BOVINE SPONGIFORM ENCEPHALO PATHY
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- Therezinha Almeida Araújo
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1 BOVINE SPONGIFORM ENCEPHALO PATHY BSE MAD COW DISEASE DOENÇA DA VACA LOUCA ENCEFALOPATIA ESPONGIFORME BOVINA Agente sem ácido nucléico Proteína infecciosa Constituinte do hospedeiro Não induz resposta de anticorpos Resistência elevadíssima Prof.Dr. Leonardo J. Richtzenhain VPS/FMVZ/USP Daniel Carleton Gajdusek Nobel de Medicina 1976 ENCEFALOPATIAS ESPONGIFORMES TRANSMISSÍVEIS Geral Kuru Papua Nova Guiné 1957 Período de incubação prolongado (meses/anos) Doença neurológica debilitante sempre fatal Microscopia eletrônica extratos de cérebro tratado com detergente SAF scrapie associated fibrils Mulheres e crianças 8 x mais comum que nos homens Alterações patológicas restringem-se ao SNC incluindo vacuolização e astrocitose O agente transmissível não induz resposta imune detectável no hospedeiro
2 ENCEFALOPATIAS TRANSMISSÍVEIS HUMANAS (Prusiner,1995) ENCEFALOPATIAS TRANSMISSÍVEIS ANIMAIS (Prusiner,1995) AQUISIÇÃO DISTRIB. Duração Doença KURU (CJ) CREUTZFELDT- JAKOB GERSTMANN- STRÄUSSIER- SCHEINKER CANIBALISMO? (ESPORÁDICA) 10-15% HERED. MUT. PrP? Raramente IATROGÊNICA HERED. MUT. PrP PAPUA N.GUINÉ FIM 1958 ESPORÁD. 1/ FAMÍLIAS IDENT. 80 CASOS IDENTIFICADOS 50 FAMÍLIAS IDENTIFICADAS FREQ. 1 ANO VARIANDO DE 1 MES A 10 ANOS TIPICAM. 1-2 MESES SCRAPIE DAS OVELHAS DOENÇA CRÔNICA DEBILITANTE DOS ALCES E VEADOS INSÔNIA FAMILIAR FATAL HERED. MUT. PrP 9 FAMILIAS IDENTIFICADAS TIPICAM. 1 ANO Scrapie 1700 Chronic Wasting Disease BSE UK 1986 Grande importância econômica e social BSE UK 1986 Creutzfeldt-Jacob Variante
3 Descrita 1a vez na Grã Bretanha em1986 Mais de casos descritos Embora já tenha sido descrita em gado nativo Bélgica Dinamarca França Irlanda Irlanda do Norte Luxemburgo Liechtenstein Holanda Portugal Suiça 95% de todos os casos Grã Bretanha 'Mad cow' disease found in California dairy cow 14/04/2012 Number of cases of bovine spongiform encephalopathy (BSE) reported in the United Kingdom SINAIS CLÍNICOS EM BOVINOS Alterações de comportamento: nervosismo, agressividade, postura anormal incoordenação, dific. levantar Queda na produção de leite e carne embora apetite mantido. Não há tratamento: letalidade 100% Período de incubação : 2 a 8 anos Curso da Doença: 2 semanas a 6 meses Updated: Total Great Isle of Northern Year Alderney Guernsey Jersey United Britain Man2 Ireland Kingdom 1987 and before (4) (4) , ,202 (5) Maioria dos bovinos acometidos na Grã Bretanha: leiteiros 3 a 6 anos de idade ENCEFALOPATIAS ESPONGIFORMES TRANSMISSÍVEIS LESÕES DEGENERATIVAS DO S.N.C. VACÚOLOS APARÊNCIA ESPONJOSA NO HISTOPATOLÓGICO (ESPONGIOSE)? Fig. 1 A, B, C Spongiform change is characterised by diffuse or focally clustered small round or oval vacuoles in the neuropil. A spectrum of intensity may be observed, ranging from no change (A) to slight or moderate (B) to severe changes (C). Hematoxylin and eosin stain. H. Budka 2000
4 Fig. 3 Variant CJD (vcjd) with prominent "florid" plaques (fibrillary amyloid plaques surrounded by spongiform vacuoles) well visible already in this hematoxylin and eosin stain. Paraffin block given by courtesy of Dr. J. W. Ironside, Edinburgh. H. Budka 2000 Stanley Prusiner Nobel de Medicina 1997 ETIOLOGIA PRIONS Proteinaceous infectious particles PRIONS DNA RNA? PROTEÍNA (INFECCIOSA) EUCARIOTOS E PROCARIOTOS VIRUS TR DNA RNAm PROTEINA DNA RNAm PROTEINA RNA PROTEINA RNA RNAm PROTEINA RNA DNA RNAm PROTEINA
