ÍONS LÍTIO AUTOMAÇÃO K 134 INSTRUÇÕES DE USO

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1 Português 1/2 ÍONS LÍTIO AUTOMAÇÃO K 134 INSTRUÇÕES DE USO FINALIDADE Método para a determinação quantitativa de lítio em soro humano. Teste enzimático, somente para uso diagnóstico in vitro. PRINCÍPIO DE AÇÃO Metodologia: Enzimático O lítio é determinado espectrofotometricamente através de uma análise cinética enzimática envolvendo fosfatase cuja atividade é sensível ao lítio (IC50 = 0,1mM). O substrato da fosfatase é convertido em hipoxantina por uma série de reações enzimáticas para gerar ácido úrico e peróxido de hidrogênio ( ). O gerado reage com o N-etil-N-(2-hidroxi-3-sulfopropil)-3-m-toluidina (EHSPT) e 4-aminoantipirina (4-AA) na presença de peroxidase (POD) para formar um corante que tem absorbância máxima em 556 nm. A taxa de formação do corante é inversamente proporcional à concentração de lítio em amostras de soro. Substrato + O Fosfatase AMP + Pi AMP + 2 O + Pi NT/ADA/PNP/XOD Pi + NH 3 + R P + Ácido Úrico AA + EHSPT Peroxidase 4 O + Corante (λ max 556 nm) 5 -NT: 5 -Nucleotidase ADA: Adenosine Deaminase PNP: Purine Nucleosídeo Fosforilase XOD: Xantina Oxidase AMP: Adenosina-5 -fosfato R-1-P: Ribose-1-fosfato REAGENTES N 1: Tampão - Conservar entre 2 e 8 C. Contém: Tampão MES, ADP, 4-AA e conservante. N 2: Enzimático - Conservar entre 2 e 8 C. Contém: Tampão MES, EHSPT, MgCl 2 e conservante. N 3: Padrão Nível 1 Conservar entre 2 e 8 C. Contém: Carbonato de lítio (concentração varia a cada lote). N 4: Padrão Nível 2 - Conservar entre 2 e 8 C. Contém: Carbonato de lítio (concentração varia a cada lote). APRESENTAÇÃO Apresentação Nº 1 Nº 2 Nº 3 Nº 4 K ml 5 ml 3 ml 3 ml K ml 10 ml 3 ml 3 ml K x 20 ml 2 x 10 ml 3 ml 3 ml K x 20 ml 4 x 10 ml 3 ml 3 ml EQUIPAMENTOS E INSUMOS OPERACIONAIS Equipamento bioquímico automatizado, Biocontrol N e Biocontrol P Bioclin. Encontram-se no mercado especializado de artigos para Laboratórios de Análises Clínicas. CONDIÇÕES DE ARMAZENAMENTO E TRANSPORTE A temperatura de armazenamento deverá ser de 2 a 8 C. O transporte, em temperaturas entre 15 e 30 C, não deverá exceder a 72 (setenta e duas) horas. Manter ao abrigo da luz e evitar umidade. CUIDADOS ESPECIAIS 1- Somente para uso diagnóstico in vitro. 2- Seguir com rigor a metodologia proposta para obtenção de resultados exatos. 3- A água utilizada na limpeza do material deve ser recente e isenta de agentes contaminantes. 4- Apesar dos substratos conterem um conservante, devem-se evitar contaminações bacterianas. 5- Não ingerir. Evitar contato com peles e olhos. 6- As amostras devem ser tratadas como potencialmente infecciosas. 7- Recomendamos aplicar as normas locais, estaduais e federais de proteção ambiental para que o descarte dos reagentes e do material biológico seja feito de acordo com a legislação vigente. 