DAIANA STREY MARCO AURÉLIO JUSTO PEREIRA SANTOS AÇÃO DO XILITOL ADICIONADO A DENTIFRÍCIO EM CONTROLE DE CRESCIMENTO DE STREPTOCOCCUS MUTANS EM MEIO DE

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1 1 UNIVERSIDADE DO VALE DO ITAJAÍ CENTRO DE CIÊNCIAS DA SAÚDE CURSO DE ODONTOLOGIA DAIANA STREY MARCO AURÉLIO JUSTO PEREIRA SANTOS AÇÃO DO XILITOL ADICIONADO A DENTIFRÍCIO EM CONTROLE DE CRESCIMENTO DE STREPTOCOCCUS MUTANS EM MEIO DE CULTURA Itajaí (SC), 2006

2 2 DAIANA STREY MARCO AURÉLIO JUSTO PEREIRA SANTOS AÇÃO DO XILITOL ADICIONADO A DENTIFRÍCIO EM CONTROLE DE CRESCIMENTO DE STREPTOCOCCUS MUTANS EM MEIO DE CULTURA Trabalho de Conclusão de Curso apresentado como requisito parcial para obtenção de grau de cirurgião-dentista pelo Curso de Odontologia da Universidade do Vale do Itajaí. Orientador: Prof. Maria Cristina Serra de Queiroz Itajaí (SC), 2006

3 3 AGRADECIMENTOS Agradecemos primeiramente a Deus por estar presente em todos os momentos de nossa vida, iluminado e traçando nossa caminhada. Aos nossos pais Sido e Selma (Daiana), Walter e Petronilha (Marco) que nos apoiaram e acreditaram em nós, e que tanto esforço fizeram para que pudéssemos alcançar nossos objetivos. Alegrias e vitórias conseguidas sempre com eles ao nosso lado. A Sinara F. Eduardo e ao Chrystofer Rocha, pelo amor, paciência e companheirismo. A todos os professores pelo ensinamento e pelas oportunidades de aprendizado passado no decorrer do curso e da vida. Em especial agradecimento a Prof. Maria Cristina Serra de Queiroz que tanto nos auxiliou para a realização do trabalho. A Prof. Elisabete Rabaldo Bottan e o Prof. Nivaldo Murilo Diegoli do setor de apoio a pesquisa. Ao Prof. Henri Stuker que nos auxiliou na confecção dos gráficos. A Prof. Claudia Yoshime Fukushigue pelo apoio na realização do nosso trabalho. A Tatiana Bender que nos ajudou na realização dos experimentos. Ao carinho e a amizade dos colegas que tanto nos ajudaram e apoiaram na nossa jornada, nos bons e principalmente nos maus momentos. Aos funcionários que nos auxiliaram de forma direta ou indireta. A todos vocês, a nossa eterna gratidão e o nosso ultimo obrigado!

4 4 AÇÃO DO XILITOL ADICIONADO A DENTIFRÍCIO EM CONTROLE DE CRESCIMENTO DE STREPTOCOCCUS MUTANS EM MEIO DE CULTURA Daiana STREY e Marco Aurélio Justos Pereira SANTOS Orientador: Prof. Maria Cristina de QUEIROZ Data da defesa: setembro de 2006 Resumo: Existe uma forte relação entre a presença de Streptococcus mutans e o desenvolvimento de cáries dentárias. Sabe-se que o adoçante xilitol inibe o crescimento bacteriano, incluindo o Streptococcus mutans. O objetivo desse trabalho foi verificar a ação do xilitol associado a dentifrício em controle de crescimento de Streptococcus mutans em meio de cultura. Após semeadura da bactéria sobre o meio de cultura ágar-chocolate, foram realizadas as perfurações no meio, em seguida foi adicionado o dentifrício em cada orifício, sendo utilizados dois dentifrícios no experimento o controle (dentifrício com a pasta base) e o experimental (dentifrício constituído pela pasta base e acrescido de xilitol a 10%). Após 48 horas das placas em estufa, foram realizadas as leituras dos halos de inibição provocadas pelos dentifrícios com o auxilio de um paquímetro eletrônico. Avaliando-se os diâmetros dos halos de inibição, causados pelo xilitol sobre o crescimento do Streptococcus mutans, identificou-se que a média do grupo experimental (dentifrício com xilitol a 10%) foi 12,64mm e, para o grupo controle, a média foi de 12,40mm. Estes valores, quando submetidos ao teste t, em nível de significância de 6,19% indicam que há uma diferença estatística entre os grupos, favorável ao grupo experimental. De acordo com os resultados presentes neste estudo in vitro. Concluímos que o xilitol quando adicionado a dentifrício apresenta uma atividade antimicrobiana sobre o Streptococcus mutans, quando avaliado pela verificação do halo de inibição de crescimento através da técnica de difusão em ágar. Palavras-chave: cárie dental, dentifrício, meio de cultura, Streptococcus mutans, xilitol.

5 5 SUMÁRIO 1 INTRODUÇÃO REVISÃO DE LITERATURA MATERIAIS E MÉTODOS Local Normas de biossegurança Materiais utilizados Dentifrícios Microorganismo Meio de cultura Realização do experimento APRESENTAÇÃO DOS RESULTADOS DISCUSSÃO CONCLUSÃO E SUGESTÕES... 49

6 6 1 INTRODUÇÃO A cárie dental é uma desintegração dos dentes que começa na superfície e progride para o interior. Em primeiro lugar, ocorre a desmineralização do esmalte superficial, que é totalmente acelular. Esta desmineralização tem sido atribuída ao efeito dos produtos ácidos da fermentação bacteriana. A decomposição subseqüente da dentina e do cemento envolve a digestão da matriz protéica. (JAWETZ et al., 2000) A primeira etapa do processo da cárie dental consiste na formação da placa sobre a superfície lisa e dura do esmalte. A placa constitui-se, principalmente, em depósitos gelatinosos de glucanos (polímeros de carboidrato) de alto peso molecular, através dos quais as bactérias produtoras de ácido se aderem ao esmalte. Os polímeros de carboidrato são produzidos principalmente por estreptococos (Streptococcus mutans). Na segunda etapa ocorre a formação de grandes quantidades de ácido (ph<5,0), a partir de carboidratos, produzidos por estreptococos e lactobacilos presentes na placa bacteriana. O ácido em altas concentrações desmineraliza o esmalte e dá início à cárie dental. (THYLSTRUP; FEJERSKOV,1995; JAWETZ et al., 2000). Existe uma forte relação entre a presença de Streptococcus mutans e o desenvolvimento de cáries dentárias em áreas específicas do esmalte. Por esse motivo da importância, para a prevenção da cárie dental e da doença periodontal, de se realizar uma completa remoção da placa bacteriana. Para se impedir a formação da placa bacteriana, ou se promover a sua remoção, deve-se estimular a realização de uma correta higiene bucal. A efetividade da remoção

