Coleta e remessa de amostras

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1 Isolamento viral- cultivo celular Coleta e remessa de amostras Diagnóstico Tecidos refrigerados Raiva, RS Méd. Vet. José Carlos Ferreira CRMV-RS Laboratório de Virologia Instituto de Pesquisas Veterinárias Desidério Finamor (IPVDF) Fepagro Saúde Animal

2 Introdução Coleta e remessa de amostra para diagnóstico da Raiva Resultados do diagnóstico da Raiva no IPVDF

3 Remessa de amostra CÃES E GATOS Animal com sintomatologia de Raiva (óbito); Animal com sintomatologia nervosa inespecífica (óbito); Casos de agressão (óbito durante a observação); Animais atropelados (óbito); Remessa da cabeça ou encéfalo coletado.

4 Remessa de amostra MORCEGOS Enviar o animal inteiro, de preferência morto. ANIMAIS DE PRODUÇÃO São encaminhados pela Secretaria de Agricultura; Enviar encéfalo coletado.

5 Remessa de amostra para Raiva Enviar a amostra refrigerada! Previsão envio superior 72 horas: congelar Nunca enviar em: Álcool Formol Outro conservante químico Colocar amostra em: Recipiente plástico ou de vidro com tampa rosca Sempre bem vedado.

6 Remessa de amostra para Raiva Tipos de gelos recicláveis

7 Falha na remessa de amostra NÃO ENVIAR GELO SOLTO

8 Falha de remessa de amostra Enviar cabeça envolta em saco plástico apropriado.

9 Remessa de amostra

10 Identificação da remessa de amostra Formulário de encaminhamento da caixa térmica

11

12 Formulários de solicitação de exame da Raiva para ruminantes Formulário Síndrome Neurológica (FORM_SN):Casos Crônicos 1. Animal c/ sinais clínicos de doença nervosa, por mais de 15 dias 2. com doença crônica, caquetizante ou depauperante, por mais de 15 dias 3. em decúbito ou que não se locomove sem ajuda 4. encontrado morto na fazenda ou no transporte Formulários: FORM_IN ou FORM _COM: Casos agudos Animal c/distúrbios nervosos por menos de 15 dias INFORMATIVO CRHE Nº 01//2014

13 INFORMATIIVO CRHE Nº 01//2014

14 Eleição de amostra - Encéfalo Medula, cerebelo e cérebro.

15 Eleição de amostra - fragmentos

16 Diagnóstico da Raiva Observação clínica: suspeita de Raiva; Diagnóstico laboratorial: Imunofluorescência Direta (IFD) Prova biológica IFD Prova biológica

17 Diagnóstico da Raiva Imunofluorescência direta É um método rápido, sensível e específico; Anticorpos anti-vírus da Raiva marcados com fluoresceína (conjugado antirrábico) O antígeno rábico reage com conjugado emite uma luz esverdeada fluorescente. Observado em microscópio

18 Imunofluorescência (IFD) Identificação do antígeno viral Negativo Positivo

19 Preparação das lâminas 1

20 Preparação das lâminas 2

21 Preparação das lâminas 3

22 Preparação das lâminas 4

23 Preparação das lâminas 5

24 Preparação das lâminas 6

25 Leitura das lâminas Microscópio óptico

26 Resultado Raiva 1 Lâmina positiva IFD

27 Resultado Raiva 2 Lâmina positiva IFD Lâmina negativa IFD

28 Resultado Raiva 3 Lâmina positiva IFD

29 Prova biológica Confirmação de amostras negativas em IFD Inoculação intracerebral de camundongos lactentes Observação até 30 dias Confirmação por IFD dos óbitos

30 Retirada de cérebro para confirmação

31 Retirada de cérebro 2

32 Retirada de cérebro 3

33 Preparação da lâmina

34 Resultado Raiva Lâmina positiva IFD

35 Resultados da Raiva no IPVDF Resultados da análise laboratorial Animais silvestres Animais domésticos Animais de produção Resultados são informados para: Secretaria da Saúde e Secretaria de Agricultura Via laudos e relatórios mensais Participa da Rede de Laboratórios para Diagnóstico da Raiva no Brasil.

36 Submissões da Raiva IPVDF 2014 Espécie Total Silvestres 448 Animais de produção 318 Cães/gatos 117 Amostras impróprias 6 Total 889

37 Submissões para Raiva IPVDF 2014 Impróprias 1% Animais de produção 36% N=889 Silvestres 50% Cães/gatos 13%

38 Resultados da Raiva IPVDF 2014 Espécie Positivo Total Percentagem de positivos Silvestres % Animais de produção % Cães/Gatos % Total %

39 Resultados da Raiva IPVDF 2014 Número de casos Negativo Positivo 50 0 Silvestres Animais de produção Cães/Gatos

40 Número de casos Quirópteros positivos para Raiva Tadarida brasiliensis Eptesicus furinalis IPVDF 2014 Artibeus lituratus Desmodus rotundus Espécies analisadas Molossus molossus N=24/390 Não identificado Lape et al., 2015

41 ResultadosRaivaem animaisde produção, IPVDF em 2014 Número de amostras analisadas N=167/318 negativo positivo 0 jan fev mar abr mai jun jul ago set out nov dez Período

42 Desde 1946, o IPVDF trabalha com diagnóstico da Raiva no RS, realizando prestação de serviços e pesquisa científica.

43 Muito obrigado!

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