Avaliação dos tecidos peri-implantares caracterização de um modelo experimental em cães Beagle

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1 Capítulo V. Resumo

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3 Capítulo V. Resumo De modo a tornar possível o estudo da peri-implantite desenvolveram-se alguns modelos experimentais, utilizando principalmente o cão como modelo animal. No início do presente trabalho foi realizada uma revisão bibliográfica sobre o modelo experimental canídeo para estudo da peri-implantite. Foram incluídos 56 artigos para análise. Todos os autores recorreram a ligaduras, contudo verificou-se uma grande heterogeneidade nas metodologias utilizadas. Este modelo experimental apresenta falhas na recriação do ambiente anatómico, fisiológico ou patológico, encontrado na peri-implantite humana, sendo necessário estudar novos modelos experimentais. O objetivo principal deste estudo é determinar se a ausência de controlo de placa bacteriana altera os parâmetros clínicos, radiográficos, microbiológicos e histológicos nos tecidos peri-implantares de um modelo experimental canídeo. Em seis cães da raça Beagle, com 2,5 anos de idade, foram extraídos bilateralmente os pré-molares e primeiros molares mandibulares (semana -24). Oito semanas após as extracções, suspenderam-se as medidas de controlo da placa bacteriana (semana -16), que se mantiveram até à colocação dos implantes (semana 0). Em cada hemimandíbula, foram colocados dois implantes com superfície SLA (Standard Plus Ø3,3x8mm, narrow neck, Institut Straumann AG, Basel, Switzerland) as quais foram aleatoriamente distribuídas por dois grupos: um onde se realizou o controlo da placa bacteriana (implantes controlo - IC); outro onde não se realizou esse controlo (implantes teste - IT). Para além da avaliação radiográfica no dia da colocação, os implantes foram avaliados clínica, radiográfica e microbiologicamente nas semanas 3, 6, 9, 12, 15 e 17, e histologicamente após a eutanásia dos animais, à 17ª semana. Clinicamente, foi avaliada a presença de placa bacteriana (PPB), a mucosite peri-implantar (MPI), a profundidade de sondagem (PS), a hemorragia após sondagem (HS), o nível da margem gengival (NMG), o nível de inserção clínico (NIC) e a supuração. Radiograficamente foi avaliada a variação da distância entre o ombro do implante (ODI) e o contacto mais coronal osso-implante (coi). Recorrendo à técnica de reação em cadeia da polimerase em tempo real, foi quantificado o DNA das bactérias totais (BT), Streptococcus species, Fusobacterium species, Porphyromonas gingivalis (Pg), Aggregatibacter actinomycetemcomitans (Aa) e Prevotella intermedia (Pi). Em cortes não descalcificados, realizou-se a análise histomorfométrica para mensuração das seguintes distâncias: margem gengival-zona apical do epitélio juncional (MG-aEJ), margem gengival-zona apical do epitélio sulcular (MG-aES), crista óssea-zona apical do epitélio sulcular (CO-aES), crista óssea-zona apical do epitélio 161

4 Avaliação dos tecidos peri-implantares caracterização de um modelo experimental em cães Beagle juncional (CO-aEJ), margem gengival-crista óssea (MG-CO), ombro do implante-crista óssea (OI-CO), margem gengival-zona apical do infiltrado inflamatório (OI-aINF) e percentagem de infiltrado inflamatório (%INF). Analisou-se igualmente a correlação entre as variáveis PS e MG-aEJ ou MG-aES, bem como entre a variável ODI-aOI e OI-cOI. No final do protocolo experimental, os parâmetros clínicos, PPB, MPI, PS, HS e NIC apresentaram diferenças estatisticamente significativas entre grupos, com os IT a revelar valores mais elevados. Relativamente ao parâmetro radiográfico, a diferença entre grupos não revelou ser estatisticamente significativa. A análise microbiológica identificou haver diferenças inter-grupos para as B.T., Fusobacterium spp., Pg e Aa, com os IT a obter o valor mais elevado. A histomorfometria apresentou diferenças estatisticamente significativas entre ambos os grupos, com os IT a apresentarem maiores valores para MG-aINF e de %INF. Encontrou-se uma correlação positiva entre a PS e a MG-aEJ nos implantes teste. A distância radiográfica ODI-cOI e a histológica OI-cOI correlacionam-se positivamente para ambos grupos. A ausência de medidas de controlo da placa bacteriana provocou diferenças estatisticamente significativas, entre ambos os grupos, em parâmetros clínicos, microbiológicos e histológicos. No entanto, apesar das alterações, as lesões diagnosticadas neste modelo não apresentam características devidamente sobreponíveis às características presentes na peri-implantite humana. Palavras chave: modelo experimental, cão, peri-implantite. 162