7 7 da placa bacteriana é 70% maior quando se usa dentifrício. Muito embora seu uso não seja indispensável, sua importância para garantir a limpeza e o polimento dental é comprovada. (TUMENAS, 1999). Sendo o Streptococcus mutans um dos maiores responsáveis pelo desenvolvimento da cárie dentária, deve-se fazer o uso de artifícios que interfira na ação e/ou desenvolvimento dessa bactéria. Um dos meios é o uso de dentifrícios com substâncias que combata o Streptococcus mutans. Dentre essas substâncias tem-se o xilitol. Sabe-se que o adoçante xilitol inibe o crescimento bacteriano, incluindo o Streptococcus mutans. O xilitol funciona interrompendo o ciclo glicolítico da bactéria, estagnando a produção de ATP, sendo, portanto, bactericida. (MAYER, 2001). Neste experimento será testado, in vitro, a ação deste adoçante, quando incorporado a um dentifrício. Acredita-se que, se comprovada a capacidade deste adoçante como inibidor do crescimento bacteriano, será possível a integração destas substâncias na composição do dentifrício o que favorecerá a redução da susceptibilidade à cárie dental.

8 8 2 REVISÃO DE LITERATURA Perterson et al. (1991) conduziram um estudo com o propósito de comparar o efeito preventivo à cárie dental de quatro pastas de dentes, com tipos e concentrações diferentes de flúor (F) e sorbitol e xilitol, ao longo de três anos, em estudos clínicos e microbiológicos. Um grupo de 322 crianças de 12 a 13 anos recebeu um serviço dental completo e regular por três anos com dentistas. Foi enfatizada a importância do uso regular das pastas de dentes e escovas dentais que foram fornecidas ao longo do estudo. As crianças foram distribuídas em quatro grupos experimentais. O grupo I foi tratado com uma pasta dental contendo 0,8% de monofluorfosfato de sódio (MPF), mais 3% de xilitol e 3% de sorbitol. O grupo II foi tratado com 0,03% de fluoreto de sódio (NaF) acrescido de 3% de xilitol e 6% de sorbitol. O grupo III com 0,8% de MPF e mais 9% de sorbitol. O grupo IV com 0,03% de NaF, mais 9% de sorbitol. O estudo de três anos foi completado por 284 crianças. As análises não revelaram diferença significativa quanto ao desenvolvimento da cárie dental, durante os três anos e entre os grupos. Porém, a adição de porcentagem de xilitol em pastas de dentes (3%) parece produzir um benefício clínico quando comparado com os outros grupos. No grupo com 0,8% MFP mais 3% de xilitol foi observado que houve menos cárie dental proximal em superfícies inicialmente sãs que o grupo 3 com o mesmo tipo de flúor, mas sem adição de xilitol. Esta observação aponta para um possível efeito preventivo da cárie dental, até mesmo quando utilizamos baixas concentrações de xilitol em pastas de dente. Isto indica que o xilitol quando adicionado em pastas fluoretadas, pode possuir um melhor efeito cariostático. Assim, a combinação de uma pasta de dente, com xilitol e uma

9 9 concentração baixa de flúor, pode ser benéfica; inibindo a cárie dental e evitando a fluorose dental, nos indivíduos que estão se submetendo à mineralização do esmalte. Conforme Isotupa et al. (1995), pacientes que usam aparelho ortodôntico fixo correm um risco maior de desenvolver cárie dental, pela dificuldade em efetuar higiene oral em decorrência dos muitos locais de retenção. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito de chicletes, que contêm poliol, em placa dentária com Streptococcus mutans e, conseqüentemente, o risco de cáries dentárias em pacientes tratados ortodonticamente. Este estudo foi realizado com 60 pacientes de 11 a 15 anos que usavam aparelho ortodôntico fixo. Foi solicitado aos participantes para mastigarem goma durante quatro semanas, em seis horários predeterminados. Todas as crianças receberam as mesmas instruções e treinamento para práticas de higiene oral. Quatro chicletes com poliol foram usados: uma goma contendo xilitol, outra com sorbitol e duas misturas contendo uma de xilitol e sorbitol (mistura I e II). No estudo foram consideradas duas perspectivas. Uma do ponto de vista econômico, considerando os custos industriais; pois, a goma com xilitol tem valores mais altos se comparados a gomas que contêm sorbitol ou misturas de xilitol e sorbitol. Outra se refere à necessidade de testar gomas que são saborosas para o consumidor. Os examinados foram divididos uniformemente em quatro grupos, sendo requisitado que os mesmos parassem os procedimentos de higiene oral três dias antes dos exames clínicos. As coletas de placa e avaliações clínicas foram feitas por dois ortodontistas. Nas contagens de índice de Streptococcus mutans na saliva, foi observada uma redução significante no grupo xilitol e no grupo da mistura de xilitol e sorbitol. O uso regular de goma contendo xilitol reduz o potencial acidogênico da placa dentária comparado com a goma que contém sorbitol. Os níveis de Streptococcus mutans e a incidência de cáries dentais reduziram significativamente

10 10 em crianças que usaram xilitol. O sorbitol possui algumas vantagens como: ser menos cariogênico que a sacarose e com uma fabricação mais barata que a goma com xilitol, mas devemos considerar que seu efeito não é tão efetivo quanto o xilitol em relação à redução da cárie dental. De acordo com Silva et al. (1997), a maioria das gomas é adoçada com sacarose, aumentando a carga cariogênica dos carboidratos fermentáveis já contidos na dieta. Recomenda-se a substituição da sacarose contida nas gomas de mascar por sorbitol ou xilitol, os quais são pobremente fermentados pelos microorganismos da placa. A utilização do xilitol como adoçante é capaz de inibir a formação de placa bacteriana. O uso de gomas de mascar adoçadas com sacarose aumenta os depósitos bacterianos, enquanto que a presença de sorbitol não altera o índice de placa. Foram testados três tipos de gomas de mascar, vendidas no comércio brasileiro Ping-Pong (composição química básica: açúcar, xarope de glicose e base para goma de mascar), Trident (sorbitol, manitol, goma base, resina e sacarina sódica), Xylifresh (xilitol, goma base, goma arábica, glicerina, cera de carnaúba, cera de abelha, resina vitrificada, sorbitol). Para determinar o índice de placa bacteriana, os pesquisadores adotaram o método PHP (Personal Hygiene Performance Index). O índice de placa foi avaliado após a evidenciação de placa e os valores obtidos para cada paciente foram anotados. O desenvolvimento da pesquisa ocorreu em três fases. Na primeira fase, foi obtido o índice de placa de cada paciente após sua escovação habitual, sem que nenhuma orientação sobre higiene oral fosse realizada. Posteriormente, foi realizada profilaxia, objetivando um índice de placa 0 (zero) para todos os pacientes. Para isso, foram instruídos a não fazer qualquer tipo de higiene bucal durante três dias, para

