Vírus Entéricos. Prof. Dr. João Manuel Grisi Candeias Instituto de Biociências UNESP Depto de Microbiologia e Imunologia

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1 Vírus Entéricos Prof. Dr. João Manuel Grisi Candeias Instituto de Biociências UNESP Depto de Microbiologia e Imunologia

2 Gastroenterites Virais 3/4 das diarréias de origem infecciosa. segunda doença mais comum depois das infecções do trato respiratório superior. Em países em desenvolvimento é a principal causa de morte em crianças mal nutridas

3 Vírus encontrados no trato gastrointestinal (1) A. Associados com gastroenterites Rotavirus Adenovirus Calicivirus Norovirus (antigo Vírus Norwalk) ou SRSV (Small Round Structured Viruses) Astrovirus SRV (Small Round Viruses) Coronavirus Torovirus

4 Vírus encontrados no trato gastrointestinal (2) B. Encontrado no trato gastrointestinal, mas normalmente não associados com gastroenterites Polio Coxsackie A Coxsackie B Echo Enterovirus Hepatite A Hepatite E Adenovirus 1-39 Reovirus C. Encontrado no trato gastrointestinal como agente de infecção oportunista CMV (citomegalovírus) HSV (herpes simplex) VZV (varicela-zoster) HIV

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6 Rotavirus (Courtesy of Linda Stannard, University of Cape Town, S.A.)

7 Propriedades Gerais Classificação Nidovirales Reoviridae Genoma Rotavirus (A, B e C) RNA de fita dupla segmentado

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9 Gene coding assignments and three-dimensional structure of rotavirus particles. Doublestranded RNA segments separated on polyacrylamide gel (left) code for individual proteins, which are localized in the schematic of virus particle (center) or in different protein shells of virus (right). Outer capsid proteins VP4 and VP7 are neutralization antigens, which induce neutralizing antibody; protein that makes up intermediate protein shell, VP6, is the subgroup antigen.

10 Aspectos patogênicos e clínicos Tropismo por enterócitos do intestino delgado Replicação no epitélio colunar nas células apicais das microvilosidades Duodeno e jejuno (vômito) Perda de absorção de nutrientes e consequente aumento da osmolaridade NSP4 dos Rotavirus Ca ++ com liberação de íons Cl - = entrada de íons Na + e H 2 O

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14 Aspectos Clínicos Incubação: 2 a 4 dias Sintomas vômito (>5x/dia) diarréia (>10x/dia) febre (>39ºC) desidratação dor abdominal

15 Dehydration is the primary cause of morbidity and mortality from diarrheal diseases. It can be reversed through oral rehydration therapy or, if more serious, through hospitalization and intravenous fluids. Although these therapies are effective, they are not readily available or widely used in many parts of the developing world. Credit: Dr. D. Mahalanabis, World Health Organization

16 Epidemiologia 50-80% de todos os casos de gastroenterite viral. endêmicos, mas responsáveis por surtos ocasionais. doença em todos os grupos etários, mas apenas casos severos em neonatos e crianças jovens. infecções assintomáticas comuns em adultos e crianças mais velhas. infecções sintomáticas comuns em pessoas de mais de 60 anos. >30% de mortalidade em crianças desnutridas, responsável por mais de meio milhão de mortes por ano.

17 Distribuição global estimada das mortes anuais causadas por diarréia por rotavirus

18 Epidemiologia 80% da população tem anticorpos contra os rotavirus aos 3 anos. mais frequente durante o inverno. Grupo A mais comum (90%)

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22 Diagnóstico laboratorial Fezes (10 11 vírus/g na infecção) Microscopia eletrônica Detecção do Ag ensaios de aglutinação, ELISA (genotipagem), imunofluorescência Isolamento em células Detecção de RNA RT-PCR (genotipagem) Sorologia

23 Microscopia eletrônica

24 Microscopia eletrônica

25 CV-1 cells infected with AmC-1 group C rotavirus. Indirect immunofluorescence [M. Battaglia and F. Ruggeri, unpublished].

26 Tratamento e Profilaxia Sintomático Reidratação Alteração na dieta Medidas sanitárias Vacinas recombinantes Vírus vivos atenuados

27 Rotavirus reassortant to generate oral live virus vaccine. RotaTeq is a polyvalent vaccine consisting of five human-bovine reassortants: four G serotypes (G1, G2, G3, G4) representing 80% of the G strains circulating worldwide, and one P serotype representing >75% of the P strains circulating worldwide.

