XXII Congreso de ALAM I Congreso de ASACIM RESÍDUO DE HERBICIDAS EM RAÍZES DE BATATA-DOCE
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1 XXII Congreso de ALAM I Congreso de ASACIM RESÍDUO DE HERBICIDAS EM RAÍZES DE BATATA-DOCE Edson Aparecido dos Santos ; Fabiano Okumura 2 ; Maria Lúcia Ferreira Simeone 2 ; Valter Carvalho de Andrade Jr. 3 ; André Cabral França 3 ; Albertir Aparecido dos Santos 4 ; Aderbal Soares de Sousa Jr. 4 ; José Barbosa dos Santos 3. Pós-doutorando PPGPV/UFVJM, edsonapsant@yahoo.com.br. 2 Pesquisador Embrapa Milho Sorgo, Sete Lagoas, MG, fabiano.okumura@embrapa.br e marialucia.simeone@embrapa.br. 3 Docente PPGPV/UFVJM, valterjr5@gmail.com, cabralfrança@yahoo.com.br e barbosa@pq.cnpq.br. 4 Estudante Agronomia UFVJM. albert.ap.santos@hotmail.com e aderjunior.agro@gmail.com RESUMO Para controle de plantas daninhas na cultura da batata-doce, é provável que a utilização de herbicidas seja promissora, porém, não se sabe se ocorre acúmulo dos produtos nas raízes. Assim, buscou-se com o trabalho avaliar se o cultivo de batata-doce em solo previamente tratado com os herbicidas clomazone, linuron e metribuzin provocaria o acúmulo de herbicidas nas raízes colhidas aos 80 dias após o plantio. Para isso, mudas de três genótipos, contendo 8 gemas, foram plantadas em leiras montadas em campo, em solo previamente tratado com os herbicidas nas dosagens comerciais. Após a colheita, amostras foram coletadas na parte central das raízes e submetidas a sistema de cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massas (LC-MS). Como resultados, o método se mostrou sensível e eficaz e os herbicidas clomazone e metribuzin não foram detectados nas raízes. Por outro lado, foram quantificados resíduosde linuron em todoas as raízes, em concentração média de 0,27 ng g -. Palavras-chave:clomazone,LC-MS, linuron, metribuzin, Ipomoea batatas SUMMARY To weed control in sweet potato, it is likely that the use of herbicides is promising, however, not known if there is an accumulation of products at the roots.this study aimed to evaluatethe accumulation of residues of herbicidesclomazone, linuron e metribuzin in sweet potato roots after cultivation for 80 days in soil pre-treated with the herbicides in commercial dose. The seedlings with eight gems, of three genotypes, were planted in the field in windrows system. After harvest, samples were taken in the center of the roots and submitted to the system liquid chromatography coupled to mass spectrometry(lc-ms). As results, the method was effective and sensitive. The herbicides clomazone and metribuzin were not detected at the roots, however, linuron was quantified in all samples roots, with average residue of 0.27 ng g -. Key-Words: clomazone, LC-MS, linuron, metribuzin, Ipomoea batatas INTRODUÇÃO A cultura da batata-doce (Ipomoea batatas (L) possui origem na américa tropical e atualmente é cultivada em todas as regiões temperadas, subtropicais e tropicais, com destaque para a sua relevância na alimentação humana, uma vez que é a sexta em importância no mundo, com produção anual aproximada de 05 milhões de toneladas[]. Destaca-se também a grande importância social, por ser cultivada por pequenos produtores e apresentar-se como excelente fonte de nutrientes[2]. Em lavouras bem manejadas, as produtividades médiasultrapassam 20 t ha -, porém, na grande maioria das propriedades esses valores são próximos a 8 t ha -, e um dos grandes entraves às altas produtividades é o manejo fitossanitário, principalmente com relação aos
2 cuidados com doenças e plantas daninhas. Essas últimas, podem causar perdas de até 85% [3] e contribuem para aumento do custo de produção [4]. Dessa forma, a utilização do controle químico de plantas daninhas deve ser avaliado quando se objetiva inserir tecnologia de produção à cultura. Principalmente em função das vantagens conseguidas com o controle químico utilizando-se de herbicidas pré-emergentes residuais, que evitam a emergência de plantas daninhas na área até o estabelecimento da cultura [5]. Porém, uma vez que o órgão de interesse é a raíz, a avaliação do residual dos produtos nas mesmas torna-se fundamental antes da indicação de uso. Assim, objetivou-se quantificar o acúmulo de clomazone, linuron e metribuzin em raízes de três genótipos de batata-doce cultivados em área pré-tratada com os herbicidas. MATERIAL E MÉTODOS O ensaio foi realizado