Classificação das áreas limpas. Preparo de estéreis (Resolução - RDC nº 17, de 16 de abril de 2010)

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1 Preparo de estéreis (Resolução - RDC nº 17, de 16 de abril de 2010) Considerações gerais A produção de preparações estéreis deve ser realizada em áreas limpas, cuja entrada de pessoal e de materiais deve ser feita através de antecâmaras. As áreas devem ser mantidas dentro de padrões de limpeza apropriados e, devem conter sistemas de ventilação que utilizem filtros de eficiência comprovada. As diversas operações envolvidas no preparo dos materiais (por ex.: recipientes e tampas), no preparo do produto, no envase e na esterilização devem ser realizadas em áreas separadas dentro da área limpa. 1 2 DEFINIÇÕES SEGUNDO A RDC 17/2010: Área limpa: Área com controle ambiental definido em termos de contaminação por partículas viáveis e não viáveis, projetada, construída e utilizada de forma a reduzir a introdução, geração e retenção de contaminantes em seu interior. Antecâmara:Espaço fechado com duas ou mais portas, interposto entre duas ou mais áreas de classes de limpeza distintas, com o objetivo de controlar o fluxo de ar entre ambas, quando precisarem ser adentradas. A antecâmara éprojetada de forma a ser utilizada por pessoas ou materiais. 3 4 Classificação das áreas limpas Classificadas de acordo com as suas condições ambientais: Grau A Grau B Grau C Grau C 5 Grau A: zona de alto risco operacional, por exemplo, envase e conexões assépticas. Normalmente estas operações devem ser realizadas sob fluxo unidirecional. Os sistemas de fluxo unidirecional devem fornecer uma velocidade de ar homogênea de aproximadamente 0.45m/s ± 20% na posição de trabalho; Grau B: em áreas circundantes às de grau A para preparações e envase assépticos; e Graus C e D: áreas limpas onde são realizadas etapas menos críticas na fabricação de produtos estéreis. 6 1

2 7 8 Paramentação Paramentação Grau D: O cabelo e a barba devem ser cobertos. Devem ser usadas vestimentas protetoras e sapatos próprios para a área ou protetores de calçados. Medidas apropriadas devem ser tomadas a fim de evitar qualquer contaminação proveniente das áreas externas. Grau C: O cabelo e a barba devem ser cobertos. Devem ser usadas vestimentas apropriadas, amarradas no pulso e com gola alta. A roupa não pode soltar fibras ou partículas. Além disso, devem ser usados sapatos próprios para a área ou protetores de calçados. Grau B: Deve ser usado capuz que cubra totalmente o cabelo e a barba, a borda inferior do mesmo deve ser colocada para dentro da vestimenta. Deve ser usada máscara de rosto, a fim de evitar que sejam espalhadas gotas de suor. Devem ser usadas luvas esterilizadas, sem talco, além de botas desinfetadas ou esterilizadas. As barras da calça devem ser colocadas para dentro das botas, assim como as mangas colocadas para dentro das luvas. A roupa protetora não deve soltar nenhuma fibra ou partícula e deve reter as partículas liberadas pelo corpo de quem a esteja utilizando Filtração esterilizante do ar FILTRAÇÃO ESTERILIZANTE DO AR 5º Para alcançar os graus B, C e D, o número de trocas de ar deve ser apropriado ao tamanho da sala, aos equipamentos nela existentes e ao número de pessoas que nela trabalhem. 6º O número de trocas totais do ar da área deve ser no mínimo de 20 trocas/hora em uma sala com padrão de fluxo de ar adequado e com filtros de alta eficiência de retenção de partículas apropriados (filtros HEPA - high efficiency particule air). Ar: microrganismos viáveis geralmente não patogênicos patógenos presentes nas proximidades dos humanos bactérias pequenas: 0,5 a 1µm poeiras (10 a 100µm) Gotículas (10µm a 1-2 mm)