8- Para obtenção de informações relacionadas à biossegurança ou em caso de acidentes com o produto, consultar as FISPQ (Ficha de Informação de Segurança de Produtos Químicos) disponibilizadas no site ou através de solicitação pelo SAC (Serviço de Assessoria ao Cliente) da Quibasa. AMOSTRAS Soro. Não deve ser usado soro hemolisado. O analito é estável 4 dias entre 2 e 8 C e 14 dias à 20 C negativos. DESCRIÇÃO DO PROCESSO PREPARO DO REAGENTE Os reagentes estão prontos para uso. TÉCNICA A Bioclin recomenda, para uso do kit, utilizar como soro controle os kits Biocontrol N e P Bioclin. O kit é indicado somente para uso em analisadores bioquímicos automáticos. Verificar a programação para o equipamento no site ou através do SAC. RESULTADOS Os resultados são expressos em mmol/l. LIMITAÇÕES DO PROCESSO Testar periodicamente a calibração para detectar possíveis alterações na resposta do equipamento. INTERFERENTES O teste não sofre interferências das substâncias até nas concentrações indicadas: Na + 200mM NH 4 + 0,5 mm Ca 2+ 4,0 mm Mg 2+ 2,0mM Ácido ascórbico 5,0 mm Zn 2+, 0,25 mm Fe 3+ 0,25 mm Cu 2+ 0,25 mm K + 10 mm Triglicerídeos 1000mg/dL Bilirrubina conjugada 20mg/dL Bilirrubina não conjugada 45mg/dL CONTROLE INTERNO DE QUALIDADE O Laboratório Clínico deve possuir um programa interno de controle da qualidade, onde procedimentos, normas, limites e tolerância para variações sejam claramente estabelecidos. É importante ressaltar que todos os sistemas de medição apresentam uma variabilidade analítica característica, que deve ser monitorada pelos próprios laboratórios. Para tanto, é recomendável a utilização de controles, que permitem avaliar a precisão e a exatidão das dosagens. RASTREABILIDADE Os padrões do kit são rastreáveis ao material de referência SRM 924A do NIST (National Institute of Standards and Technology). VALORES DE REFERÊNCIA Os valores de referência, em mmol/l, para o presente método foram obtidos através da determinação de Lítio em populações sadias do sexo masculino e feminino. As concentrações foram dosadas 12 horas após administração de lítio. Lítio... 1,0 a 1,2 mmol/l Níveis superiores a 1,5 mmol/l indicam um risco significativo de intoxicação. Estes valores devem ser usados como orientação, sendo que cada laboratório deverá criar sua faixa de valores de

2 referência, de acordo com a população atendida. DESEMPENHO DO PRODUTO CONTROLE DE QUALIDADE Exatidão COMPARAÇÃO DE MÉTODOS E ESPECIFICIDADE METODOLÓGICA O Kit Íons Lítio Automação foi comparado com outro método para dosagem de Lítio comercialmente disponível. Foram realizadas 07 análises e os resultados foram avaliados. A equação linear obtida foi y = 1,016x - 0,002 e o coeficiente de correlação = 0,998. Com estes resultados, pode-se concluir que o kit apresenta boa especificidade metodológica. Precisão REPETIBILIDADE A repetibilidade refere-se a 20 determinações sucessivas de lítio, utilizando-se 3 amostras com concentrações diferentes. Foram encontrados os seguintes resultados: Concentração Média Desvio Padrão Variação (%) Amostra 1 Amostra 2 Amostra 3 0,879 1,179 1,749 0,008 0,007 0,007 0,897 0,632 0,411 REPRODUTIBILIDADE A reprodutibilidade refere-se a 20 determinações de lítio, em 3 dias diferentes, com 3 amostras de concentrações diferentes. Foram encontrados os seguintes resultados: Concentração Média Desvio Padrão Variação (%) Amostra 1 Amostra 2 Amostra 3 0,872 1,177 1,750 0,006 0,002 0,002 0,672 0,130 0,087 Sensibilidade A sensibilidade do kit Íons Lítio Automação foi calculada a partir de 20 determinações de uma amostra isenta da presença de lítio. A média encontrada foi de 0,175 mmol/l, com desvio padrão de 0,005 mmol/l. A sensibilidade ou limite de detecção do método, que corresponde a média mais 3 vezes o desvio padrão, é igual a 0,190 mmol/l. Linearidade O kit Íons Lítio Automação