade de produto. A proporção de vacas de cria no estoque aumentou quanto menor foi a IP, ocorrendo um aumento linear na proporção de vacas prenhes na medida que aumentou a TN. A produtividade dos sistemas, avaliada em termos quilos de bezerro desmamado (BD)/ ha, aumentou conforme a IP diminuiu, porém, a magnitude da resposta foi dependente da TN do rebanho (Figura 2). A máxima resposta à mudança da IP encontrou-se em torno de 60-70% de natalidade, valores em que a porcentagem das categorias de novilhas no estoque se aproximou do máximo. Nesta faixa, a redução da IP de quatro para três, e de três para dois anos, traduziu-se em aumento dos quilos de BD/ha de 53,5 e 14,3%, respectivamente. Figura 1 - Área e estoque animal/ 50 bezerros nascidos em sistemas criatório diferindo na idade ao primeiro parto das novilhas (quatro-st, três-sm ou dois anos -SU) e na taxa de natalidade do rebanho de cria (Beretta et al., 2001).
8 Informe Técnico - Macal Nutrição Animal Elaborado por Marcia Dias 8 Figura 2 - Produção de peso vivo à desmama por hectare de pastejo em sistemas criatórios diferindo na idade ao primeiro parto (IP) das fêmeas (quatro-st, três-sm ou dois anos-su) e na taxa de natalidade do rebanho de cria (Beretta et al., 2001). Outro efeito está relacionado ao anestro e à reconcepção pós-parto. Neste caso, a subnutrição retarda o aparecimento de cios, aumentando o intervalo entre partos (Short et al., 1990; Randel, 1990). Uma vez que o controle da retomada dos ciclos no pós-parto esta relacionado com o hipotálamo, pituitária e ovário, que é influenciado por uma variedade de sinais externos e internos, hormonais em sua maior parte que por sua vez sofrem influencia de fatores nutricionais. Após 20 a 30 dias de pós-parto, o hipotálamo e a pituitária tem sua atividade diminuída e a quantidade de LH na pituitária fica diminuída, então somente a pequena quantidade deste LH liberado se torna insuficiente para responder ao estradiol ou GnRH e, assim, não provocam sinais externos de cio e ovulações nas vacas (Gonçalves, 2003). Com dietas de baixa energia e proteína, a resposta do GnRH é diminuída e conseqüentemente concentrações de LH (Randel, 1990). Isto ocorre porque o baixo nível de proteína na dieta acarreta diminuição de aminoácidos na circulação, com conseqüente redução da concentração de insulina e da taxa de entrada de glicose, diminuindo assim a disponibilidade de energia ao hipotálamo, causando redução do fator de liberação de LH, diminuindo a secreção pulsátil de LH na hipófise anterior (Kaur e Arora, 1995 citado por Ruas et al., 2000).
9 Informe Técnico - Macal Nutrição Animal Elaborado por Marcia Dias 9 Por outro lado, vacas de corte apresentam anestro pós-parto mais prolongado devido a um padrão diferente das ondas de crescimento folicular. O primeiro folículo dominante aparece em torno de 14 dias pós-parto, porém apresenta atresia. Outros folículos dominantes surgem nos dias subseqüentes e também apresentarão atresia. Ocorre uma falta de ovulação devido a uma menor pulsatibilidade de LH, responsável pela diferenciação do folículo após emergência resultando em um folículo dominante. Na presença de acentuadas deficiências nutricionais não há o crescimento de folículo maiores, até 5,0 mm. Assim, os tratamentos nutricionais para reduzir o anestro devem priorizar o aumento de pulsos de LH e permitir que os folículos atinjam os estágios finais de maturação (Gonçalves, 2003). Com relação à concepção, estratégias de suplementação que visem à melhoria dos índices de concepção de matrizes para a segunda cria, tem demonstrado serem positivos na economia de sistemas de produção, na venda de bezerros ao desmame bem como a produção de reprodutores(as), sendo porém justificado em qualquer manejo a análise econômica. Um dos principais fatores a serem considerados para garantir bons índices de concepção é a condição corporal na fase pós-parto, pois baixa condição corporal resultante de níveis nutricionais inadequados exercem efeito depressor sobre o eixo hipotalâmicohipofisário-gonadal com conseqüente prolongamento dos intervalos de partos (Andrade, 2001). Deste modo, devem as matrizes estar em boa condição corporal e ganhando peso neste período. Portanto desde o pré-parto, atenção especial deve ser da da a esta categoria de matrizes, como pastagens de melhor qualidade e suplementação para que cheguem ao parto em boa condição e mantenham se assim no período que se segue (Ruas et al., 2000). É importante ressaltar que a suplementação somente no pós-parto, não seria suficiente para alterar de forma significativa a retomada da ciclicidade em vacas que mostravam baixa condição corporal ao parto, embora possa ocorrer alguma melhoria no reaparecimento de cios ou taxas de concepção em vacas que tenham parido numa condição corporal em torno de 4 (Randel, 1990). Portanto, caso se permita que o ECC varie de acordo com as mudanças no ambiente e a disponibilidade de forragem, deve -se atingir um índice tão alto quanto possível antes do parto, através do manejo. Desta maneira, é melhor que as vacas apresentem boas condições corporais no parto e então utilizar uma suplementação estratégica com proteína para estimular a ingestão e melhorar a digestão de forragem de qualidade baixa a média para manter as condições corporais (Williams, 2001 citado por Gonçalves, 2003).