11 11 acumular placa bacteriana, espontaneamente, sobre as superfícies dos dentes. Na fase dois, foi avaliado o índice de placa e, em seguida, nova profilaxia foi feita. Os pacientes foram divididos em três grupos, um para cada tipo de goma de mascar. Nos três dias subseqüentes, não fizeram qualquer tipo de higiene bucal, mascando três gomas por dia, durante 20 minutos cada, após as principais refeições. Na terceira fase, os pesquisados retornaram para a obtenção do índice de placa e para profilaxia final. Com o objetivo de estabelecer um índice de placa 0 (zero), foram realizadas profilaxias com o auxílio de taças de borracha e pasta profilática contendo flúor, no início de cada uma das fases. Nenhuma orientação sobre alterações nos hábitos dietéticos, na técnica de escovação e no uso do fio dental foi repassada até a conclusão da pesquisa. Houve uma redução de 16,23%, 5,07% e 6,22% no índice de placa PHP após o uso das gomas Xylifresh, Ping-Pong e Trident, respectivamente, em relação aos grupos controle. Apesar de ter ocorrido uma redução no índice de placa em todos os grupos experimentais, apenas com o Xylifresh esse resultado foi estatisticamente significativo. A presença de xilitol nas gomas pode inibir a formação de placa bacteriana. O xilitol é comparável à sacarose em doçura e tem mostrado ser não cariogênico quando substitui a sacarose em alimentos e em gomas de mascar. O consumo de gomas de mascar sob o ponto de vista odontológico não apresenta justificativa científica para ser estimulada, entretanto, enquanto esse hábito estiver presente e for difícil o controle por parte do paciente, a indicação do consumo de gomas com adoçantes alternativos parece ser uma opção bastante viável. Conforme Hujoel et al. (1999), o sorbitol e misturas de xilitol/sorbitol resultam em uma redução, em longo prazo, do risco da cárie dental. Com o objetivo de avaliar o

12 12 impacto do uso do xilitol, foram acompanhadas, durante sete anos, 510 crianças com idade média de 6,1 anos. Foram constituídos 3 grupos experimentais e 1 grupo controle. No grupo 1, a goma de mascar continha 100% sorbitol; no grupo 2, a goma possuía uma mistura de sorbitol com xilitol e, no grupo 3, a goma apresentava 100% de xilitol. O grupo controle não recebeu goma. Durante o programa de intervenção de dois anos, as crianças foram examinadas em seis ocasiões diferentes. O resultado, ao longo dos dois anos e ao término deste período, indicou que a redução de risco à cárie dental foi melhor observada no grupo goma com 100% de xilitol. Cinco anos depois do término da pesquisa, as crianças foram reexaminadas. Os exames de cáries dentárias no início e cinco anos após o estudo foram efetuados pelo mesmo grupo clínico e com o mesmo protocolo. A única diferença entre os dois exames foi o tipo de dentes examinados. No início só primeiros molares foram examinados e dentes decíduos. Depois, foram examinados, apenas, dentes permanentes. Não foram registradas cáries dentárias em dentes permanentes (primeiros molares) durante os dois anos do uso da goma. No início do estudo, cerca de 70% das crianças estava na fase de dentição mista e 28,5% crianças com dentição decídua. Após o término do programa, 96,57% das crianças estavam na fase de dentição mista. Cinco anos depois do término do programa, verificou-se que os dentes que erupcionaram antes do começo da pesquisa tiveram uma incidência de cárie dental mais alta e nenhum dos três adoçantes teve um efeito a longo prazo significante. Para os dentes que erupcionaram durante o primeiro ano, também nenhum efeito significante foi encontrado, mas havia uma tendência de as gomas com xilitol e com a mistura xilitol/sorbitol serem mais efetivas. Para dentes que erupcionaram durante o segundo ano, a goma de mascar com xilitol resultou na diminuição de 93% do risco de cáries dentárias a longo prazo; goma com xilitol/sorbitol

13 13 resultou em 67% na redução e o sorbitol não teve nenhum efeito a longo prazo para este grupo. Para os dentes que erupcionaram depois do fim do estudo, o xilitol e xilitol/sorbitol resultaram em um efeito a longo prazo significante: o xilitol reduziu o risco de cárie dental em 88% e xilitol/sorbitol reduziu o risco em 64%. Portanto, a erupção dos dentes influenciou significativamente na efetividade do tratamento, no grupo de xilitol. Xilitol e misturas de xilitol/sorbitol reduziram a probabilidade de desenvolvimento da cárie dental após o uso da goma (após cinco anos). Esta redução de risco de cáries dentárias subseqüente ao uso de chiclete diário foi chamado de "efeito a longo prazo". Dentes erupcionados antes do xilitol diário, nenhum efeito a longo prazo significante estava presente. Em contraste, dentes que erupcionaram durante o segundo ano, o risco de cárie dental diminui 93%. Até mesmo dentes que erupcionaram depois do uso de xilitol tiveram uma redução do risco de cárie dental de 88%. Estes resultados indicam que os efeitos preventivos de cárie dental a longo prazo são atingidos quando o xilitol é usado, pelo menos, um ano antes da erupção dos dentes. Moss (1999) citou que o xilitol é um poliol, adoçante não cariogênico. É um produto natural encontrado em alimentos não processados. No corpo é relativamente bem aceito, porém quando o consumo é excessivo pode levar a um desarranjo intestinal. O xilitol possui vários efeitos no metabolismo de microorganismos orais: sobre o metabolismo dos microorganismos da placa dental, sobre a quantidade e a adesão da placa, sobre as contagens de Streptococcus mutans, remineralização, sobre o ph da placa dental e da saliva e no desenvolvimento da cárie dental. O xilitol foi usado por muitos anos para substituir o açúcar em gomas de mascar. Ele possui uma capacidade de adoçar comparável à da sacarose. Suas propriedades químicas permitem sua inclusão no alimento sem nenhuma modificação significativa no gosto do