é linear até 3,0 mmol/l. Nota: As amostras com valores superiores a 3,0 mmol/l devem ser diluídas com uma parte igual de solução salina 0,9% (1:1) e novamente analisadas. O resultado deve ser multiplicado por dois. SIGNIFICADO DIAGNÓSTICO Durante décadas, o carbonato de lítio tem sido um dos agentes mais eficazes para o tratamento de pacientes que sofrem de transtorno bipolar (psicose maníaco-depressiva). O lítio age alterando o metabolismo intra-neuronal das catecolaminas, a inibição da adenilato ciclase sensível a noradrenalina e redução na transmissão sináptica e aumento da excitabilidade neuronal com modificação do nível de amina no sistema nervoso central (CNS). Recentemente, estudos também mostraram que o lítio é um agente promissor contra a doença de Alzheimer. No entanto, o lítio tem muitos efeitos colaterais. Altas dosagens de lítio podem causar intoxicação aguda, o que ocorre muitas vezes devido a sua estreita margem terapêutica. Por exemplo, níveis séricos de Li + acima de 1,5 mm (12 horas após uma dose), geralmente indicam um risco significativo de intoxicação. Portanto, a monitorização precisa e rigorosa do nível sérico de lítio, após uma dose terapêutica é fundamental. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS 1. J.R. Murguia, J.M. Belles and R. Serrano A saltsensitive 3 (2 ),5 -bisphosphate nucleotidase involved in sulfate activation (1995), Science 267: T.P. Moyer and C.E. Pippenger, Therapeutic Drug Monitoring, Tietz Textbook of Clinical Chemistry. CA C.A. Burtis and E.R. Ashwood eds, (Second ed.) W.B. Saunders Company. 3. A. Amdisen, Serum Lithium Determinations for Clinical Use (1967), Scand. J. Clin. Lab Invest. 20: M.S. Wachtel et al., Creation and Verification of Reference Intervals (1995), Laboratory Medicine 26: GARANTIA DE QUALIDADE Antes de serem liberados para o consumo, todos os reagentes Bioclin são testados pelo Departamento de Controle de Qualidade. A qualidade dos reagentes é assegurada até a data de validade mencionada na embalagem de apresentação, desde que armazenados e transportados nas condições adequadas. DADOS DO FABRICANTE QUIBASA QUÍMICA BÁSICA Ltda Rua Teles de Menezes, 92 - Santa Branca CEP: Belo Horizonte - MG - Brasil Tel.: ( 31 ) Fax ( 31 ) bioclin@bioclin.com.br CNPJ: / Indústria Brasileira ATENDIMENTO AO CONSUMIDOR Serviço de Assessoria ao Cliente Tel.: sac@bioclin.com.br Número de registro do kit Íons Lítio Automação na ANVISA: Revisão: Maio/12 Português 2/2

3 Español 1/2 IONES LITIO AUTOMACIÓN K 134 INSTRUCCIONES DE USO FINALIDAD Método para la determinación cuantitativa de litio en suero humano. Test enzimático, solamente para uso diagnóstico in vitro. PRINCIPIO DE ACCIÓN Metodología: Enzimático El litio es determinado espectrofotométricamente a través de un análisis cinético enzimático envolviendo fosfatasa cuya actividad es sensible al litio (IC50 = 0,1mM). El sustrato de la fosfatasa es convertido en hipoxantina por una serie de reacciones enzimáticas para generar ácido úrico e peróxido de hidrógeno ( ). O generado reaccionona con el N-etil-N-(2-hidroxi-3- sulfopropil)-3-m-toluidina (EHSPT) y 4-aminoantipirina (4-AA) en la presencia de peroxidasa (POD) para formar un colorante que tiene absorbencia máxima en 556 nm. La tasa de formación del colorante es inversamente proporcional a la concentración de litio en