Experiência com o SwingTwin Sampler em Rotinas Imunohematológicas

Transcrição

1 Micr Typing System Experiência cm SwingTwin Sampler em Rtinas Imunhematlógicas Maria Giselda Aravechia HIAE- Sã Paul Participantes : Marcia R. Dezan Vanessa Oliveira Eduard Felix Jean Fukimt Dra Mariza Mta Dra Lilian Castilh

2 Micr Typing System Aplicaçã : Determinaçã ABO/Rh Fentipagem Rh (C,C w,c,e,e) e Kell Pesquisa de anticrps irregulares Teste da Antiglbulina Direta (TAD) Prvas de cmpatibilidade Fentipagem estendida para s antígens Fy a /Fy b ; Jk a /Jk b ; M/N; S/s; Le a /Le b ; Kp a /Kp b ; P Retipagem de blsas Pesquisa de antígens rars

3 Swing Twim Sampler Descriçã - Pipetadr autmátic (cartões, micrplacas) Micr Typing System - Cnectad a um sistema de interpretaçã de resultads (leitras de aglutinaçã) - Prgrama Maestr Master Sftware (Windws) - Hemácias cnstantemente em suspensã (misturadr magnétic) - Perfrmance : 55 ID-Cartões ABO/Rh (330 testes) pr hra - Capacidade : 9 amstras/ 4 Cartões / micrplaca / reagentes Pssui : - Detecçã de nível de amstras, reagentes e diluentes. - Identificaçã de códig de barras de amstras, reagentes e diluentes, cartões e micrplacas (Lte/ Validade) - Detecçã de micrcáguls durante a aspiraçã - Mnitrament d vlume ds reagentes, sluções

4 Micr Typing System Sax ID Reader Descriçã - Leitra de aglutinaçã e centrifugaçã (4 cartões) - Operações sã mnitradas pel Sftware (ambiente Windws) - Analisa imagem ds micrtubs - Interpretaçã incrreta u insatisfatória, pde-se altera resultad que será validad pel peradr (*) - Resultads armazenads, impresss u transferids para um cmputadr central.

5 Micr Typing System Lyra MP Reader Descriçã - 4 funções : Centrifuga, agita, lê e interpreta - Resultad validad, armazenad, impress e transferid para cmputadr central - Operações mnitradas pel Maestr MasterSftware

6 MATERIAIS E MÉTODOS

7 AMOSTRAS Micr Typing System Rtina de Dadres (n=645) 373 amstras ABO/Rh; Fentipagem Rh e Kell; PAI 7 amstras fentipagem estendida (Fy a /Fy b ; Jk a /Jk b ; S/s; Le a /Le b ; M/N; P) e pesquisa de antígens rars (Kp a /Kp b ; Ge; Di b ) Rtina de Maternidade (n = 37) 57 amstras de RN ABO/Rh(D) e TAD 58 amstras de mães ABO/Rh(D) e PAI Rtina de Pacientes 7 srs Pesquisa de anticrps irregulares 9 srs Prvas de cmpatibilidade Redeterminaçã de tipagem ABO/Rh(D) segments de blsas RhD- ABO/Rh

8 Micr Typing System KITS utilizads para Amstras de Dadres DiaMed MP (A-B-AB-D(VI-)-D(VI)-ctl/A-B) PROTOCOLOS Tipagem ABO e RhD Prva Direta ID-Rh-SubgrupsC w K ID-LISS/Cmbs 50µL Suspensã de hemácias 0,8% em Diluente (Brmelina) Prva reversa 50µL d plama 50 µl das hemácias A e B Fentipagem Rh(C,C w,c,e,e) e Kell 5 µl de suspensã a 5% de hemácias em Diluente Pesquisa de Anticrps irregulares 50µL de hemácia teste I e II 5 µl de plasma

9 Micr Typing System - KITS utilizads para Amstras de Recém-Nascids A-B-AB-D(VI)-ctl-TAD PROTOCOLOS Tipagem ABO e RhD e TAD 50µL Suspensã de hemácias 0,8% em Diluente (LISS) - KITS utilizads para Amstras de Mães DiaMed MP (A-B-AB-D-ctl/A-A-B) ID-Liss/Cmbs

10 FENOTIPAGEM ESTENDIDA Cartões Individuais DiaCln Anti-Le a, -Le b, -P, -Kp a, -Kp b - 0µL de suspensã a 5% em Diluente (Brmelina) Cartões Individuais DiaCln Anti-M, Anti-N - 0µL de suspensã a 5% em Diluente (LISS) Pares de antígens - 50µL de suspensã a 0,8% em Diluente (LISS) Fy a /Fy b e S/s - 50µL ds anti-srs ns micrtubs - 0µL de suspensã a 0,8% em Diluente (Brmelina) Jk a /Jk b Micr Typing System

11 Micr Typing System Pesquisa de Antígens rars Anti-Ge, Anti-Di b e Prvas de cmpatibilidade 50µL de suspensã hemácia 0,8% em Diluente 5 µl de cada anti-sr Incubaçã 5 min a 37 C Centrifugaçã Leitura

12 Dadres (Semi-Autmaçã Diana) e Técnica manual de micrplacas: Tipagem ABO direta e reversa - 30 µl da Suspensã hemácias a 3,0% (Brmelina) 30 µl de cada respectiv anti-srs diluíds - 30µL da Suspensã hemácias A e B a 3,0% 60 µl d sr ds dadres Fentipagem Rh (D,C,E,c,e) e Kell : 30µL da Suspensã hemácias a,5% (Brmelina) 50 µl de cada respectiv anti-srs diluíds PESQUISA DE ANTICORPOS 30 µl da Suspensã de hemácias I e II a 3% 00 µl amstra 37 C - 45 min Lavagens 50 µl de Anti-IgG Micr Typing System