3 FILTRAÇÃO ESTERILIZANTE DO AR Procedimento: Pré-filtração: remoção de partículas grandes Filtração: filtros esterilizantes FILTROS ABSOLUTOS OU HEPA FILTROS ABSOLUTOS OU HEPA eficiência em remoção de partículas > ou = a 0,3 µm de 99,97% São feitos de fibra de vidro em placas dobradas em sanfona e mantidas em moldura Teste DOP (dioctilftalato): fumaça apresenta partículas de diâmetro ~ 0,3 µm Operações de fabricação Categorias: I esterilização terminal: os produtos são esterilizados terminalmente II preparação asséptica: parte ou todas as etapas do processo são conduzidas assepticamente 15 I - Produtos Esterilizados Terminalmente Os materiais e a maioria dos produtos devem ser preparados em um ambiente no mínimo grau D para serem alcançadas baixas contagens microbianas e de partículas, adequadas para filtração e esterilização. Quando o produto está sujeito a um alto risco de contaminação microbiana (ex. por ser altamente suscetível a crescimento microbiano, necessita ser mantido por um longo período de tempo antes da esterilização, ou não é processado em recipientes fechados), a preparação deve ser feita em ambiente grau C. O envase dos produtos esterilizados terminalmente deve ser feito em um ambiente, no mínimo, grau C. 16 I - Produtos Esterilizados Terminalmente (Continuação) Quando o produto está sujeito a um risco de contaminação pelo ambiente (ex. processo de envase lento, recipientes com uma grande abertura ou exposição destes por mais de alguns segundos antes do fechamento), o envase deve ser realizado em ambiente grau A, circundado por uma área, no mínimo, grau C. O preparo de outros produtos estéreis, isto é, pomadas, cremes, suspensões e emulsões, assim como os enchimentos dos respectivos recipientes devem ser conduzidos, em geral, em ambiente de grau C, antes da esterilização final. 17 II - Preparação Asséptica Os materiais devem ser manuseados em um ambiente no mínimo grau D após a lavagem. O manuseio de matérias-primas estéreis e materiais, a não ser que sujeitos a esterilização ou filtração esterilizante, deve ser realizado em um ambiente grau A circundado por um ambiente grau B. A preparação de soluções que são esterilizadas por filtração durante o processo deve ser realizada em uma área no mínimo grau C. Se as soluções não forem esterilizadas por filtração, a preparação dos materiais e produtos deve ser feita em um ambiente grau A circundado por um ambiente grau B. 18 3

4 II - Preparação Asséptica O manuseio e envase de produtos preparados assepticamente, assim como o manuseio de equipamentos previamente esterilizados deve ser feito em um ambiente grau A, circundado por um ambiente grau B. A transferência de recipientes parcialmente fechados, tais como os utilizados em liofilização, deve ser realizada em ambiente grau A circundado por ambiente grau B antes de completamente fechados, ou a transferência deve ocorrer em bandejas fechadas, em um ambiente grau B. A preparação e envase de pomadas, cremes, suspensões e emulsões estéreis deve ser feita em ambiente grau A, circundado por ambiente grau B, quando o produto é exposto e não é posteriormente filtrado. Preparação Asséptica: Produtos esterilizados por filtração Preparação Asséptica: Recintos com fluxo laminar de ar Preparação Asséptica: Capelas com fluxo laminar de ar Enchimento de ampolas

5 Esterilização PROCESSOS DE ESTERILIZAÇÃO Objetivo: Destruir ou eliminar microrganismos presentes em um material ou preparação, assegurando que este objetivo tenha se cumprido com altíssimo nível de probabilidade e de que o objeto ou preparação se encontram livres de riscos de infecção Esterilização Estado estéril: probabilidade < 10-6 de se ter uma unidade não estéril (1 unidade não estéril em 1 milhão de unidades) Maior Bioburden (carga microbiana) Maior risco na esterilização e nível de endotoxinas Esterilização Redução de bioburden: Manutenção das condições de higiene do laboratório Desinfecção freqüente de pisos e superfícies Minimização da entrada e saída de pessoas desde o exterior áté o interior das áreas material e vidraria muito limpos Uso de água para injetáveis USP (WFI) matérias-primas pureza microbiológia e condições de armazenamento Uso de dispositivos de fluxo laminar de ar em operações críticas Processos de esterilização: Calor seco Calor úmido Filtração A gás Radiação

6 Esterilização pelo calor Eficácia da esterilização: Tipo de microrganismo resistência ao calor Carga microbiana inicial Duração da esterilização tempo de latência Temperatura Natureza do meio Velocidade de penetração do calor: Volume de recipientes Viscosidade do conteúdo embalagem Esterilização por Calor Úmido Calor é o maior agente de degradação dos componentes da fórmula Autoclaves Pressão Temperatura Tempo Esterilização por Calor Úmido Esterilização por Calor Seco Não indicado: Substâncias sensíveis às condições Óleos e gorduras Preparações oleosas Pós 33 Estufas ou forno de ar quente: Transferência de calor: convecção necessidade de deixar espaços para circulação do ar Temperatura e tempo de exposição: tipo de produto Temperatura: ºC Tempo: 2h Aplicação Materiais que não são esterilizados com eficiência pelo calor úmido Objetos de vidro e instrumentos cirúrgicos (termoestáveis) 34 Esterilização por Calor Seco Condições operacionais: Esterilização e despirogenação: oxidação que chega a ser uma combustão Temperaturas para despirogenização > temperaturas para esterilização Observações: Despirogenização com calor seco resulta também em esterilização Uma esterilização com calor seco efetiva pode ser realizada sem alcançar a despirogenização A esterilização por calor úmido, nas condições normais de operação, não produz despirogenização Esterilização: 160ºC 120 a 180 min 170ºC 90 a 120 min 180ºC 45 a 60 min Despirogenização: 230ºC 60 a 90 min 250ºC 30 a 60 min