muestras de suero. Sustrato + O Fosfatasa AMP + Pi AMP + 2 O + Pi NT/ADA/PNP/XOD Pi + NH 3 + R P + Ácido Úrico AA + EHSPT Peroxidasa 4 O + Corante (λ max 556 nm) 5 -NT: 5 -Nucleotidasa ADA: Adenosina Deaminasa PNP: Purina Nucleosídeo Fosforilasa XOD: Xantina Oxidasa AMP: Adenosina-5 -fosfato R-1-P: Ribosa-1-fosfato REACTIVOS N 1: Tapón - Almacenar entre 2 y 8 C. Contiene: Tapón MES, ADP, 4-AA y conservante. N 2: Enzimático - Almacenar entre 2 y 8 C. Contiene: Tapón MES, EHSPT, MgCl 2 y conservante. N 3: Patrón Nível 1 Almacenar entre 2 y 8 C. Contiene: Carbonato de litio (concentración varia a cada lote). N 4: Patrón Nível 2 - Almacenar entre 2 y 8 C. Contiene: Carbonato de litio (concentración varía a cada lote). PRESENTACIÓN Presentación Nº 1 Nº 2 Nº 3 Nº 4 K ml 5 ml 3 ml 3 ml K ml 10 ml 3 ml 3 ml K x 20 ml 2 x 10 ml 3 ml 3 ml K x 20 ml 4 x 10 ml 3 ml 3 ml EQUIPOS E INSUMOS OPERACIONALES Equipo bioquímico automatizado, Biocontrol N y Biocontrol P Bioclin. Se encuentran en el mercado especializado de artículos para Laboratorios de Análisis Clínicos. CONDICIONES DE ALMACENAMIENTO Y TRANSPORTE La temperatura de almacenamiento deberá ser de 2 a 8 C. El transporte, a temperaturas entre 15 y 30 C, no deberá exceder 72 (setenta y dos) horas. Mantener al abrigo de la luz y evitar la humedad. CUIDADOS ESPECIALES 1- Solamente para uso diagnóstico in vitro. 2- Seguir con rigor la metodología propuesta para obtención de resultados exactos. 3- El agua utilizada en la limpieza del material debe ser reciente e exenta de agentes contaminantes. 4- A pesar de que los sustratos contienen un conservante, se debe evitar contaminaciones bacterianas. 5- No ingerir. Evitar contato con pa piel y ojos. 6- Las muestras deben ser tratadas como potencialmente infecciosas. 7- Se recomienda la aplicación de la ley local, estatal y federal de protección ambiental para la eliminación de reactivos y material biológico se hace de acuerdo con la legislación vigente. 8- Para obtener información relacionada con la seguridad biológica o en caso de accidentes con el producto, consultar la FISPQ (Ficha de Informaciones de la Seguridad de Productos Químicos) disponibles en el site o solicitando a través del SAC (Servicio de Asesoría al Cliente) de Quibasa. AMOSTRAS Suero. No debe ser usado suero hemolizado. El analito es estable 4 días entre 2 y 8 C y 14 días a 20 C negativos. DESCRIPCIÓN DEL PROCESO PREPARO DEL REACTIVO Los reactivos están prontos para uso. TÉCNICA La Bioclin recomienda, para uso del kit, utilizar como suero control los kits Biocontrol N y P Bioclin. El kit es indicado solamente para uso en analizadores bioquímicos automáticos. Verificar la programación para el equipo en el site o a través del SAC. RESULTADOS Los resultados son expresados en mmol/l. LIMITACIONES DEL PROCESO Testar periódicamente la calibración para detectar posibles alteraciones en la respuesta del equipo. INTERFERENTES El test no sufre interferencias de las substancias hasta en las concentraciones indicadas: Na + 200mM NH 4 + 0,5 mm Ca 2+ 4,0 mm Mg 2+ 2,0mM Ácido ascórbico 5,0 mm Zn 2+, 0,25 mm Fe 3+ 0,25 mm Cu 2+ 0,25 mm K + 10 mm Triglicerídeos 1000mg/dL Bilirrubina conjugada 20mg/dL Bilirrubina no conjugada 45mg/dL CONTROL INTERNO DE CALIDAD El Laboratorio Clínico debe poseer un programa interno de control de calidad, donde