5 PRIONS TERMINOLOGIA PROPOSTA POR STANLEY PRUSINER (PRONUNCIA-SE PRION, INGLÊS= PREEON ) Proteinaceous infectious particles PrPn PrPs MUTAÇÃO MODIFICAÇÃO DA PrP NORMAL PrP PrPs + INFECÇÃO Menor solubilidade / Maior resist. proteólise PRO PROF. DR. LEONARDO J. RICHTZENHAIN VPS/FMVZ/USP PRO PROF. DR. LEONARDO J. RICHTZENHAIN VPS/FMVZ/USP APARECIMENTO GRÃ BRETANHA: MODIFICAÇÕES PROCESSO PRODUÇÃO DE FARINHA DE OSSO E CARNE CALOR (MENOR 134 o C POR 18 min. DIMINUIÇÃO DE SOLVENTES DE GORDURA EVIDÊNCIAS CRONOLÓGICAS (época das modificações do processode produção) GEOGRÁFICAS (fábricas que mantiveram processo de produção
6 CAUSAS APARECIMENTO BSE Isle of Man FÁBRICAS FARINHAS DE OSSO FARINHA DE CARNE MUDANÇAS TEMPERATURA 134 C / 18 MIN REDUÇÃO DE SOLVENTES CAUSAS APARECIMENTO BSE Resistência dos prions Ovino - Scrapie!!!!!!! BSE Farinha Carne e Osso A BARREIRA DE ESPÉCIES PrP s OVELHA PrP n CAMUND. PrP s CAMUND. DIFÍCIL CAMUNDONGO RARAMENTE ADOECE BARREIRA DE ESPÉCIES PrPs CAMUND. PrPs HAMSTER CAMUNDONGO TRANSGÊNICO (EXPRESSA PrP HAMSTER) + ADOECE EM 2 MESES PrPs HAMSTER
7 knock out de PrP DIFERENÇAS DE PrP NAS ESPÉCIES HAMSTER X CAMUNDONGO 16 CODONS / 254 CAMUNDONGO COM GENE DE PrP CAMUNDONGO SEM GENE DE PrP BOVINO X OVINO 7 CODONS BOVINO X HUMANO 30 CODONS + + CAMUNDONGO X HUMANO 28 CODONS PrPs CAMUND. ADOECE NÃO ADOECE? PONTO CRÍTICO * Transmissão Hereditária (Mutação transmitida) * * Infecção Oral Parenteral Iatrogênica Mais comum Transmissão Oral PrP s Resistente suco gástrico, enzimas intestinais, Proteases bacterianas do rúmen Placas de Peyer Nervos Periféricos SNC Chegada ao SNC: Medula Ponte Cortex Proibição de Visceras no Reino Unido
8 Transmissão da EEB Nào há evidencias de transmissão horizontal por contato A transmissão vertical parece ocorrer em baixa frequência 9% mais de casos de EEB em bezerros de mães com EEB dúvida se isso é genético ou real transmissão Oral (visceras com PrPsc) = maiores evidencias POTENCIAL ZOONÓTICO BSE EEB x Creutzfeldt Jacob Disease (CJD) EEB x Creutzfeldt Jacob Disease (CJD) Março de 1996 Comite de Experts de Encefalopatia Espongiforme relata a identificação de 10 casos de uma forma variante de CJD com a doença iniciando entre 1994 e 1995: A forma variante (vcjd) caracterizava-se: * Pacientes muito mais jovens (média CJD= 63 anos / vcjd = 28 anos) * Curso mais longo (CJD= 6 meses vcjd = 13 meses) * Eletroencefalograma da vcjd difere da CJD * Histopatologia vcjd com placas de proteinas prionicas maiores. Moira Bruce / Edingburgh Escócia 1997 Inoculação de camundongos com : *BSE *vcjd *CJD BSE e vcjd * mesmo período de incubação * mesmos sinais clínicos * mesmas lesões cerebrais CJD Padrão distinto BSE x vcjd Reino Unido Camundongos transgênicos expressando PrP bovina: * altamente suscetíveis a EEB * altamente suscetíveis a vcjd * características das doenças indistinguíveis
9 DIAGNÓSTICO HISTOPATOLÓGICO PESQUISA SAF MICROSC. ELETRÔNICO Imunohistoquímica E ELISA WESTERN BLOT Histopatologia? Pesquisa SAF Microscopia Eletrônica Imunohistoquímica ELISA 0,5 g Extração proteases (PrPs é resistente) PrPs Monoclonais disponíveis comercialmente Obs: Mabs contra PrPs artificialmente produzidos em condições experimentais PrPs PrPs Mabs
10 WESTERN BLOT DOENÇA DE BSE AUJESZKY 10. CONTROLE Prot. K (PrPs é resistente) PrPs +...ETC FI VE PE VT Su PAGE W.BLOT DAB Animais doentes Fonte de Prions Alimentos Medicamentos Fômites Carcaças SNC (principalmente) Restrições Alimentação Ruminantes Fômites Uso parenteral de POA Proibir importação POA de países com casos da doença Po PRO PROF. DR. LEONARDO J. RICHTZENHAIN VPS/FMVZ/USP
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