Evolução (Evo-Devo) Ambiente e Especiação (ECO-Devo) 1. De onde as células vêm? PARA ONDE vão?

Transcrição

1 Evolução (Evo-Devo) que vão Ambiente e Especiação (ECO-Devo) 1. De onde os seres vêm? Aristótele ( A.C) que vão (The Embryological Origins of the Gene Theory, Scott Gilbert) (1672) 1

2 Xenopus laevis CLIVAGEM EM VERTEBRADOS Radial (ANFÍBIOS) Meroblástico Discoidal (RÉPTEIS, PEIXES, AVES) Rotacional (MAMÍFEROS) * Fonte: censurada Fertilização 4 h Blástula Gástrula Neurula Girino Cortesia de Curtis Altmann Vade Mecum 2 Tyler e Kozlowski 2

3 Vade Mecum 2 Tyler e Kozlowski Vade Mecum Tyler e Kozlowski Zebrafish= Danio rerio= paulistinha Estágios Nieuwkoop- Faber (NF) CLIVAGEM EM VERTEBRADOS Clivagem do embrião de Danio rerio Radial (ANFÍBIOS) Meroblástico Discoidal (RÉPTEIS, PEIXES, AVES) Rotacional (MAMÍFEROS) * Rolf Karlstrom and Don Kane; Development 123:461,

4 Vade Mecum 2 Tyler e Kozlowski Epibolia Somitos Gallus gallus CLIVAGEM EM VERTEBRADOS Radial (ANFÍBIOS) Meroblástico Discoidal (RÉPTEIS, PEIXES, AVES) Rotacional (MAMÍFEROS) * AP- Área Pelúcida AO- Área Opaca 4

5 Estágios Hamburger-Hamilton (HH) 5

6 Mus musculus CLIVAGEM EM VERTEBRADOS Radial (ANFÍBIOS) Meroblástico Discoidal (RÉPTEIS, PEIXES, AVES) Rotacional (MAMÍFEROS) * d.p.c=dias pós-coito Entwicklungsmechanik (Mecanismos de Desenvolvimento) 1. Fertilização 2. Clivagem = aumento de número de células 3. Movimentos morfogenéticos = definição da forma 4. Organogênese=Diferenciação celular= Identidade tecidual 5. Crescimento= definição do tamanho que vão 6

7 que vão A marcação colorida permite acompanhar para onde as células vão. Mapa do Destino Imunohistoquímica Hibridação in situ RT-PCR Microarray Imunohistoquímica 7

8 Transplantação Ablação que vão Transplantação: troca de microambiente/mudança de contexto que vão O núcleo somático contém todas as informações necessárias para gerar um organismo novo AHA! A potencialidade nuclear não é mantida durante o desenvolvimento! Sir John Gurdon 1962? 8

9 SUPERexpressão SUBexpressão que vão SUPERexpressão Fatores candidatos Genes provenientes de bibliotecas de cdna Genes homólogos em outros vertebrados Mutantes t dominantes ativos/negativos uper Expressão Gênica!!!! Microinjeção de RNA Eletroporação Infecção Transgênese Eletroporação Microinjeção de RNA 9

10 Transgênicos por integração no prónucleo SUPERexpressão SUBexpressão RNA antisenso RNAi Knockout DNA RNA antisenso inibe a tradução RNAi 1. RNA dupla fita (dsrna) reconhecido pelo complexo enzimático DICER RNA mensageiro RNA antisenso Inibição da Tradução 2. Clivagem do dsrna em sirna (silencing RNA) 3. sirna utilizado como molde pelo complexo RISC para reconhecimetdo do RNA-alvo a ser clivado A Ontogenia recapitula a Filogenia (Ernst Haeckel, 1891) Evolução (Evo-Devo) Ambiente e Especiação (ECO-Devo) 10

11 Existe uma homologia de sinalização que gera homologia anatômica Drosophila m. ULTRABITHORAX Gallus g. Com Tbx5 ectópico A Biologia do Desenvolvimento explica os bicos dos tentilhões de Galápagos 11