procedimientos, normas, límites y tolerancia para variaciones sean claramente establecidos. Es importante resaltar que todos los sistemas de medición presentan una variabilidad analítica característica, que debe ser vigilada por los propios laboratorios. Por lo tanto, es recomendable la utilización de controles, que permiten la evaluación, la precisión y la exactitud de las dosificaciones. TRAZABILIDAD El patrones del kits son trazable al material de referencia SRM 924A del NIST (National Institute of Standards and Technology). VALORES DE REFERENCIA Los valores de referencia, en mmol/l, para el presente método fueron obtenidos a través de la determinación de Litio en poblaciones sanas del sexo masculino y femenino. Las concentraciones fueron dosificadas 12 horas luego de a administración de litio. Litio... 1,0 a 1,2 mmol/l

4 Niveles superiores a 1,5 mmol/l indican un riesgo significativo de intoxicación. Estos valores deben ser usados como orientación, y cada laboratorio deberá crear su rango de valores de referencia, de acuerdo con a población atendida. DESEMPEÑO DEL PRODUCTO CONTROL DE CALIDAD Exactitud COMPARACIÓN DE MÉTODOS Y ESPECIFICIDAD METODOLÓGICA El Kit Iones Litio Automatización fue comparado con otro método para la dosificación de Litio comercialmente disponible. Fueron realizadas 07 análisis y los resultados fueron evaluados. La ecuación linear obtenida fue y = 1,016x - 0,002 y el coeficiente de correlación = 0,998. Con estos resultados, se puede concluir que el kit presenta buena especificidad metodológica. Precisión REPETIBILIDAD La repetibilidad se refiere a 20 determinaciones sucesivas de Litio, utilizándose 3 muestras con concentraciones diferentes. Fueron encontrados los siguientes resultados Concentración Promedio Desvío Patrón Variación (%) Muestra 1 Muestra 2 Muestra 3 0,879 1,179 1,749 0,008 0,007 0,007 0,897 0,632 0,411 REPRODUCTIBILIDAD La repproductibilidad se refiere a 20 determinaciones de litio, en 3 días diferentes con 3 muestras de concentraciones diferentes. Fueron encontrados los siguientes resultados Concentración Promedio Desvío Patrón Variación (%) Muestra 1 Muestra 2 Muestra 3 0,872 1,177 1,750 0,006 0,002 0,002 0,672 0,130 0,087 Sensibilidad La sensibilidad del kit Iones Litio fue calculada a partir de 20 determinaciones de una muestra exenta de la presencia de litio. El promedio encontrado fue de 0,175 mmol/l, con desvío patrón de 0,005 mmol/l. La sensibilidad o límite de detección del método, que corresponde al promedio más 3 veces el desvío patrón, es igual a 0,190 mmol/l. Linearidad El kit Iones Litio Automación es linear hasta 3,0 mmol/l. Nota: Las muestras con valores superiores a 3,0 mmol/l deben ser diluídas con una parte igual de solución salina 0,9% (1:1) y nuevamente analizadas. El resultado debe ser multiplicado por dos. SIGNIFICADO DIAGNÓSTICO Durante décadas, el carbonato de litio ha sido uno de los agentes más eficaces para el tratamiento de pacientes que sufren de transtorno bipolar (psicosis maníaco-depresiva). El litio actua alterando el metabolismo intra-neuronal de las catecolaminas, la inhibición del adenilato ciclasa sensible la noradrenalina y reducción en la transmisión sináptica y aumento de la excitabilidad neuronal con modificación del nivel de aminas en el sistema nervioso central (CNS). Recientemente, estudios también