14 14 alimento, ou com somente um efeito refrescante no gosto devido ao seu calor negativo de solução. O xilitol apresenta em sua fórmula uma molécula extra de hidrogênio, não causando a formação do ácido láctico. Assim, a maioria das bactérias da placa são incapazes de fermentar o xilitol em produtos ácidos cariogênicos. Na base de diversos estudos experimentais e clínicos, o xilitol é aceito universalmente como um adoçante não cariogênico (junto com diversos outros poliois). Esta indicação está baseada na observação de que o xilitol não é transformado em ácidos pela placa dental ou cultura pura de microorganismos. O xilitol foi definido como cariostático quando em diversos estudos a curto prazo reduziu a incidência de cárie dental em seres humanos e em animais. A reivindicação de que o xilitol pode ser anticariogênico foi feito também baseado em estudos clínicos e experimentais em seres humanos, onde promoveu a remineralização de lesões de cárie dental. Nas propriedades do xilitol pode-se incluir o distúrbio do metabolismo bacteriano, do crescimento ou da adesão bacteriana, além do papel de facilitar a remineralização das lesões. A inibição do crescimento das bactérias pelo xilitol dá-se porque a concentração crescente de xilitol causa uma diminuição no crescimento das bactérias. Este efeito bacteriostático é devido a sua interferência no metabolismo bacteriano. Em alguns estudos o xilitol demonstrou que, além de não ser fermentado pelas bactérias da placa dental, quando utilizado em gomas de mascar diariamente durante semanas, fez com que houvesse uma resistência maior à queda do ph da placa, mesmo na presença de sacarose. Em resumo, o xilitol pode ter um efeito inibitório na fermentação da sacarose e da glicose pela placa dental. Para Gonçalves et al. (2001), o flúor tem seu principal efeito anticárie dental sobre o esmalte, mas pode, também, ter um importante, porém sutil, efeito antimicrobiano. Os açúcares substitutos mais utilizados em produtos divulgados como

15 15 benéficos à saúde bucal, em comparação aos açúcares contendo sacarose, são sorbitol, manitol e xilitol. Os açúcares alcoólicos têm demonstrado propriedades não cariogênicas ou cariogenicidade extremamente baixa. O xilitol tem sido incorporado principalmente em gomas de mascar e dentifrícios e, recentemente, em soluções para bochecho. Estudos in vitro e in vivo têm sugerido que a associação de fluoreto e xilitol apresentam propriedades anticárie dental adicionais quando comparada à utilização do fluoreto. O objetivo deste estudo foi verificar o efeito de soluções fluoretadas contendo xilitol e sorbitol sobre o número de unidades formadoras de colônias de Streptococcus mutans na saliva de 33 indivíduos com idade entre 8 e 16 anos. Os indivíduos foram divididos aleatoriamente em quatro grupos. As soluções para bochecho utilizadas no estudo foram: solução placebo de flúor/xilitol/sorbitol; solução de fluoreto de sódio a 0,05%; solução de fluoreto de sódio a 0,05% + 2,5% xilitol + 2% sorbitol; solução de fluoreto de sódio a 0,05% + 12,5% xilitol + 2% sorbitol. Cada solução foi utilizada durante um período experimental de 28 dias. Os períodos experimentais foram intercalados por períodos de descanso de 10 dias. Ao final dos 142 dias, todos os participantes tinham sido submetidos aos quatro tratamentos. Amostras de saliva foram coletadas nos períodos anteriores e posteriores a cada etapa do estudo, totalizando oito amostras por indivíduo. A saliva pura, ou as diluições, de cada amostra foram semeadas em placas de vidro. As placas foram transferidas para jarras de anaerobiose, em atmosfera com 10% de CO 2 e incubadas a 37 o C, durante 72 horas. Após cultura, o número de unidades formadoras de colônias foi determinado com o auxílio de um microscópio estereoscópico. As soluções de fluoreto de sódio a 0,05% com 2,5% ou 12,5% de xilitol apresentaram melhores resultados em relação à diminuição do número de estreptococos do grupo mutans por milímetro de saliva quando comparadas à

16 16 solução de fluoreto de sódio a 0,05%. Esses resultados sugerem, portanto, que a associação de flúor e xilitol promovem um efeito adicional na redução do número de estreptococos do grupo mutans, embora esse efeito não apresente alterações com o aumento da concentração de xilitol. Dessa forma, a utilização de soluções para bochecho contendo xilitol deve ser levada em consideração e pode ser recomendada como coadjuvante dos procedimentos mecânicos de higiene bucal, principalmente em indivíduos com alto risco para a doença cárie dental. Mayer (2001) diz que o xilitol é pouco conhecido pela maioria dos cirurgiõesdentistas e pela população. Ele tende a substituir a sacarose de maneira bastante benéfica para a saúde bucal. Pertence ao grupo poliálcool, sendo derivado da xilose, tendo um valor calórico. Os primeiros estudos com o xilitol foram realizados na região de Turku, na Finlândia, demonstrando que o xilitol não é cariogênico. Comparado com a sacarose, o xilitol tem a mesma capacidade de poder adoçante. Parece que o xilitol não é metabolizado por nenhum microorganismo da cavidade oral, evitando a produção de ácidos que levam à queda do ph da placa, sendo não cariogênico. O xilitol possui ação antibacteriana, pois, ao entrar na célula, via sistema frutose fosfotransferase fosfoenol piruvato (frutose PTS), é acumulado como xilitol-fosfato não metabolizável na célula de Streptococcus mutans, resultando em inibição de crescimento. Ele, também, funciona interrompendo o ciclo glicolítico da bactéria, estagnando a produção de ATP, portanto, agindo como bactericida. Por isso, a ingestão de sacarose, ou outro carboidrato fermentável, após a ingestão de xilitol não leva à queda acentuada de ph da placa como sem o uso deste poliálcool. O xilitol inibe a glicosiltransferase, enzima responsável pela formação de polímeros de glicose extracelulares. A placa dental rica em glucanos insolúveis tem maior capacidade cariogênica, pois estes polímeros