10 Informe Técnico - Macal Nutrição Animal 10 Elaborado por Marcia Dias 5. Considerações finais Estudos têm mostrado que vacas com baixa condição corporal ao parto mostram dificuldades em nova concepção, maiores intervalos de parto e menor ocorrência de cios. Por outro lado, animais com uma satisfatória condição corporal ao parto, mostram melhores índices reprodutivos, principalmente diante de uma suplementação ou quantidade suficiente de energia no pré-parto. Atender aos requisitos das novilhas de primeira cria, através de uma suplementação de energia e proteína no pré-parto, diminui o intervalo de partos e aumenta o índice de matrizes prenhes, conseqüentemente melhora os índices de desfrute do rebanho brasileiro. O estudo e desenvolvimento de sistemas integrados viáveis de alimentação e manejo na recria de bezerras, visando redução da idade de acasalamento são fundamentais na pecuária de corte no Brasil. O uso estratégico de suplementos pode produzir impacto global no sistema de produção ao acelerar o crescimento de fêmeas no período pós-desmama. 6. Referências ANDRADE, V.J. Manejo reprodutivo de fêmeas bovinos de corte. In: SIMPÓSIO DE PRODUÇÃO DE GADO DE CORTE, 1, Viçosa, MG. Anais... Viçosa:UFV, p , BERETTA, V.; LOBATO, J.F.P. Sistema um ano de produção de carne : avaliação de estratégias alternativas de alimentação hibernal de novilhas de reposição. Revista Brasileira de Zootecnia, v.27, n.1, p , BERETTA, V.; LOBATO, J.F.P.; MIELITZ NETTO, C.G.A. et al. Produtividade e eficiência biológica de sistemas pecuários de cria diferindo na idade das novilhas ao primeiro parto e na taxa de natalidade do rebanho no Rio Grande de Sul. Revista Brasileira de Zootecnia, v.30, n.4, p , FRIES, L.A.; ALBUQUERQUE, L.G. Prenhez aos catorze meses: presente e futuro. Elementos do componente genético. In: REUNIÃO ANUAL DA SOCIEDADE BRASILEIRA DE ZOOTECNIA, 35, Porto Alegre, RS. Anais...Porto Alegre: SBZ, p , FRIZZO, A.; ROCHA, M.G.; RESTLE, J. et al. Produção de forragem e retorno econômico da pastagem de aveia e azevém sob pastejo com bezerras de corte submetidas a níveis se suplementação energética. Revista Brasileira de Zootecnia, v.32, n.3, p , 2003.
11 Informe Técnico - Macal Nutrição Animal 11 Elaborado por Marcia Dias GONÇALVES, A.F.C. Efeito da suplementação para matrizes Brangus de primeira cria. Botucatu: Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Dissertação (mestrado)- Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia/Universidade de São Paulo, LAMB, G.C. Beef cattle management update: influence of nutrition on reproduction in the beef cow herd. v.48, NICODEMO, M.L.F.; MORAES, S.S.; SAN THIAGO, L.R.L. et al. Desempenho de vacas jovens Nelore em pastos de braquiária com suplementação diferenciada durante a seca. In: REUNIÃO ANUAL DA SOCIEDADE BRASILEIRA DE ZOOTECNIA, 40, 2003, Santa Maria. Anais... São Paulo: Macromedia, 2003, 4p. CD-ROM. Nutrição de Ruminantes. PILAU, A.; LOBATO, J.F.P.; SANTOS, D.T. et al. Efeito de rebanho e suplementação energética sobre o desempenho reprodutivo de novilhas de corte acasaladas aos 14 meses de idade. In: REUNIÃO ANUAL DA SOCIEDADE BRASILEIRA DE ZOOTECNIA, 41, 2004, Campo Grande. Anais... São Paulo: Macromedia, 2004, 5p. CD-ROM. Manejo e Reprodução. QUADRO, S.A.F.; LOBATO, J.F.P. Bioestimulação e comportamento reprodutivo de novilhas de corte. Revista Brasileira de Zootecnia, v.33, n.3, p , RANDEL, R.D. Nutrition and postpartum rebreeding in cattle. Journal Animal Science, v.68, p , RUAS, J.R.M.; TORRES, C.A.A.; BORGES, L.E. et al. Efeito da suplementação protéica a pasto sobre eficiência reprodutiva e concentrações sangüíneas de colesterol, glicose e uréia, em vacas Nelore. Revista Brasileira de Zootecnia, v.29, n.6, p , (supl.1) SHORT, R.G.; BELLOWS, R.A.; STAIGMILLER, R.B.; et al. Physiological mechanisms anestrus and fertility in postpartum beef cattle. Journal Animal Science, v.68, p , SUÑE, Y.B.P.; BARCELLOS, J.O.J.; COSTA, E.C. et al. Manifestação de estro em novilhas de corte aos 24 meses. In: REUNIÃO ANUAL DA SOCIEDADE BRASILEIRA DE ZOOTECNI A, 41, 2004, Campo Grande. Anais... São Paulo: Macromedia, 2004, 5p. CD- ROM. Manejo e Reprodução.
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