5 Capítulo VI. Abstract

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7 Capítulo VI. Abstract In order to study peri-implantitis some experimental models were developed, mainly using the dog as animal model. At the beginning of this study, a bibliographic review was performed regarding the experimental dog model for peri-implantitis studies. Fifty-six studies were included for analysis. All used ligatures in order to establish a peri-implant lesion, with great methodological heterogeneity. Considering that the present experimental model fails to recreate the anatomic, physiologic or pathological environment of the clinical conditions found in human peri-implantitis, there is a need to research new experimental models. The main objective of this study is to evaluate whether the absence of plaque control alters the clinical, radiological, microbiological and histological peri-implant tissue parameters. Six 2 ½ year-old male Beagle dogs had their bilateral mandible premolars and first molar extracted (week -24). Eight weeks later plaque control measures were suspended (week -16) until implant placement (week 0). Two SLA surface implants (Standard Plus Ø3,3x8mm, narrow neck, Institut Straumann AG, Basel, Switzerland) were placed at each hemimandible and were randomly assigned to one of each group: a group with plaque control (control implants CI); a group without plaque control (test implants TI). On the day of implant placement a radiographic evaluation was performed. Implants were then evaluated clinically, radiographically and microbiologically at weeks 3, 6, 9, 12, 15 and 17, and histologically after euthanasia. Presence of plaque (PP), mucositis (Muc), probing depth (PD), bleeding on probing (BOP), gingival marginal level (GML), clinical attachment level (CAL) and suppuration were clinically evaluated. The distance between implant shoulder (IS) and first bone to implant contact (fbic) was evaluated radiographically. Microbiological samples were collected during the 17 week experimental procedure. Using real-time polymerase chain reaction, the DNA of total bacteria (TB) load, Streptococcus species, Fusobacterium species, Porphyromonas gingivalis (Pg), Aggregatibacter actinomycetemcomitans (Aa) and Prevotella intermedia (Pi) was quantified. After euthanasia, implant and peri-implant tissues were histologically analyzed using a undecalcified technique, and histomorphometry performed to measure the following distances: gingival margin-apical junctional epithelium (GM-aJE); gingival margin-apical sulcular epithelium (GM-aSE); bone crest-apical sulcular epithelium (BC-aSE); bone crest-apical junctional epithelium (BC-aJE); gingival margin-bone crest (GM-BC); implant shoulder-bone crest (IS-BC); gingival margin-apical inflammatory infiltrate (GM-aINF) and inflammatory infiltrate percentage (%INF). 165

8 Avaliação dos tecidos peri-implantares caracterização de um modelo experimental em cães Beagle A possible correlation between PD and GM-aJE or GM-aSE, and also between IS-fBIC and IS-BC, was analyzed. Regarding the results of the clinical parameters at the end of the protocol PP, Muc, PD, BOP and CAL had statistically significant differences between groups, with higher values of TI. The radiographic parameter evaluated, at the end of the procedure, revealed no statistically significant difference between groups. At the end of the experimental protocol microbiological analysis identified intergroup differences for TB, Fusobacterium spp., Pg and Aa, with TI having the highest value. Histomorphometry showed statistically significant differences between both groups, with TI having the higher values of MG-aINF and %INF. Finally, a positive correlation was found between PD and the GM-aJE for TI. On the other hand, the radiographic distance IS-fBIC and histologic IS-HI correlate positively to both groups. The absence of measures to control plaque was the variable tested in this experimental study, and resulted in statistically significant differences between both groups in clinical, microbiological and histological parameters. However, despite all these changes, the lesions seen in this model did not overlap features due to the characteristics present in the human peri-implantitis. Key-words: experimental model, dog, peri-implantitis. 166