42º Congresso Bras. de Medicina Veterinária e 1º Congresso Sul-Brasileiro da ANCLIVEPA - 31/10 a 02/11 de Curitiba - PR

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1 1 MARCELA BENEVENTE [1], LUCIANA MOURA CAMPOS PARDINI [2], ADRIANA CAMARGO FERRASI [1,3], MARIA INES DE MOURA CAMPOS PARDINI [3], ALINE FARIA GALVANI [3], JOSE JOAQUIM TITTON RANZANI [2] 1. Instituto de Ciências da Saúde, Universidade Paulista - UNIP, Campus Bauru 2. Departamento de Cirurgia e Anestesiologia Veterinária, Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade Estadual Paulista - UNESP, Campus Botucatu 3. Hemocentro de Botucatu, Laboratório de Biologia Molecular, Faculdade de Medicina, Universidade Estadual Paulista - UNESP, Campus Botucatu ANÁLISE DA EXPRESSÃO DE CDH1 EM CARCINOMAS MAMÁRIOS RESUMO: A incidência de câncer em cães vem aumentando consideravelmente nos últimos anos, tornando essa espécie a mais acometida por esta doença do que qualquer outra. Destes, pelo menos a metade é maligna e em sua maioria, irão metastatizar, tendo como principal fator predisponente a influência hormonal. A identificação de marcadores moleculares tumorais clinicamente relevantes pode auxiliar na determinação do tratamento e prognóstico da doença. A E-caderina, uma proteína de adesão transmembranosa codificada pelo gene Cdh1, parece ser uma das mais confiáveis indicadoras de prognóstico nas neoplasias mamárias. Vários mecanismos que levam a alterações estruturais no gene 1035

2 2 Cdh1 e baixa expressão ou inativação de E-caderina podem estar presentes. Em humanos, mutações podem ocorrer ao longo do gene Cdh1 mas, principalmente mecanismos epigenéticos, como a metilação, por exemplo, pode causar baixa expressão dessa proteína, o que pode facilitar a disseminação das células tumorais. Considerando a elevada incidência de metástase de câncer de mama em cadelas e a escassez de informações a respeito do nível de expressão de Cdh1, os objetivos do presente estudo foram analisar o nível de expressão do gene Cdh1 em amostras de tecido tumoral de cães fêmeas acometidos por carcinoma mamário. Palavras-chave: Cadelas, Carcinoma mamário, Metástase ocular, Expressão, E-caderina. ANALYSIS OF EXPRESSION IN CDH1 CARCINOMAS BREAST ABSTRACT: The incidence of cancer in dogs has increased considerably in recent years, making this species the most affected by this disease than any other. Of these, at least half are malignant and mostly will metastasize, the main predisposing factor to hormonal influence. The identification of tumor clinically relevant molecular markers can aid in determining treatment and prognosis of disease. The E-cadherin, one transmembrane adhesion protein encoded by the gene Cdh1, seems to be one of the most reliable indicator of prognosis in breast tumors. Several mechanisms leading to changes in the structural gene and Cdh1 low expression or inactivation of E-cadherin may be present. In humans, mutations can occur over Cdh1 gene but mainly epigenetic mechanisms, such as methylation, for example, 1036

3 3 can cause low expression of this protein, which might facilitate dissemination of tumor cells. Considering the high incidence of breast cancer metastasis in dogs and scarcity information about the level of Cdh1 expression, the objectives of this study were to analyze the expression level of Cdh1 gene in tumor tissue samples of affected female dogs for breast carcinoma. Keywords: Dogs, breast carcinoma, ocular metastasis, Expression, E- cadherin. 1. INTRODUÇÃO A incidência de câncer em cães vem aumentando consideravelmente nos últimos anos, tornando essa espécie a mais acometida por esta doença do que qualquer outra (Withrow e Vail, 2007). Os tumores mamários caninos (TMCs), depois dos cutâneos, são as neoplasias mais frequentes em fêmeas caninas (Wang et al., 2009; Zhang et al., 2009) e representam aproximadamente 52% de todas as neoplasias femininas (Rutteman et al., 2001). Destes, pelo menos a metade é maligna e em sua maioria, irão metastatizar, tendo como principal fator predisponente a influência hormonal (Cassali et al., 2000; Bell et al., 2002). A identificação de marcadores moleculares tumorais clinicamente relevantes pode auxiliar na determinação do tratamento e prognóstico da doença. A E-caderina, uma proteína de adesão transmembranosa codificada pelo gene Cdh1, parece ser uma das mais confiáveis indicadoras de prognóstico nas neoplasias mamárias 1037

4 4 2. MATERIAIS E MÉTODOS Para o presente estudo, foram utilizadas 24 cadelas não castradas, com idade superior a seis anos e com até 20 kg de peso corporal, com diagnóstico prévio de carcinoma mamário por exame citopatológico, Os métodos utilizado foram, nesta ordem: mastectomia radical unilateral, análise do padrão de expressão do gene Cdh1 por PCR com detecção em tempo real (qpcr). A expressão relativa (RQ) foi calculada pela razão entre expressão do tecido tumoral pela expressão do tecido normal no mesmo animal: 3. RESULTADOS O estudo da expressão relativa de Cdh1 entre o tecido tumoral (T) e o normal (N), foi realizado para 24 casos. Os resultados foram individualmente analisados quanto à eficiência da amplificação do gene normalizador β-actina. Das 24 amostras analisadas 2 (8,3%) apresentaram aumento da expressão do Cdh1 nos tumores, quando comparado ao tecido normal. 22 (91,6%) das amostras apresentaram QR abaixo de 1, isto é, o Cdh1 esteve menos expresso no tumor do que no tecido normal. 4. DISCUSSÃO E CONCLUSÕES FINAIS A redução da expressão gênica da E-caderina tem sido relatada como fator importante na ocorrência de metástases em vários tipos de tumores, tanto em cães como em humanos. Os resultados do presente estudo evidenciaram que a redução da expressão gênica estava presente 1038

5 5 em 91,6% das amostras, corroborando para a importância desse gene no câncer de mama. A proteína E-caderina é responsável junção celular foram descritas como potenciais marcadores e parecem ser as mais confiáveis indicadoras de prognóstico nas neoplasias mamárias. 5. COMITÊ DE ÉTICA O presente projeto foi aprovado pela Comissão de Ética no Uso de Animais, da Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia UNESP Botucatu, sob protocolo nº 49/2011 CEUA 6. REFERÊNCIAS RUTTEMAN, G.R.; WITHROW, S.J.; MACEWEN, E.G. Tumors of the mammary gland. In: WITHROW, S.J.; MACEWEN, E.G. Small Animal Clinical Oncology. 3.ed. Philadelphia: Saunders Elsevier, p , WITHROW, S.J.; VAIL, D.M. Tumors of the skin and subcutaneous tissues. In: WITHROW, S.J.; MACEWEN, E.G. Small animal clinical oncology. 4.ed. Philadelphia: Saunders Elsevier, p , CASSALI GD. Estudo morfológico, imuno-histoquímico e citométrico de tumores mamários da cadela Aspectos comparativos com neoplasias da mama humana Tese (Doutorado em Ciência Animal) - Escola de Veterinária Universidade Federal de Minas Gerais, Minas Gerais. 1039

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