em campo experimental da Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri UFVJM, Diamantina, MG, Brasil, com plantio em campo realizado em maio de 204 e colheita em outubro de 204. O experimento foi delineado em esquema de parcelas subdivididas com 3 blocos, onde os herbicidas representavam as parcelas e os três genótipos (UFVJM 23, 27 e 33), as subparcelas. Osolo, classificado como neossolo quartizarênico, foi preparado com aração e gradagem e cada parcela experimental foi composta por 0 mudas homogêneas espaçadas em 0,3 metros em sistemas de leiras. Após preparo da área, a mesma foi irrigada e foram aplicados os herbicidas clomazone, linuron e metribuzin nas dosagens de 720, 675 e 360 g ha - respectivamente, sendo o plantio realizado no dia seguinte. Após seis meses de cultivo, as raízes foram colhidas e das mesmas foi extraído um disco central (aproximadamente 50 g) que seguiu para congelamento (-20 o C). Já em laboratório de Agroquímica do CNPMS (Embrapa Milho e Sorgo/Sete Lagoas, MG, Brasil), as raízes foram submetidas ao sistema cromatográfico Finningan Surveyor com detecção em um espectrômetro de massas de triplo quadrupolo. A coluna cromatográfica utilizada foi da marca ACE C-8, 2, 50 mm, tamanho de partícula de 3 m. As temperaturas da coluna e do amostrador foram respectivamente 30 e 25 C. A fase móvel foi ácido acético 0,% (v/v) e acetonitrila com gradiente da corrida apresentado na Tabela. Tabela. Programação do gradiente (%) da fase móvel em corrida dos analitos clomazone, linuron e metribuzin em análise por espectrometria de massas em raízes de batata-doce. Sete Lagoas, MG, Brasil. Tempo (minutos) Ácido acétivo Acetonitrila Na Espectrometria de massas, foi realizada infusão direta no espectrômetro de uma solução padrão de 5 g ml - em metanol. Os herbicidas foram ionizados no modo positivo e fragmentados individualmente. Os três fragmentos mais intensos e estáveis foram selecionados para o desenvolvimento de metodologia para quantificação de traços nas amostras das raízes. Que, foram trituradas e,0 g foi transferido para um tubo onde foram adicionados 0 ml de acetato de etila. O tubo foi fechado e agitado em vortex por 0 segundos. Em seguida, foram adicionados 5,0 g de sulfato de sódio anidro novamente agitado. Após, seguiu-se à centrifugação a rpm por 5 minutos. A fase líquida foi filtrada (0,45 m). O acetato de etila foi evaporado até a secura em rotaevaporador e em seguida o extrato seco foi dissolvido em 500 L de metanol. A amostra foi submetida à extração em cartucho Lichrolut RP-8, que foi condicionado com metanol e depois com solução de ácido acético (ph 4,0). A amostra foi aplicada no cartucho em vazão de uma gota por segundo. Em 2
3 seguida foi lavada com solução de ácido acético e seca por 0 minutos. Procedeu-se à eluição com 4,0 ml de acetonitrila. Finalmente, utilizando-se fluxo de nitrogênio houve a secagem e ressuspensão em metanol e 0 L foram injetados no sistema de cromatografia de massas (LC-MS). Para os testes de recuperação, em amostras de batata-doce coletadas nas parcelas onde não haviam herbicidas foram utilizados três níveis (Tabela 2) e para análise dos dados utilizouse análise de variância e comparação das médias portukey, com 5% de Probabilidade. Tabela 2. Níveis de recuperação de analitos após fortificação de amostras de raízes de batata-doce com três níveis e análise por LC-MS. Sete Lagoas, MG. Nível de fortificação Recuperação (%) ( g/g) clomazone linuron metribuzin 0,5 88,27 97,23 04,44,0 06,22 6,35 5,42 2,0 90,78 7,03 98,25 Os níveis 2 e 3 foram considerados como não satisfatórios. RESULTADOS E DISCUSSÃO O método por cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massas se mostrou satisfatório para os analitos, já que apresentou linearidade, uma vez que os valores de coeficiente de correlação foram maiores que 0,99, sugerindo sensibilidade. Os parâmetros e resultados são apresentados na Tabela 3 e na Figura. Tabela 3. Parâmetros relacionados à análise, detecção e quantificação, por cromatografia líquita acoplada à espectrometria de massas em raízes de três acessos de batata-doce para detecção de herbicidas. Sete Lagoas, MG, Brasil. ( não detectado). Herbicida Limites (ng g - ) Resíduos quantificados (ng g - ) Detecção Quantificação UFVJM 2 UFVJM 27 UFVJM 3 Clomazone 3,6,93 Nd nd nd Linuron 0,07 0,2 0,227 b 0,327 a 0,260 b Metribuzin,40 4,62 nd nd nd Médias seguindas por mesma letra não diferente entre si pelo teste de Tukey a 5% de Probabilidade RT: NL:.34E6 NL: TIC.34E6 F: + c ESI SRM TIC ms2 F: c ESI SRM ms ] MS ] Amostra_L7 MS Amostra_L7 NL:.34E6 ms ] M Amostra_L Figura Cromatograma gerado 6.58 por sistema LC-MS 9.9 após injeção de 3.25 amostras de raízes de batatadoce (acesso UFVJM 27) cultivadas 00 por 80 dias em solo tratado com o herbicida linuron. TIC F: Sete ESI SRM Lagoas, MG, 90Brasil. 