17 17 dificultam o trânsito de substâncias, impedindo a difusão dos ácidos formados na interface. Estudo in situ, realizado no departamento de Microbiologia do Instituto de Ciências Biológicas da USP, demonstrou que o uso de pastilhas de xilitol inibe a formação de lesões de cárie dental e mineraliza lesões preformadas, mesmo na presença de altos níveis salivares de Streptococcus mutans e alta freqüência de ingestão de sacarose. No mercado, o xilitol pode ser encontrado na forma de pastilhas ou chicletes, sendo indicado, entre as refeições, principalmente nos indivíduos de maior risco à cárie dental. Segundo Modesto et al. (2001), quando os cirurgiões-dentistas vão orientar os pais em relação à higiene oral, uma grande questão que os profissionais se deparam é a escolha do dentifrício a ser indicado como adjuvante aos métodos mecânicos de limpeza da cavidade oral das crianças. Neste aspecto a literatura é escassa, fazendo com que o profissional opte por um produto, sem que haja comprovação científica do impacto que poderá causar na microbiota oral do bebê. Foram selecionados vinte bebês, com os dentes anteriores e os primeiros molares decíduos erupcionados, dos quais foi coletada a microbiota. Os seguintes dentifrícios infantis disponíveis comercialmente foram avaliados: - First Teeth (Laclede Professional Products Inc., Gardena CA, Estados Unidos), contendo água, glicerina, sorbitol, banana natural, maçã natural, xilitol, lactoferrina, lactoperoxidase, glicose, oxidase, pectina, propilenoglicol e aloe-vera; - Tandy (Kolynos, São Paulo SP, Brasil), contendo água, sílica, lauril sulfato de sódio, carboximetilcelulose, sorbitol, sacarina, fluoreto de sódio, (1.100ppm), prolietilnoglicol, composição aromática e corante; - Calendula Kinder- Zahncreme (Weleda S.A Boulogne Argentina), contendo água, sílica hidratada,

18 18 sorbitol, xilitol, extrato de calêndula, (Calendula officialis), alginato, esculina e fragrância. Dos dentifrícios investigados, apenas, o Tandy apresentou efeito significativo sobre a microbiota avaliada. Conforme Peldyak e Mäkinen (2002), com o intuito de prevenir o aparecimento de cárie dental aconselha-se substituir o açúcar, podendo-se usar um adoçante como o xilitol. O xilitol é um carboidrato cristalizado doce e o seu nome é derivado da palavra xilose (açúcar da madeira). Seu valor calórico é de aproximadamente 4 kcal/g. Vários estudos realizados por equipes independentes, trabalhando com diferentes populações de crianças e adolescentes, mostraram conclusivamente que o consumo de uma dieta com xilitol (mastigando goma ou doce) reduz a incidência de cárie dental significantemente. Um estudo exploratório em Dayton, Ohio, indicou que é vantajoso oferecer xilitol a pacientes geriátricos, pois, ele parece ser mais eficiente em prevenir cáries dentárias na superfície de raiz. A aderência bacteriana é uma condição prévia de cáries dentárias; o xilitol mostra uma inibição específica efetuada com o Streptococcus mutans, por conseguinte, reduz sua ocorrência e aderência na cavidade oral, especialmente na superfície do dente. As melhores aplicações orais desse adoçante estão em produtos que utilizam a mastigação ou chupando o produto. O chiclete é considerado um sistema de liberação ideal para o xilitol. Recentes tentativas de adoçar goma de mascar com xilitol em concentrações altas produziram os melhores resultados, talvez porque são liberadas altas concentrações de xilitol. O tablete pode ser feito com uma porcentagem alta de xilitol, permitindo mantê-lo em contato com o dente. Produtos de higiene oral podem ser adicionados com xilitol como, por exemplo, pasta de dentes de fluoreto. Sugere-se utilizá-lo por 4 minutos, cerca de 2 g por dia. Foram obtidos resultados impressionantes em tentativas que usavam dois pedaços de goma, cinco

19 19 vezes por cada dia, com um uso diário de xilitol de aproximadamente 10g. Sua freqüência de uso é mais importante que a quantidade. Embora sejam recomendadas cinco vezes diariamente, três vezes são consideradas um mínimo para prevenção efetiva de cáries dentárias. O momento ideal para começar o uso do xilitol é pelo menos um ano antes da erupção de dentes permanentes; estes dentes serão, provavelmente, bem mineralizados e serão mantidos em proteção por um tempo duradouro. Em adultos, pode ser recomendado o uso do xilitol em procedimentos de profilaxia oral, podendo ajudar a manter a supressão de bactérias patogênicas. Deveria ser usado imediatamente depois de toda refeição ou lanche e também deveria ser encorajado para uso entre refeições. Os pacientes de alto risco como os portadores de prótese, aparelho ortodôntico, com dificuldade motora, idosos, doentes, com problemas periodontais etc, poderiam se beneficiar usando xilitol mais freqüentemente. A remoção mecânica da placa (com escova e fio dental), flúor e xilitol são recomendados habitualmente para todos os pacientes, ele é um estimulante de saliva proporcionando alívio de xerostomia. Com seu uso diário há uma troca na microbiota bacteriana podendo haver tolerância, esta é uma mudança favorável porque bactérias "xilitol resistentes" tendem a ser menos danosas. Embora seja pouco usado o xilitol é compatível e é recomendo para a higiene oral. Lima e Berlinck (2003) afirmam que um dos açúcares mais pesquisados ultimamente é o xilitol, que é um açúcar alcoólico com o mesmo poder adoçante da sacarose, porém, com a capacidade de evitar ou até reverter cáries dentárias, além de apresentar outras propriedades benéficas. O xilitol é uma opção adequada para substituir a sacarose, já que possui o mesmo poder de doçura, apresenta 33% a menos de calorias e, principalmente, não produz cáries dentárias e pode reverter lesões

20 20 iniciais. O xilitol é um composto do grupo dos polióis, ou seja, um álcool, que apresenta um grupo hidroxila em cada átomo de carbono de sua molécula. Sua fórmula química é C 5 H 12 O 5 e pode ser encontrada em líquens, fungos, alga e vegetais, e também como um intermediário do metabolismo de carboidratos em animais, inclusive no homem. O descobrimento do xilitol deve-se a Emil Fischer (alemão, ) e Gabriel Bertrand (francês, ) que o fizeram na forma de xarope em 1891, a partir da reação da xilose (açúcar obtido da madeira) com amálgama sódica (liga de mercúrio de sódio). Uma das vantagens do xilitol é não ser fermentado por diversos microorganismos (incluindo o Streptococcus mutans). Em relação à microbiota bucal, ele possui uma propriedade cariostática, impossibilitando a proliferação das bactérias. Como não é metabolizado pela microbiota, impede a produção dos ácidos responsáveis pela agressão ao esmalte dental que leva à doença cárie dental. Além disso, ele também pode ser classificado como anticariogênico, pois possui a capacidade de estimular a produção de saliva, que possui capacidade de tamponamento (manutenção do ph), o que, juntamente com o aumento na concentração de íons de cálcio e fosfato, induz à remineralização, revertendo lesões de cáries dentárias recém-formadas. Os efeitos cariostático e anticariogênico vêm impulsionando o uso do composto em cremes dentais, anti-sépticos bucais, pastilhas, gomas de mascar e outros produtos para fins de controle e prevenção de cáries dentárias. O seu metabolismo ocorre principalmente no fígado, onde, dependendo da necessidade, de 20% a 80% do total consumido pode ser transformado em glicose. Como sua absorção é lenta, também pode ser metabolizado indiretamente pelos microorganismos presentes no intestino grosso. Geralmente, ele é bem tolerado pelo organismo humano em doses elevadas (acima de 200g/diária), embora em alguns casos tenha efeito laxativo. Atualmente, o xilitol vem sendo utilizado