7 Esterilização por Calor Seco Túneis de esterilização e despirogenação de embalagem primária (ampola) 37 Esterilização pelo Calor: Validação Validação: demonstrar que o processos alcançou o estado de esterilidade desejado Estudar com termopares dentro da autoclave (± 10 por ciclo): a) a distribuição de calor no aparelho a vácuo e a carga plena b) a penetração do calor nas unidades e principalmente na parte mais desfavorecida c) A reprodutibilidade do procedimento- repetição dos estudos de distribuição e penetração Rotina: verificar se parâmetros estabelecidos estão sendo reproduzidos Registro do ciclo de esterilização acompanha documentação do lote de fabricação 38 Esterilização por Filtração Remoção física de microrganismos Para soluções termolábeis Filtro deve ficar o mais próximo do envase Sujeito a extensa validação Carga microbiana: eficácia Pré-filtro => filtro clarificante => filtro esterilizante Esterilização por Filtração Vantagens: Pequenos volumes rapidez Eliminação completa de materiais particulados da solução Desvantagens: Possibilidade de falha no filtro Grandes volumes - lentidão Esterilização por Filtração: Precauções 1. Todo material de filtração deve ser esterilizado 2. Solução a ser filtrada: mínima carga microbiana acrescentar um bacteriostático 3. Fluxo de filtração deve ser regular evitar sobrepressão e não prolongar o tempo de filtração 4. Assegurar que as propriedades esterilizantes do filtro estão preservadas 5. Filtros rígidos reutilizáveis devem ser controlados periodicamente sua porosidade pode alterar-se Esterilização por Filtração: Precauções 6. O mesmo filtro não deve ser utilizado por mais que um dia de trabalho, a menos que tal uso tenha sido validado. 7. O filtro não deve afetar o produto, removendo seus ingredientes ou acrescentando outras substâncias

8 Filtros de profundidade: Cartuchos Placas Velas filtrantes Retenção por adsorção: retém partículas menores que seus limites Filtros esterilizadores: esterilizáveis Filtros de membrana: Espessuras de 100 a 150µm e porosidade de 0,2µm Retém partículas por triagem associado a adsorção mínima: partículas de tamanho superior aos poros Filtros esterilizadores Eficácia da filtração: filtração de uma suspensão de microrganismos Pseudomonas diminuta (tamanho 0,3 µm) Compatibilidade da solução com filtro Esterilização a gás Esterilização a gás Óxido de etileno Equipamento especializado Exposição: 4 a 16h Mecanismo: agente alquilante Aplicações: Material cirúrgico termolábil PVC, polietileno, certas borrachas, etc. Óxido de etileno - Vantagens: Alto poder de penetração Ativo contra todos os tipos de microrganismos Facilmente obtido e liberado no estado puro Não se polimeriza, nem condensa Eliminação rápida por arejamento Esterilização final embalagem definitiva Esterilização por radiação ionizante Raios ultravioleta (irradiação eletromagnética): - alto poder microbicida - baixo poder de penetração: não atravessa paredes de vidro Aplicação: Esterilização de ambientes e locais estéreis *Uso de óculos protetores Irradiação β e γ: - Não é usada para esterilizar medicamentos reações químicas Aplicações: Materiais médicos-cirurgicos Seringas e agulhas Kit de perfusão Sondas, etc. *Esterilização final Media Fill Atráves de uma simulação da situação mais crítica, validam-se: As instalações (da fabricação até o envase) Os processos O pessoal (operadores e mecânicos)

9 Processos de despirogenização PROCESSOS DE DESPIROGENIZAÇÃO Inativação: processos químicos ou térmicos Remoção: processos físicos Limitações para aplicação em produtos acabados Obtenção de produtos apirogênicos: garantir condições de higiene em todo processo produtivo PREVENÇÃO DA CONTAMINAÇÃO POR PIROGÊNIO Água purificada Matérias-primas Processo ( standing-time, carga microbiana) Equipamentos (limpeza) Embalagem primária (depirogenação) Processos de despirogenização por Inativação a) Hidrólise ácida ou alcalina: HCl 0,05N 30min a 100ºC ou ácido acético glacial 1,0% 2-3h a 100ºC despirogenização de materiais Processos de despirogenização por Inativação b) Oxidação inativação oxidativa - Peróxido de hidrogênio dependente do tempo, ph e concentração Inativa em condições não extremas conc 5% -outros: Hipoclorito Permanganato de potássio diluído Ácido nítrico Processos de despirogenização por Inativação c) Alquilação Anidrido acético e succínico Óxido de etileno d) Processo térmico: calor seco

10 Processos de despirogenização por Remoção a) Lavagem com solvente apirogênico: vidraria, tampas e dispositivos b) Destilação c) Ultrafiltração: soluções de fármacos de baixo PM d) Osmose reversa: despirogenização da água e) Carvão ativo: adsorção de endotoxinas. Aplicação: solução de eletrólitos. Limitação: traços de carvão f) Atração eletrostática: agregado de endotoxinas a ph < 2 carga negativa e membranas de poliamida (carga positiva a ph < 9) g) Atração por membranas hidrófobas: microfiltração. Membranas de polipropileno, polietileno, polifluoreto de vinilideno, politetrafluoretileno 55 10

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