80 Os herbicidas clomazone e metribuzin não foram detectados nas amostras de raízes, por ] outro lado, o linuron foi quantificado em valores médios iguais a 0,27 ng g MS ] de raiz, além MS ms2 TIC ms2 F: c ESI SRM ms ] MS ms ] M NL: 6.47E5
4 disso, entre os três acessos avaliados quanto à contaminação de resíduos, aquele denominado UFVJM 27 acumulou mais moléculas do linuron em relação a UFVJM 2 e UFVJM 3 (Tabela 3). Considerando o volume de solo de cada leira em 0,4 m 3 e admitindo-se que a translocação do linuron do solo permaneça apenas na área preparada, em função da dose aplicada (675 g ha - ) estima-se que cada leira continha cerca de 0,2025 gramas do herbicida, o que seriam 506 ng L - de solo. Porém, sabe-se que a perda de herbicida no solo, pode chegar a 90% [5], fato que contribuiria com uma menor concentração de herbicidas na região de crescimento das raízes. Nesse sentido, observa-se que as raízes de batata-doce, ao absorverem o linuron no solo, o acumularam e o mantiveram em sua forma original. O herbicida é preferencialmente absorvido pelas raízes e tem a meia vida no solo entre dois e cinco meses [5]. Além disso, algumas culturas o toleram no solo evitando a absorção, cita-se como exemplo o milho. Adicionalmente, mesmo absorvido em grandes quantidades, há acúmulo do mesmo (principalmente nas raízes) em plantas de soja, tomate ou pastinaca, em sítios protegidos [6]. O amido é o principal constituinte em raízes de batata-doce, que apresentam concentração média próxima a 20%, no entando, alguns materiais apresentam até 48% desse carboidrato [2], que tem como função principal a reserva de energia, porém, também tem relação com o geotropismo vegetal e está diretamente envolvido na tolerância de espécies vegetais a herbicidas[7]. Esses autores destacam que a concentração do herbicida glyphosate aplicado sobre plantas de Commelina diffusa aumenta nos grãos de amido, que a espécie possui nos entre-nós, de forma proporcional ao número de dias após a intoxicação. Vale destacar que, com vistas ao comércio de alimentos entre países e à proteção à saúde, a Organização Mundial da Saúde [8] define limites máximos de ingestão dos produtos quando presentes em alimentos. Tais limites são ancorados em diversos testes toxicológicos, com participação de mais de 60 países por meio do Codex Alimentarius. De forma semelhante, no Brasil, por meio da Agência Nacional de Vigilância Sanitária [9], há o monitoramento de resíduos de produtos fitossaitários em alimentos de origem agropecuária. Destaca-se que o linuron, registrado para as culturas de milho, cenoura e mandioca, possui limite máximo para essas culturas iguais a 0,3; 0,3 e,0 mg kg - respectivamente. Valores muito menores em relação à quantificação apresentada no trabalho. CONCLUSÕES O método proposto se mostrou preciso. Por meio das análises, verificou-se acúmulo do herbicida linuron nos três acessos (UFVJM 23, 27, 33), em valores médios de 0,27 ng g -. Porém, os herbicidas clomazone e metribuzin não foram detectados nas raízes. AGRADECIMENTOS Os aturores são gratos à FAPEMIG e à CAPES pelo apoio financeiro para realização do trabalho e publicação dos resultados. REFERÊNCIAS []. CIP (203). Facts and figures about sweetpotato.disponível em: Acessadoem 29 de março de 205. [2]. Advances in Food and Nutrition Research (2007), 52 (), pp.-59. [3]. Weed Technology (2003) 7 (2), pp [4]. Weed control in sweetpotatoes. New Zealand Institute for Crop & Food Research.Disponível em: Acesso em: 2/04/205 [5].Herbicide Handbook, 8th ed. Weed Science Society of America: Lawr., KS, 2002, 430 p. [6]. Pesquisa Agropecuária Brasileira (990) 25 (6) pp [7].Planta Daninha (2004) 22 () pp
5 [8]. WHO (203). International Food Standards/Codex Alimentarius Commission.Disponível em: Acesso em 7/03/205. [9].ANVISA (205). Programa de Análise de Resíduos de Agrotóxicos. Disponível em: Acesso em: 22 de março de
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