mostraron que el litio es un agente promissor contra la dolencia de Alzheimer. Sin embargo, el litio tiene muchos efectos colaterales. Altas dosificaciones de litio pueden causar intoxicación aguda, lo que ocurre muchas veces debido a su estrecha márgem terapéutica. Por ejemplo, niveles séricos de Li + encima de 1,5 mm (12 horas después de una dosis), generalmente indican un riesgo significativo de intoxicación. Por lo tanto, necesita un seguimiento y riguroso control del nivel sérico de litio, después de una dosis terapéutica es fundamental. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS 1. J.R. Murguia, J.M. Belles and R. Serrano A saltsensitive 3 (2 ),5 -bisphosphate nucleotidase involved in sulfate activation (1995), Science 267: T.P. Moyer and C.E. Pippenger, Therapeutic Drug Monitoring, Tietz Textbook of Clinical Chemistry. CA C.A. Burtis and E.R. Ashwood eds, (Second ed.) W.B. Saunders Company. 3. A. Amdisen, Serum Lithium Determinations for Clinical Use (1967), Scand. J. Clin. Lab Invest. 20: M.S. Wachtel et al., Creation and Verification of Reference Intervals (1995), Laboratory Medicine 26: GARANTÍA DE CALIDAD Antes de ser liberado para el consumo, todos los reactivos Bioclin son testados por el Departamento de Control de Calidad. La calidad de los reactivos es asegurada hasta la fecha de validad mencionada en el embalaje de presentacion, desde que sean almacenados y transportados en las condiciones adecuadas. DATOS DEL FABRICANTE QUIBASA QUÍMICA BÁSICA Ltda Rua Teles de Menezes, 92 - Santa Branca CEP: Belo Horizonte - MG - Brasil Tel.: +55 ( 31 ) Fax +55 ( 31 ) bioclin@bioclin.com.br CNPJ: / Indústria Brasileña ATENDIMIENTO AL CONSUMIDOR Serviço de Assessoria ao Cliente Tel.: sac@bioclin.com.br Número de registro del kit de Iones Litio Automación en la ANVISA: Revisión: Mayo/12 Español 2/2

5 English 1/2 LITHIUM IONS AUTOMATED K 134 USAGE INSTRUCTIONS FUNCTION Method for the quantitative determination of lithium in human serum. Enzymatic test, for In vitro Diagnostics use only. PRINCIPLE OF ACTION Methodology: Enzymatic The lithium is spectrophotometricaly determinate through a kinetic enzymatic analysis involving the phosphatase, which activity is sensitive to Lithium (IC50 = 0,1 mm). The phosphatase substrate is converted into hypoxantin by a series of enzymatic reactions that can generate uric acid and hydrogen peroxide ( ). The generated reacts with the N-etil- N-(2-hidroxi-3-sulphopropyl)-3-m-toluidine(EHSPT) and 4-amminoantipyrine (4-AA) in the presence of peroxidase (POD) to form a dye with the maximum absorbance of 556 nm. The dye formation rate is inversely proportional to the concentration of lithium in sera samples. Substrate + O Phosphatase AMP + Pi AMP + 2 O + Pi NT/ADA/PNP/XOD Pi+NH 3 +R-1-P+ Uric Acid AA + EHSPT Peroxidase 4 O + Dye (λ max 556 nm) 5 -NT: 5 -Nucleotidase ADA: Adenosine Deaminase PNP: Purine Nucleoside phosphorylase XOD: Xanthine Oxidase AMP: Adenosine-5 -phosphate R-1-P: Ribose-1-phosphate REAGENTS N 1: Buffer - Store between 2 and 8 C. Contains: MES buffer, ADP, 4-AA and preservative. N 2: Enzymatic - Store between 2 and 8 C. Contains: MES buffer, EHSPT, MgCl 2 and preservative. N 3: Standard Level 1 - Store between 2 and 8 C. Contains: Lithium carbonate (concentration varies to each lot). N 4: Standard Level 2 - Store between 2 