21 21 em produtos alimentícios, farmacêuticos e em produtos de saúde oral em mais de 35 países. Maia (2004) diz que o xilitol é um álcool-açúcar de cinco carbonos (pentitol), facilmente solúvel em água, possuindo o mesmo poder adoçante de sacarose (1.0), assim como também, um conteúdo energético semelhante (4kcal/g). O xilitol é um adoçante natural não cariogênico, sendo quase duas vezes mais doce do que o sorbitol e o manitol, encontrado como um componente normal em várias frutas, como morango, uva e ameixa e em vegetais como couve-flor, alface, cebola e cenoura. O xilitol também é um intermediário normal do metabolismo humano, formando uma ponte entre as vias do ácido glicurônico e o pentose-fosfato. A produção endógena de xilitol pelo organismo humano é da ordem de 5 a 15 gramas por dia (independentemente do seu consumo direto). Por outro lado, a capacidade de metabolização do xilitol pelo homem é de 500 gramas ou mais por dia, considerando-se uma pessoa pesando 70 quilos. Como a distribuição e o metabolismo do xilitol no organismo não dependem da insulina ele pode ser usado por diabéticos. Vale acrescentar que esse álcool-açúcar é bem utilizado caloricamente e possui ainda, efeito anticetônico. Também é recomendado para infusões pós-operatórias em pessoas com outros transtornos no metabolismo dos glicídios. Muitos estudos mostraram que a maioria dos estreptococos orais (inclusive os Estreptococos Grupo Mutans EGM) e outros microorganismos da microbiota da placa não fermentam o xilitol. Contrastando com o sorbitol (ingrediente comum em diversos produtos, notadamente em dentifrícios), o xilitol exerce um efeito bacteriostático sobre os EGM. Acredita-se que os efeitos inibitórios do xilitol decorram da sua acumulação no citoplasma microbiano sob forma de xilitol 5-fosfato, um composto intermediário do metabolismo dos microorganismos, caracterizando o que se conhece como "ciclo-fútil",

22 22 já que as bactérias gastam energia (que é crítica para elas) e não aproveitam metabolicamente os subprodutos. Estudos utilizando imagens ultra-estruturais de Streptococcus mutans e Streptococcus sobrinus (duas das espécies que compõe os EGM) mostraram que a assimilação de xilitol pelos microorganismos e o acúmulo de xilitol 5-fosfato resultam em degradação da célula bacteriana, com formação de vacúolos endoplasmáticos. A característica não acidogênica do xilitol na placa dental é provavelmente um dos mecanismos mais importantes relacionados com a sua não cariogenicidade, quando o composto é empregado em goma de mascar e em produtos de higiene oral, como dentifrícios e enxaguatórios. Sendo usado freqüentemente e por períodos prolongados, o xilitol altera o metabolismo da placa, resultando em menor acúmulo de ácido, mesmo que haja o consumo concomitante de sacarose. Acredita-se que essa "proteção ecológica" contra a ocorrência de lesões cariosas decorra das alterações operadas no ecossistema dos biofilmes, inclusive na redução da produção e espessura das placas. Diversos estudos, incluindo-se alguns de longa duração, demonstraram que há uma redução na população de EGM entre os consumidores regulares de xilitol. Pesquisas mostram que o consumo habitual de gomas de mascar com xilitol, por mães durante 18 meses, reduzem o risco de transmissão da sua microbiota cariogênica para os filhos, aparentemente afetando a capacidade de colonização dos EGM e configurando uma situação de "prevenção primária verdadeira". Diversas pesquisas para aferir os efeitos adicionais do xilitol quando incorporado aos dentifrícios têm sido conduzidas. Alguns destes estudos demonstraram que o xilitol tem um efeito terapêutico aditivo ao do flúor em certos fatores relacionados com a atividade cariogênica, como o nível e a duração da queda do ph na placa e a curva de crescimento das bactérias.

23 23 Kandelman e Gagnon (2004) demonstraram, através de um grupo experimental com escolares do ensino médio básico de baixa renda e com elevados índices de cárie dental, que, com a utilização de goma de mascar contendo xilitol, reduziu-se em 62% a incidência de cárie dental. Os participantes foram distribuídos em três grupos. Um grupo recebeu goma de mascar contendo xilitol a 15%, todos os dias, três vezes ao dia mascando-a por um período de cinco minutos. Outro grupo experimental recebeu goma de mascar contendo xilitol a 50%. O terceiro grupo de crianças serviu como controle, não recebendo nenhuma das duas gomas de mascar. Houve também um significativo aumento na reversão da cárie dental (remineralização) que pode estar associado ao uso do xilitol. O presente estudo demonstrou existir uma redução na incidência de cárie dental, com uso adicional de gomas contendo xilitol. Segundo Pacheco (2004), a cárie dental é uma doença crônica, degenerativa, pois causa uma deformação no dente que ataca e, o mais importante, dependente de açúcar. É uma doença multifatorial, pois precisa de um tecido duro (o dente), de uma bactéria e de um substrato, o açúcar. A cárie dental se inicia a partir da colonização bacteriana do Streptococcus mutans. Esta bactéria faz parte da microbiota normal da cavidade bucal, onde vive em número inferior a 1%. No entanto, elas podem se tornar bactérias indígenas (superior a 1 %) e passarem a fazer parte da microbiota bucal. Tudo que necessitam é de um substrato para se multiplicar e se fixar. Assim, as bactérias suplementares passam a ser indígenas quando aumentam de número e competem com as outras bactérias, passando a ser dominantes na microbiota. O aumento da quantidade de bactérias, por si só, não é suficiente para que se inicie a infecção. É necessário que as bactérias se fixem na superfície do esmalte dentário. Elas vão se fixar a partir do substrato, o açúcar. O organismo defende-se e dificulta a

