Determinação de Lipídios em Leite Desidratado pelo Butirômetro de Leite
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- Francisco Philippi Amaral
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1 Página 1 de 6 1 Escopo Este método tem por objetivo determinar lipídios em leite desidratado integral ou semidesnatado, modificado ou não, usando o butirômetro de leite. 2 Fundamentos Baseia-se no ataque seletivo da matéria orgânica por meio de ácido sulfúrico, com exceção da gordura que será separada por centrifugação, auxiliada pelo álcool amílico, que modifica a tensão superficial. 3 Reagentes, padrões e materiais 3.1 Reagentes: 1) Solução de ácido sulfúrico (H 2 SO 4 ) densidade de 1,500 a 20ºC: 2) Adicionar 505 ml de ácido sulfúrico p.a. com densidade de 1,840 sobre 575 ml de água, lenta e cuidadosamente, em banho de gelo. Esfriar até temperatura de 20ºC e conferir a densidade com o densímetro. 3) Álcool isoamílico (C 5 H 12 O) densidade de 0,81 a 20ºC Materiais: 1) Bastão de vidro; 2) Béquer de 50 ml; 3) Butirômetro de Gerber para leite com rolhas; 4) Espátula; 5) Papel absorvente; 6) Toalha de algodão; 7) Pipetas graduadas de 5 e 10 ml ou dispensadores.
2 Página 2 de 6 4 Equipamentos 1) Balança analítica; 2) Banho-maria com temperatura de 65±2ºC (necessário se usar centrífuga de Gerber sem aquecimento).; 3) Centrífuga de Gerber ou centrífuga de Gerber com aquecimento; 4) Chapa elétrica; 5) Timer. 5 Precauções analíticas 1) O leite desidratado é higroscópico, sendo recomendado agir rapidamente nas etapas de homogeneização e pesagem. 2) Secar bem a boca do butirômetro com papel absorvente. Usar uma toalha para segurar o butirômetro enquanto estiver fechando o aparelho com a rolha para proteger-se de uma possível quebra do butirômetro. Agitar, invertendo várias vezes o butirômetro, mantendo o dedo polegar sobre a rolha como segurança, pois é possível que a pressão projete a rolha e o conteúdo ácido do butirômetro. Recomenda-se usar avental e óculos de proteção. 3) Se o volume final de 20 ml no butirômetro for insuficiente para fazer a leitura da gordura na escala, adicionar mais álcool isoamílico. 4) A queima total da amostra é necessária e é evidenciada por seu escurecimento até a coloração vinho. 5) A leitura da gordura deve ser feita imediatamente após retirar o aparelho do banho-maria ou da centrífuga com aquecimento. 6) Se após o procedimento do ensaio, a coluna não estiver bem delineada, misturar novamente o conteúdo do aparelho e repetir os procedimentos de centrifugação (e aquecimento se necessário). Caso este tratamento não seja satisfatório, reiniciar o ensaio. 7) Se utilizar centrífuga de Gerber sem aquecimento é necessário colocá-lo com a tampa para baixo no banho-maria e manter o nível da água acima do nível mais alto da coluna de gordura.
3 Página 3 de 6 8) Descartar o conteúdo do butirômetro na garrafa apropriada, etiquetada como Classe de risco 8 Ácido sulfúrico. 6 Procedimentos 1) Para homogeneizar o leite desidratado, agitar a embalagem fechada, abrir e revolver com uma espátula. Manter o produto protegido da umidade durante a homogeneização, evitando ao máximo o contato com o ar. 2) Pesar exatamente cerca de 1 g de amostra homogeneizada em um béquer de 50 ml. 3) Adicionar 10 ml da solução de ácido sulfúrico com densidade de 1,500 a 20ºC. 4) Aquecer em chapa elétrica ou banho-maria, a uma temperatura que promova a queima da amostra evidenciada pelo seu escurecimento. 5) Homogeneizar de tempos em tempos com bastão de vidro. A queima total da mostra é indicada pela coloração vinho. 6) Transferir cuidadosamente para butirômetro, com auxílio de bastão de vidro. 7) Lavar o béquer 2 ou 3 vezes com 3 a 4 ml da solução de ácido sulfúrico para completar 19 ml. 8) Adicionar 1 ml de álcool isoamílico. 9) Enxugar a boca do butirômetro com papel e fechar com rolha apropriada. Agitar, invertendo várias vezes o butirômetro. 10) Centrifugar a 1200 rpm. (a) Se utilizar centrífuga de Gerber com aquecimento, centrifugar por 20 minutos; (b) Se utilizar centrífuga de Gerber sem aquecimento, centrifugar por 15 minutos e transferir para banho-maria a 65 ± 2ºC por 10 minutos; repetir as operações de centrifugação e de aquecimento. 11) Ajustar a posição da coluna de gordura sobre a escala do butirômetro e ler a diferença entre o menisco superior da gordura e a interface gordura/ácido. Ler a fração de gordura na escala do butirômetro imediatamente após de retirá-lo do banho-maria. 12) A fração de gordura deverá ser límpida e clara.