and 8 C. Contains: Lithium carbonate (concentration varies to each lot). PRESENTATION Presentation Nº 1 Nº 2 Nº 3 Nº 4 K ml 5 ml 3 ml 3 ml K ml 10 ml 3 ml 3 ml K x 20 ml 2 x 10 ml 3 ml 3 ml K x 20 ml 4 x 10 ml 3 ml 3 ml EQUIPMENTS AND OPERATIONAL INPUTS Biochemistry automated equipment, Biocontrol N and Biocontrol P Bioclin. They can be found at markets specialized on Clinical Analysis Laboratories. TRANSPORTATION AND STORAGE CONDITIONS The storage temperature should be between 2 to 8 C. The transport at temperatures between 15 and 30 C should not exceed 72 (seventy two) hours. Protect from light and avoid moisture. SPECIAL CARE 1- For in vitro diagnostic only. 2- Strictly follow the methodology proposed to obtain exact results. 3- Water used in material cleaning must to be recent and free of contaminants. 4- Although the substrate contains preservative, must avoid bacterial contamination. 5- Do not ingest. Avoid contact with eyes and skin. 6- The samples must be treated as potentially infectious. 7- We recommend applying the local, state and federal rules for environmental protection, so that disposal of reagents and biological material can be made in accordance with current legislation. 8- To obtain information related to biosafety or in case of accidents with the product, consult the MSDS (Material Safety Data Sheet) available on the website or upon request by the SAC (Advisory Service Customer) of Quibasa. SAMPLES Serum. Do not use hemolyzed serum. The analyte is stable for 4 days between 2 and 8 C and 14 days at -20 C. PROCESS DESCRIPTION REAGENT PREPARATION The reagents are ready for use. TECHNIQUE Bioclin recommends, as control serum, Biocontrol N and P Bioclin Kits. The kit is indicated for biochemistry automated analyzers only. Verify the programming for the instrument in our website or through our SAC. RESULTS The results are expressed in mmol/l. PROCEDURE LIMITATIONS Test periodically and calibrate to detect possible changes in the response of the instrument. INTERFERENCE The test does not suffer interference from the substances with the top concentrations of: Na + 200mM NH 4 + 0,5 mm Ca 2+ 4,0 mm Mg 2+ 2,0mM Ascorbic acid 5,0 mm Zn 2+, 0,25 mm Fe 3+ 0,25 mm Cu 2+ 0,25 mm K + 10 mm Triglyceride 1000mg/dL Bilirrubin conjugated 20mg/dL Bilirrubin non conjugated 45mg/dL INTERNAL QUALITY CONTROL The Clinical Laboratory must have an internal quality control, where all procedures, rules, limits and tolerance to variations be clearly established. It is important to mention that all measurement systems present a analytical variety, and it must be monitor by the laboratory. Therefore, it is recommendable the use of controls, allowing the precision and accuracy of the dosages. TRACEABILITY The kit s standards are traceable to the reference material NIST (National Institute of Standards and Technology) SRM 924A. REFERENCE VALUES The reference values in mmol/l, for this method, were obtained through the determination of lithium in healthy populations of male and female. The concentrations were dozed 12 hours past the lithium administration. Lithium.. 1,0 to 1,2 mmol/l. Values higher than 1,5 mmol/l indicate a severe risk of intoxication. These values should be used as guidance, and each laboratory should establish its range of reference values, according to the population served.