24 24 instalação da microbiota cariogênica, mas a presença contínua da sacarose faz com que os Streptococcus mutans se fixem na superfície do esmalte dentário. Com a sacarose, os Streptococcus mutans formam os PEC (Polissacarídeos Extracelulares). Dois desses PECs são a dextrana (polímero alpha 1-6 glicose) e a mutana (alpha 1-3 glicose), que agem como se fossem uma cola, fazendo com que os Streptococcus mutans se fixem a qualquer superfície sólida. A quantidade dessas bactérias e sua fixação nos dentes é que vão determinar se vai haver cárie dental ou não. Assim temos os três elementos, a cavidade bucal (com os dentes), a bactéria e o açúcar. O Xylitol Information Bureau (2004) destacou que o xilitol é um adoçante natural, encontrado em plantas, frutas como uva, morango e em vegetais como alface, cebola e cenoura. É também produzido em pequena quantidade pelo corpo humano (5 a 15 g/dia). É tão doce quanto o açúcar, pois possui a mesma capacidade adoçante, sem provocar cáries dentárias. É produzido industrialmente a partir de fontes celulósicas como casca de árvores entre outros, obtendo-se como resultado um produto idêntico ao açúcar. O xilitol trabalha inibindo o crescimento de bactérias nocivas, isso o torna valioso como parte integrante de um programa de higiene oral. O xilitol é o único entre os demais adoçantes substitutos do açúcar que realmente inibe sozinho o crescimento de Streptococcus mutans, com isto reduzindo a susceptibilidade à cárie dental. Além disso, o uso contínuo de xilitol ajudará a seleção de formas menos virulentas e resultará em uma microbiota oral menos agressiva. A capacidade do xilitol em reduzir a incidência de cárie dentária já foi demonstrada amplamente em numerosos campos de estudo. Estes estudos utilizaram produtos com xilitol em diversas formas como: confeitos, chicletes ou pastas de dentes. Os usuários possuíam diferentes faixas etárias assim como experiências variadas com relação ao aparecimento de cáries dentárias.

25 25 Em todos os casos foi observada a mesma tendência demonstrando que o xilitol reduz significativamente a incidência de cárie dental quando comparado ao grupo-controle que não recebeu xilitol. O xilitol estimula a remineralização e ajuda a reduzir o aparecimento de cáries dentárias. Comprovou-se também que ele é realmente capaz de reverter os estágios iniciais desta mesma lesão. A formação de ácidos que acontece após cada refeição ou lanche, aumenta sobremaneira o risco do desenvolvimento de cáries dentárias. O sabor agradável do xilitol estimula a produção de saliva, que contribui para o aumento do ph da placa e a neutralização dos ácidos produzidos por outros carboidratos fermentáveis que tenham sido ingeridos. O aumento do fluxo salivar tem outras vantagens, pois a saliva contém alguns minerais, em particular cálcio e fosfato, que promovem a remineralização das primeiras lesões de cárie dental. Outra característica é a de que o xilitol reduz a quantidade de placa diminuindo a concentração de Streptococcus mutans e promove um balanço reduzindo a proporção de polissacarídeos insolúveis e aumentando a dos solúveis. Como resultado, ocorre uma placa menos aderente, de fácil remoção pela escovação habitual dos dentes. Na higiene diária o flúor inibe a desmineralização da superfície do dente e promove uma intensidade da remineralização. Estudos mostraram que a remineralização proveniente do xilitol possui magnitude semelhante à conferida pelo flúor, embora sob mecanismo de ação diferente. A combinação xilitol e flúor confere benefícios cumulativos. Por exemplo, a inclusão de xilitol em creme dental com flúor, após 3 anos de uso, resultou em 12% de redução de aparecimento de cáries dentárias comparado com o uso de um creme dental somente com flúor. Baseado em evidências clínicas, é recomendável o uso do xilitol em pacientes de todas as idades. Outra propriedade do xilitol é possuir um "calor de dissolução" negativo o que significa que absorve calor, resultando em um

26 26 efeito gelado, refrescante que é especialmente realçado em sabores de menta. É absolutamente adequado para consumo por pessoas diabéticas já que seu metabolismo é independente da insulina. Novos grupos incluem: pessoas com baixa produção de saliva, aquelas que desejam parar de fumar e que são tentadas a consumirem doces e balas como terapia de substituição do cigarro e também por quem está preocupado com o controle de peso. Assim como todos os outros adoçantes, o xilitol pode provocar um efeito laxativo leve quando consumido acima de 25g / dia. Bastos et al. (2005) concluíram que a cárie dental é uma doença infectocontagiosa de origem multifatorial, que requer a interferência em um, ou mais, de seus fatores etiólogicos para sua prevenção. Com isso, a utilização do xilitol é destacada. O xilitol pode ser encontrado naturalmente em algumas frutas e vegetais, podendo também ser produzido industrialmente. Atualmente, está disponível em várias fórmulas tais como: em chicletes, balas, dentifrícios, no leite e também pode ser associado ao uso de fluoretos. A utilização do xilitol em chicletes permite um aumento no fluxo salivar, levando a um aumento na capacidade tampão da saliva, elevando mais rapidamente o ph salivar, conseqüentemente fazendo com que o processo de des/remineralização seja mais favorável. Os estudos na literatura indicam possíveis propriedades anticariogênicas e cariostáticas do xilitol, causando grande interesse para ser utilizados em dentifrícios de forma preventiva à doença cárie dental. A intenção deste estudo foi descrever, por meio de uma revisão de literatura especializada, como o xilitol pode ser usado como um agente anticariogênico, demonstrando suas propriedades e mecanismos possíveis de ação na prevenção e no controle da cárie dental. Suas propriedades anticariogênicas estão relacionadas à redução da adesão da placa, à remineralização de lesões cariosas incipientes e à redução específica de Streptococcus

27 27 mutans. Os estudos que usaram o xilitol em gomas de mascar revelaram uma redução de 40% de placa dental, comparada ao outro grupo que usava gomas de mascar que continha açúcar. Quando utilizadas entre as refeições, as gomas de mascar podem estimular as defesas naturais do organismo, que diminuem a prevalência da cárie dental. Além de diminuir a velocidade da progressão das lesões de cárie dental, ele também reduz a quantidade de bactérias cariogênicas, protegendo contra cárie dental e doença periodontal. A utilização do xilitol também foi investigada acrescentando-o em dentifrícios contendo NaF/sílica, que juntos produziram um aumento significativo na proteção anticárie dental quando comparados a dentifrícios similares sem xilitol. Isto pode ser atribuído à capacidade de remineralização das superfícies de esmalte humano. Quanto à utilização do xilitol associado a soluções, com ou sem fluoreto, estudos demostraram que o xilitol isoladamente não reduzia o nível de desmineralização, contudo, foi verificada esta redução quando ele estava associado ao flúor. A utilização de substâncias que evitem a formação e a adesão de placa à estrutura dental é de grande importância para a manutenção da saúde oral. Dentro deste contexto, o xilitol tem um papel importante por causa das seguintes propriedades: não ser fermentado pelas bactérias cariogênicas, por sua capacidade de estimular determinadas defesas naturais (saliva), por levar a uma redução do número de bactérias e na sua aderência, ser um agente cariostático e anticariogênico. O xilitol, em alguns estudos, demonstrou um efeito na redução nos níveis do Streptococcus mutans. A redução na quantidade de Streptococcus mutans e de Lactobacillus ocorre com a utilização isolada do xilitol ou na associação com clorexidina. Sendo o flúor um agente reconhecido para prevenção da cárie dental, diversos estudos foram conduzidos para compará-lo ao uso do xilitol nos dentifrícios, os quais demonstraram mecanismos