13 Dadres Micr Typing System FENOTIPAGEM (Duffy( Duffy, Kidd,, Ss) 50 µl de suspensã a % em Liss 5 µl d anti-sr n cartã Liss/Cmbs (Grifls). Incubaçã (37 C - 45 min) Pacientes Tipagem ABO/RhD ; TAD Técnica Clássica em tub Pesquisa de anticrps Tub / Micrplaca

14 INTERPRETAÇÃO DOS RESULTADOS

15 Micr Typing System

16 RESULTADOS ENCONTRADOS

17 Fenótips n Amstras de Dadres Fenótips A n 33 R r R r R r A A B A B R R R R R R R R z Ttal = 373 amstras B O R R z R z R z R w r R w R 3 00% cncrdância Fenótips K K- n R w R rr r r r r

18 Micr Typing System Amstras de Dadres PAI (n=367) Reações encntradas Swing Técnica Manual Anticrps detectads PAI PAI 3 3 () Anti-Le a ; () Anti-P PAI (Swing) 0 () Anti-I PAI (Téc Manual) 0 3 () Anti-Le a ; () Autanti-I; () Anti-Le b

19 Ttal = 66 amstras Ttal = 66 Ttal = 66 amstras amstras 00% cncrdância 00% 00% cncrdância cncrdância Amstras de Dadres Fentipagem estendida Amstras de Dadres Fentipagem estendida Fy b Fy a s S Jk b Jk a n Fy b Fy a s S Jk b Jk a n

20 Antígens M N- MN MN- M-N Le(ab ab-) Le(a-b-) Le(a (a-b) P P- Kp(a (a-b) Kp(ab ab) ) Kp(b) Ge Di(b) Resultads Amstras de Dadres Fentipagem estendida e Pesquisa de antígens rars

21 Resultads A RhD A RhD- B RhD B RhD- AB RhD AB RhD- O RhD O RhD- TOTAL N (00%) Amstras de Recém-nascids Resultads TAD- TAD Swing TAD Tub TAD Swing TAD- Tub Ttal n S=00% (Cartã) S=77% (Tub) Micr Typing System Eluat - () Anti-A; A; () Anti-B (5) Anti-A; A; () Anti-B; () Anti-AB AB 0

22 Resultads A RhD A RhD- B RhD B RhD- AB RhD AB RhD- O RhD O RhD- TOTAL N (00%) Amstras de Mães Resultads PAI- PAISwing PAI Tub PAI Swing PAI- Tub Ttal n 5 55 (00%) S=00% (Cartã) S=67% (Tub) Micr Typing System Identificaçã Acs - () Anti-D () Anti-Di a () Anti-D 4

23 n = 7 Swing (Gel) I II Micrplaca I II Ac Micr Typing System 3 4 AntiJk a Anti-C w,-fy b Anti-C,-D Anti-K Amstras de Pacientes 5 Anti-K 6 Anti-K 7 8 Anti-D Anti-C,-D S = 00% (Cartã) 9 0 Anti-D Anti-C,-D S= 90% (micrplaca) Anti-C,-D,-Fy a Anti-E 3 Anti-Jk b 4 Anti-Fy a 5 Anti-C 6 Anti-c 7 Anti-D

24 Amstras de Pacientes Micr Typing System rvas de cmpatibilidade 9 srs de pacientes cm últipls anticrps incluind anticrp de alta freqüência : 5 blsas cmpatíveis 50 blsas incmpatíveis etipagem de segments de blsas Rh(D)- 3 Rh(D)- B Rh(D)- Rh(D)- 4

25 Temp gast para realizaçã ds testes Micr Typing System Testes Ttal de amstras Swing Semiautmaçã/Tubs ABO / Rh / Kell / PAI 39 min 30 min (ABO) 30 min (Rh/K) 0 min (PAI) Fentipagem Estendida (FY/JK/S/s) 5 min 30 min ABO/Rh/TAD 3 min 45 minuts ABO /Rh / PAI 7 min hra

26 Equipament Vantagens Micr Typing System O Sftware Maestr permite impressã, armazenament de resultads e interfaceament ds dads cm cmputadr. É rápid e fácil de manusear. Rastreabilidade cmpleta de testes, amstras, resultads e peradres. Integraçã cm sftware ds equipaments (interface cmum). Identificaçã pr sistema de códig de barras. Permite uma a validaçã da checagem ds resultads. Aceita váris tips de tubs. Permite a cstumizaçã de váris tips de rtinas.

27 Vantagens Reagentes (Kits) utilizads nas rtinas Micr Typing System Micrplacas cm srs pré-dispensads. Utilizaçã da pesquisa de anticrps em cartã, dispensa lavagem e adiçã de antiglbulina humana. Re-utilizaçã de cavidades nã utilizadas (4hras). Cartões e micrplacas que permitem detectar fenótips D parcial. Fentipagens em cartã induz a menr chance de errs.

28 Micr Typing System nts de melhria : Baix vlume ds anti-srs anti-fy a, anti-fy b, anti-s, anti-s Puc temp para a re-utilizaçã das micrplacas e ds artões n equipament uma vez aberts. Permitir a cstumizaçã para utras rtinas, pr exempl a esquisa de antígens rars. Permitir a cntinuidade d teste quand equipament etecta baix nível de um reagente.

29 CONCLUSÃO Micr Typing System Otimiza rtinas e prpicia rastreabilidade. Equipament viável e segur para ser utilizad em rtinas imunhematlógicas. 00% de cncrdância ns resultads das fentipagens quand cmparad cm semi-autmaçã e técnicas manuais. Mais sensível na detecçã de TAD em RN. Mais sensível para detecçã de anticrps clinicamente significantes em pacientes.