PONTIFÍCIA UNIVERSIDADE CATÓLICA DE GOIÁS DEPARTAMENTO DE BIOLOGIA CURSO DE ENGENHARIA AMBIENTAL MICROBIOLOGIA APLICADA.
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- Denílson Lage Pedroso
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1 PONTIFÍCIA UNIVERSIDADE CATÓLICA DE GOIÁS DEPARTAMENTO DE BIOLOGIA CURSO DE ENGENHARIA AMBIENTAL MICROBIOLOGIA APLICADA Meios de Cultura
2 Microbiologia Clínica Meios de Cultura Conjunto de substâncias, formuladas de maneira adequada, capazes de promover o cresc. bacteriano, em condições de laboratório. - A maioria das bact. pode ser cultivada em laboratório, utilizando-se meios nutrientes; - Diferentes espécies de bactérias, variam extensivamente quanto as exigências mínimas de substâncias nutrientes;
3 Características B ásicas dos Meios de Cultura: - Fonte de Carbono e Nitrogênio; - Fonte de Energia; - Sais Minerais; - Fatores de Crescimento; - Condições Físicas; - Esterilização.
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5 Classificação dos Meios de Cultura: De acordo com seu conteúdo químico, os meios de cultura podem ser sintéticos ou complexos. 1. Meio de Enriquecimento: - geralmente líquido, de composição química rica em nutrientes, com a finalidade de permitir que as bactérias contidas em uma amostra clínica aumentem em número. Ex.: Caldo Brain Heart Infusion (BHI) e Caldo Tetrationato.
6 Classificação dos Meios de Cultura: 2. Meio de Transporte: - consiste em um meio isento de nutrientes, contendo um agente redutor (Tioglicolato ou cisteína). Geralmente mantém o ph favorável, previne a desidratação de secreções durante o transp. e evita a oxidação e auto-destruição enzimática dos patógenos presentes. Ex.: Meio de Stuart, Meio de Cary-Blair e Caldo Tioglicolato.
7 Classificação dos Meios de Cultura: 3. Meio Seletivo: - a finalidade deste tipo de meio é selecionar as espécies que se deseja isolar e impedir o desenvolvimento de outros germes (adição de corantes, antibióticos e outras substâncias com capacidade inibitória para alguns germes. Ex.: Agar Manitol Salgado e Agar SS
8 Classificação dos Meios de Cultura: 4. Meio Diferencial: - possibilita a distinção entre vários gêneros e espécies de microrganismos, por possuir substâncias que permitem uma diferenciação presuntiva, evidenciada na mudança de coloração ou na morfologia das colônias. Ex.: Agar Eosin Methilene Blue (EMB), Agar McConkey e Agar Hektoen.
9 Classificação dos Meios de Cultura: 5. Meio Indicador: - é utilizado no estudo das propriedades bioquímicas das bactérias, auxiliando, assim, sua identificação. O mais simples é aquele usado no estudo das reações de fermentação. Ex.: Agar Triple Sugar Iron (TSI) e Agar Citrato de Simmons..
10 S eleção dos Meios de Cultura: - a escolha dos meios de cultura, para o processamento inicial das amostras é muito importante e está condicionada à flora patogênica desse local; - em geral é usado mais de um tipo de meio, no sentido de fornecer condições de crescimento a todos os patógenos possíveis de estarem presentes;
11 S eleção dos Meios de Cultura: - para cada caso em particular, existem os meios utilizados rotineiramente na semeadura primária; - atualmente, o procedimento mais utilizado é a aquisição de meios pré-fabricados e fornecidos de forma desidratada, onde é necessário apenas a pesagem criteriosa da quantidade necessária ao volume desejado, seguido de dissolução e esterilização.
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13 Classificação quanto ao estado físico - Líquidos ou caldos: crescimento indiscriminado com turvação do meio - Sólidos: crescimento de colônias isoladas, muito uitilizado para culturas puras - Semi-sólido: adição de menor quantidade de ágar, mobilidade bacteriana s
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15 Novidade: Chromagar
16 AquaCHROM CHROMagar Orientação Presença / ausência de E.coli e coliformes em amostras de água Técnica líquida. Aparência típica de microrganismos E.coli Liquido azul para Verde Para o isolamento e diferenciação de patógenos do trato urinário. Aparência típica de microrganismos E.coli vermelho Enterococcus azul turquesa Klebsiella, Enterobacter, Citrobacter azul metálico Proteus halo marrom Coliformes Outros líquido amarelo
17 E.coli CHROMagar CHROMagar ECC Para a detecção e enumeração de E.coli em amostras de alimentos e água. Aparência típica de microrganismos E.coli azul Outras bactérias gram negativas incolor Gram positivos inibidos Para a detecção simultânea e enumeração de E. coli e outros coliformes em amostras de alimentos ou água. Aparência típica de microrganismos E.coli Azul Outros Coliformes Vermelho Outras bactérias incolores ou inibida.
18 CHROMagar ECC Liquid CHROMagar Salmonella Plus Para a detecção simultânea e enumeração de E. coli e outros coliformes em amostras de alimentos ou água. Aparência típica de microrganismos E.coli Azul Coliformes Outros Vermelho Outras bactérias incolores ou inibida. Para a detecção e isolamento de Salmonella, incluindo S. Typhi, S. Paratyphi e Salmonella lactose positiva agora é necessário em microbiologia de alimentos pela norma ISO 6579:2002. Aparência típica de microrganismos Salmonella (incluindo S. Typhi, S. A Paratyphi e Salmonella lactose positiva) Mauve
19 Exemplos de meios específicos Agar Batata Leveduras Agar Bismuto Sulfito Salmonella spp (centro negro, borda clara e brilho metálico) Ágar Cled Gran Positivo e Gran Negativo EMB (Eosina Azul de Metileno) Seletivo para Gran Negativo Agar Loeffler isolamento de Corynebacterium diphtheriae
20 meio de Batata-Dextrose- Ágar (BDA) ou outro meio de cultura específico. pragawall.cenargen.embrapa.br S+enteritidis+Agar+bismuto+sulfito.jpg martes 24 de marzo de 2009 microorganismosemergentes.blogspot.com agar_cled.jpg AGAR CLED gefor.4t.com E.coli_EMB_fig1.jpg Escherichia coli on EMB (Enlarged view) microbelibrary.org Loeffler1.jpg Bacilli - Loeffler's Methylene Blue microscopy-uk.org.uk
21 Exemplos de meios específicos Agar Lowestein Jensen Micobactérias Agar Sal Manitol Staphylococcus spp Agar Verde Brilhante Salmonella spp, exceto S. typhi Agar Sabouraud Dextrosado Fungos e Leveduras Agar Infusão Cérebro Coração Fastidiosos como pneumococo e meningococo, muito utilizado em hemoculturas
22 Sabouraud Liquid Medium and Sabouraud Dextrose Agar from Oxoid for the reliable cultivation and differentiation of Sabouraud Liquid MediPR jpg Mycobacterium+tuberculosis.jpg The second medium that can be used is Lowenstein Jensen... Mannitol.jpg diferentes especies de Estafilococo creciendo en agar sal manitol (MSA). pathmicro.med.sc.edu PR jpg Sabouraud Liquid Medium and Sabouraud Dextrose Agar from Oxoid for the reliable cultivation and differentiation of Sabouraud Liquid Medium and Sabouraud... oxoid.com figura9.jpg Teste de Sensibilidade aos Antimicrobianos anvisa.gov.br
23 UM B REVE INTERVALO!!!! ATÉ MAIS!!!!
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