28 28 cariostáticos desde que tenham uma concentração disponível de fluoreto. O uso por 3 anos de dentifrício contendo flúor e o xilitol reduziu o número de novas superfícies restauradas, indicando ser melhor que o uso isolado de flúor. Quando utilizados bochechos contendo xilitol, foi verificada uma redução menor no ph salivar, porém, outros estudos demonstraram que o xilitol não podia reduzir o nível de desmineralização dental. A utilização do xilitol em serviços públicos é problemática, pois uma de suas desvantagens é ter um custo elevado. Entretanto, conclui-se que isto pode ser superado pelos benefícios que preventivamente fornece à saúde bucal, reduzindo as despesas com procedimentos terapêuticos. Devemos observar que o xilitol também apresenta um efeito colateral gastrointestinal, causado pela ingestão de doses acima de 20g, podendo induzir à diarréia. De acordo com Trindade (2005) um grande número de substitutos do açúcar refinado (sacarose) tem sido testado e utilizado na tentativa de prevenção de cárie dentária, sendo o xilitol reconhecido como o mais promissor entre eles. O xilitol é um álcool-açúcar, considerado agente preventivo. O xilitol não é fermentado à ácidos por praticamente nenhum dos microorganismos orais, incluindo bactérias cariogênicas como o Streptococcus mutans e Streptococcus sobrinus, não provocando queda do ph do biofilme dental, facilita o retorno do ph para valores próximos ao neutro, favorece o tampão salivar por alterar a composição do fosfato no meio bucal, além de induzir o aumento do fluxo salivar pelo ato mastigação e estimulo gustativo, definindo seu efeito cariostático. A substituição total ou parcial do açúcar pelo xilitol na dieta resulta numa considerável redução na incidência de cárie dental. O propósito do estudo foi verificar se há ocorrência na diminuição dos níveis salivares e Streptococcus mutans em indivíduos após a utilização freqüente e regular, mas por curto período de tempo (30

29 29 dias), de gomas de mascar contendo pequena concentração de xilitol (15%). Averiguar se os valores obtidos com a utilização do xilitol se mantêm depois de 30 dias após a suspensão do uso do produto. Verificar a similaridade genotípica de Streptococcus mutans no mesmo indivíduo nos três diferentes momentos do estudo: antes do experimento, 30 dias após o uso do xilitol e 30 dias após a suspensão da utilização do adoçante e por fim constatar se houve ocorrência in vivo de cepas de Streptococcus mutans. Foram selecionados 14 adultos voluntários com níveis salivares de Streptococcus mutans maiores ou iguais a 10 5 UFC/mL, com dentição completa, sem doença periodontal, ausência de cáries dentárias e restaurações de provisórias ou de má qualidade 2 deles foram despensados por estarem em tratamento com antibióticos, ficando 12 voluntários. Para a determinação dos níveis salivares de Streptococcus mutans foi utilizado o teste da espátula. Os voluntários foram instruído que não utilizassem nenhum anti-sépticos orais no período longitudinal (60 dias) e nenhuma orientação sobre higiene oral foi dada. Na fase experimental os voluntários foram submetidos ao uso de goma de mascar Happydent, contendo 15% de xilitol, por um período de 5 minutos, 5 vezes ao dia, durante 30 dias interruptamente. A coleta da saliva foi realizada em três momentos distintos: um dia antes do inicio da fase experimental, imediatamente após a fase experimental (30 dias a partir do inicio do uso do xilitol) e 30 dias após a interrupção do uso do xilitol (60 dias a partir do inicio do período experimental). Para a coleta da saliva os voluntários foram orientados a não realizarem higiene oral por pelo menos 2 horas antes do procedimento, após houve a coleta da saliva. Dos 12 voluntários 10 apresentaram acentuada redução dos níveis salivares de Streptococcus mutans em relação aos níveis atuais, e nos outros 2

30 30 voluntários ocorreram valores maiores ou iguais aos iniciais. Os resultados dos níveis salivares nas 3 coletas revelaram que ocorreu uma diminuição nos valores médios de Streptococcus mutans observados no inicio do experimento, comparando-os com os valores após o uso do xilitol, sendo esta redução estatisticamente significante. Entretanto 30 dias após a interrupção do uso do xilitol, embora as médias dos valores de Streptococcus mutans para alguns indivíduos ainda continuasse menor quando comparadas aos valores iniciais, esta redução não mostrou significância estatística. Nas outras analises foram identificados 17 genótipos distintos de Streptococcus mutans nas amostras salivares de 10 voluntários, que completaram as 3 etapas do estudo, pela técnica de RAPD-PCR, com o iniciador OPA-2. O ensaio de tolerância de Streptococcus mutans ao xilitol in vitro, em meio BHI e BHI /xilitol 1%, permitiu a identificação de 12 amostras X R entre 124 amostras estudadas, representantes dos 17 genótipos distintos. Amostras de Streptococcus mutans (X R) foram identificadas nas 3 coletas, inclusive antes do consumo da goma. Foram identificadas amostras X R e X S com o mesmo genótipo por RAPD-PCR. A prevalência de amostras X R não apresentou relação direta com o uso de xilitol ou com os tipos genotípicos. A freqüência e a intensidade do uso do xilitol é um fator importante, como o efeito parece estar ligado à dose, consumos mais intensos e freqüentes apresentam resultados mais satisfatórios. A pouca duração do efeito sobre a redução dos níveis salivares de Streptococcus mutans obtida, pode ser explicada pela pequena concentração de xilitol contida no produto e/ou pelo curto período de consumo. Possivelmente concentrações maiores de xilitol ou períodos de administração mais prolongados poderiam alterar a duração do efeito, já que este é dose-dependente. O efeito na redução de Streptococcus mutans não deve ser somente atribuído ao efeito bioquímico do xilitol sobre a bactéria, uma vez que o