6 PRODUCT PERFORMANCE QUALITY CONTROL Accuracy COMPARISON OF METHODS AND METHODOLOGICAL SPECIFICITY The Lithium Ions Automated was compared with another method commercially available to measure lithium. 07 analysis were conducted and the results were evaluated. The linear equation was obtained y = 1,016x 0,002, with a correlation coefficient equal to 0,998. With these results we can conclude that the kit has good methodological specificity. Precision REPEATABILITY Repeatability refers to 20 successive measurements of lithium were performed with three samples with different concentrations obtaining the following results: Average Concentration Standard Deviation Coefficient of Variation (%) Sample 1 Sample 2 Sample 3 0,879 1,179 1,749 0,008 0,007 0,007 0,897 0,632 0,411 REPRODUCIBILITY Reproducibility refers to 20 measurements of Lithium, performed for 3 different days with 3 samples of different concentrations, obtaining the following results: Average Concentration Standard Deviation Coefficient of Variation (%) Sample 1 Sample 2 Sample 3 0,872 1,177 1,750 0,006 0,002 0,002 0,672 0,130 0,087 Sensitivity The sensitivity of the Lithium Ions kit was calculated from 20 determinations of a sample free of Lithium. The average found was of 0,175 mmol/l with standard deviation of 0,005 mmol/l. The sensitivity, which indicates the Method Detection Limit, corresponds to 3 times the standard deviation which is equal to 0,190 mmol/l. Linearity The Lithium Ions Automated Kit is linear up to 3,0 mmol/l. Attention: samples with values higher than 3,0 mmol/l must be diluted with a similar portion of saline 0,9% (1:1) and analyzed again. The result must be multiplied by two. DIAGNOSTIC SIGNIFICANCE For decades, the lithium carbonate had been one of the most efficient agents for the treatment of patients suffering of bipolar disorder (manic depressive psychosis). The lithium acts changing the metabolism intra-neural of the catecholamines, the inhibition of the adenylate cyclase sensitive to the noradrenaline and reduction of the synaptic transmission and the neuronal excitability with the modification of ammine level in the central nervous system (CNS). Recent studies also show that the lithium is a promising agent against the Alzheimer disease. However, lithium has many side effects. High dosages of lithium can cause severe intoxication, occurs mainly because of its narrow therapeutic margin. As example, sera levels of Li + above 1,5 mm (12 hours after a dosage) generally indicate a significant risk of intoxication. Therefore, the precise and rigorous monitoring of the lithium sera level, after a therapeutic dosage is fundamental. BIBLIOGRAPHIC REFERENCES 1. J.R. Murguia, J.M. Belles and R. Serrano A saltsensitive 3 (2 ),5 -bisphosphate nucleotidase involved in sulfate activation (1995), Science 267: T.P. Moyer and C.E. Pippenger, Therapeutic Drug Monitoring, Tietz Textbook of Clinical Chemistry. CA C.A. Burtis and E.R. Ashwood eds, (Second ed.) W.B. Saunders Company. 3. A. Amdisen, Serum Lithium Determinations for Clinical Use (1967), Scand. J. Clin. Lab Invest. 20: M.S. Wachtel et al., Creation and Verification of Reference Intervals (1995), Laboratory Medicine 26: QUALITY ASSURANCE Before being released for consumption, all Bioclin reagents are tested by the Department of Quality Control. The quality of reagents is assured until expiration date stated on the presentation packaging, when stored and transported under appropriate conditions. MANUFACTURER S DATA QUIBASA QUÍMICA BÁSICA Ltda Rua Teles de Menezes, 92 - Santa Branca CEP Belo Horizonte - MG - Brasil Phone.: +55 (31) Fax +55 (31) bioclin@bioclin.com.br CNPJ: / Indústria Brasileira CUSTOMER SERVICE Customer Advisory Service Phone.: sac@bioclin.com.br ANVISA registration for Lithium Ions Automated kit: Review: May/12 English 2/2