28 Desenvolvimento de vacinas recombinantes e de DNA Rotavirus Vacina viva pentavalente por rearranjo da cepa bovina WC3 com proteinas de superfície viral correspondente aos rotavirus humanos sorotipos G1, G2, G3, G4, e P8 Desenvolvido por: Heaton et al J Infect Dis 92:Suppl 1:S17-S21 Produzido por: RotaTeq, Merck Testado por (fase III) :

29 Desenvolvimento de vacinas recombinantes e de DNA Rotavirus Atenuação de cepa virulenta humana G1P8. Base molecular da atenuação:??????? Desenvolvido e produzido por: GlaxoSmithKline - Rotarix Testado por (fase III) : Dennehy et al Pediatr. Infect Dis. J. 24 (6), De Vos, et al Pediatr. Infect Dis. J. 23 (Suppl. 10), S179 S182 Vesikari, et al Pediatr. Infect Dis. J. 23 (10), Protege contra G9 e provavelmente contra outros sorotipos Fase IV???? Brasil a U$7.00 a dose

30 Adenovirus (Linda Stannard, University of Cape Town, S.A.) Classificação Adenoviridae Genoma Mastadenovirus Adenovirus humano 40 e 41 DNA de fita dupla Não-envelopados ± 50 sorotipos humanos conhecidos classificados em 6 subgêneros: A - F

31 Síndromes clínicas 1. Faringite 1, 2, 3, 5, 7 2. Febre faringoconjunctival 3, 7 3. Doença respiratória dos recrutas 4, 7, 14, Pneumonia 1, 2, 3, 7 5. Conjuntivite folicular 3, 4, Ceratoconjuntivite epidêmica 8, 19, Síndrome pertussis-like 5 8. Cistite aguda hemorrágica 11, Gastroenterite infantil aguda 40, Obstrução intestinal 1, 2, Doença severa em pacientes com AIDS e imunocomprometidos 5, 34, Meningite e intussuscepção 3, 7

32 Aspectos patogênicos e clínicos Isolado de células primárias de adenóides Incubação: 3 a 10 dias Sintomas vômito e febre (mais leve que Rotavirus) diarréia (6 a 9 dias) presença de quadro respiratório (20%)

33 Epidemiologia 2 a 22% de diarréia em crianças Vírus pode ser excretado por meses. A maioria tem anticorpos contra os adenovirus entéricos por volta de 3 anos.

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36 Fezes Diagnóstico laboratorial Microscopia eletrônica Detecção do Ag ELISA Isolamento em células não eficiente (fastidiosos). Graham 293, CaCo-2 e Hep-2 Detecção de DNA PCR Perfil de restrição

37 Tratamento e Profilaxia Sintomático Reidratação Alteração na dieta Medidas sanitárias

38 Calicivirus (Source: ICTV database)

39 Propriedades Gerais Classificação Caliciviridae Norovirus Norwalk-like Small round Sapovirus Sapporo Genoma RNA fita simples + Não envelopados Resistente a phs ácidos, tratamento com solventes e cloro

40 Aspectos patogênicos e clínicos Estudos com voluntários alargamento e achatamento das vilosidades hiperplasia das células da cripta Incubação: 1 a 2 dias Sintomas Diarréia (sem muco e sangue) vômito náusea dor abdominal

41 Epidemiologia Infecta todas as faixas etárias % com Acs aos 5 anos de idade. Alta taxa de ataque em relatos de surtos em escolas, restaurantes, campos de recreação, cruzeiros e asilos. Associados com o consumo de água, frutos do mar e outros alimentos contaminados.

42 Diagnóstico laboratorial Fezes Visualização do vírus nas fezes microscopia eletrônica Detecção do vírus ELISA Amplificação do RNA RT-PCR Sorologia

43 Tratamento e Profilaxia Sintomático Medidas higiênico sanitárias Reidratação

44 Astrovirus

45 Propriedades Gerais Classificação Astroviridae Genoma Mamastrovirus Astrovirus humano RNA de fita simples+ Não-envelopados 8 tipos humanos conhecidos

46 Aspectos patogênicos e clínicos Infecção de enterócitos maduros na face apical das vilosidades e em macrófagos da lamina própria atrofia das vilosidades Incubação: 1 a 4 dias Sintomas diarréia (90%) vômito (60%) Dor abdominal Leve desidratação

47 Epidemiologia 2-10% dos casos de gastroenterites % com Acs aos 5 anos de idade. Comum haver infecções em escolas, creches, asilos e hospitais (nosocomiais). Transmissão pessoal.

48 Diagnóstico laboratorial Fezes Microscopia eletrônica (imunoeletromicroscopia) Detecção do vírus ELISA RT-PCR Sorologia

49 Tratamento e Profilaxia Sintomático Medidas higiênico sanitárias Reidratação

50 Outros vírus associados à diarréia Coronavirus Vírus de RNA com a aparência de uma coroa Nem sempre associado a gastroenterites Small Round Viruses Partículas de small virus-like particles com superfície lisa, 22-28nm de diâmetro Podem ser parvovirus, enterovirus, ou bacteriófagos cúbicos Ocasionalmente vistos nas fezes de casos endêmicos ou epidêmicos de gastroenterites

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