4 Página 4 de 6 7 Resultados 1) Registrar a leitura no formulário Dados brutos da análise de leite desidratado Anexo R POP POA/06 e inserir na planilha eletrônica correspondente ao produto analisado, ou seja, leite desidratado integral ou semidesnatado (anexos J ou L IT POA/04). A planilha eletrônica fará os cálculos de acordo com a fórmula abaixo: Onde: L = leitura no butirômetro; % de LIPÍDIOS = L x 11,33 / m 11,33 = massa em gramas de 11 ml de leite fluido usado nos butirômetros para leite. m = massa da amostra, em gramas. 2) Expressar o resultado final com uma casa decimal. 3) Os teores de gordura permitida, conforme a legislação brasileira, no leite desidratado (em pó) e no leite em pó modificado encontra-se na tabela a seguir: Tabela I Padrões de qualidade do leite em pó - Lipídios. Tipo Gordura % (g/100 g) Leite desidratado (em pó) Leite em pó modificado Integral Maior ou igual a 26,0 Semi-desnatado De 1,5 a 25,9 Desnatado Menor que 1,5 Integral Maior ou igual a 18,0 Semi ou parcialmente desnatado De 1,5 a 17,9 Desnatado Menor que 1, Critérios para repetição do ensaio: a) Valores abaixo dos valores estabelecidos na legislação devem ser confirmados realizandose o ensaio de uma segunda alíquota (duplicata). Fazer a média dos resultados se a diferença entre duplicatas for até:
5 Página 5 de 6-1,0% para leite desidratado (em pó) integral; - 0,5% para leite desidratado (em pó) semi-desnatado, leite em pó modificado integral ou semi-desnatado. b) Quando a diferença entre duplicatas for superior ao determinado acima deve ser realizada mais uma repetição e os três resultados analisados. Fazer uma média dos resultados com a menor diferença. 8 Arquivamento dos registros Não aplicável. Observação: os formulários Dados brutos de análise de leite desidratado do POP POA/06 são arquivados na pasta Dados brutos da análise de leite em pó, água, mel e outros produtos lácteos do ano vigente juntamente com os formulários Anexos J ou L da IT POA/04. 9 Referências BRASIL. Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento. Regulamento Técnico de Identidade e Qualidade do leite UAT (UHT), ln:. Regulamentos Técnicos de Identidade e Qualidade dos Produtos Lácteos. Portaria Nº 146, 07/03/96, Brasília: Ministério da Agricultura, BRASIL. Ministério da Agricultura. Secretaria de Defesa Agropecuária. Métodos Analíticos Físico-Químicos para Controle de Leite e Produtos Lácteos. Instrução Normativa 68, 12/12/06. Lipídios Método E: Butirométrico para leite desidratado e creme de leite pelo butirômetro de leite. Brasília: Ministério da Agricultura, BRASIL. Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento. Regulamento Técnico para Fixação de Identidade e Qualidade de Leite em pó modificado. Instrução Normativa Nº 27, 12/06/07, Brasília: Ministério da Agricultura, MERCK. Reactivos, diagnóstica, productos químicos 1992/93. Darmstadt, p. 10 Anexos Não aplicável.
6 Página 6 de 6 11 Alterações Alterações da versão anterior: Os subitens dos itens 3, 4, 5, 6 e 7 foram numerados para facilitar a localização; Item 4 Equipamentos: inclui a centrifuga de Gerber com aquecimento; Item 5 Precauções analíticas: incluído os subitens 5, 6 e 7. Item 6 Procedimentos: incluído o protocolo para uso da centrífuga de Gerber com aquecimento (subitem 10) e orientação para a leitura do butirômetro (subitem 11). 12 Responsabilidades O Responsável técnico e seu substituto são responsáveis por assegurar que todo o pessoal que utilizar o MET em questão tenha sido treinado e/ou capacitado para sua execução e que este esteja sendo corretamente seguido. Elaboração/Revisão: Aprovação: Verificação: Rita Beatriz Andrade - POA Tiago Charão de Oliveira - POA Beatriz Niederauer Rauber - UGQ Data: 30/03/2012 Data: 05/04/2012 Data: 09/04/2012
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