O papel do ar ambiente e da água de consumo hospitalar como vectores de transmissão nosocomial de fungos do género Aspergillus
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- Vítor Castro Pinheiro
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1 Fundação Calouste Gulbenkian projecto nº O papel do ar ambiente e da água de consumo hospitalar como vectores de transmissão nosocomial de fungos do género Aspergillus ÁREA PROGRAMÁTICA Projectos inovadores de investigação aplicada ou projectos de desenvolvimento, designadamente na melhoria das condições ambientais propícias à saúde, quer no controlo da qualidade da água, quer na do ar.
2 Aspergillus Fungos ubíquos Fácil dispersão ambiental por conídios (esporos) Infecções sistémicas/invasivas em doentes imunocomprometidos A.fumigatus - 90 % dos casos aspergilose invasiva - mortalidade de 65 a 90%
3 OBJECTIVOS Avaliação da colonização ambiental e da transmissão nosocomial de fungos do género Aspergillus, principalmente em doentes críticos, internados em unidades de cuidados intensivos. Conhecimento da epidemiologia de isolados ambientais, dos isolados clínicos e das vias de transmissão, nomeadamente ar ambiental e água canalizada de consumo hospitalar. Estudo da resistência e estabelecimento de padrões de susceptibilidade aos antifúngicos em isolados ambientais e clínicos.
4 Estudos ambientais - Hospital S. João, Porto Estudo I Bloco Operatório Central (3 salas) Honey Jar 12 meses (3 períodos de avaliação a cada 4 meses) Estudo II 18 unidades clínicas: blocos operatórios, unidades de cuidados intensivos, unidades de doenças infecciosas, unidade de hematooncologia, unidades de doentes neutropénicos, neurocirurgia, cirurgia torácica, nefrologia Impactor Andersen e Honey Jar 12 meses (4 períodos de avaliação a cada 3 meses)
5 Impactor de Andersen Honey Jar
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7 O método honey jar detectou diferenças significativas entre a primeira e segunda fases de avaliação da qualidade do ar no bloco operatório do Hospital S. João, que coincidiu com a mudança de todos os filtros de ar e limpeza das condutas de ar condicionado; A técnica de sedimentação honey jar representa uma alternativa válida, prática e de custo muito acessível para avaliação da qualidade do ar; A presença de sistemas de filtração HEPA com pressão positiva, a existência de antecâmara de acesso aos quartos de internamento e o uso de roupas de protecção associaram-se com os mais baixos níveis de fungos no ar; Penicillium permitiu a melhor distinção entre as categorias de qualidade do ar, com base nas concentrações de esporos fúngicos presentes no ar.
8 2nd Trends in Medical Mycology, Berlim, Alemanha, Outubro 2005 Surveillance of waterborne Aspergillus in a Portuguese University Hospital Ricardo Araujo, Cidalia Pina-Vaz, Acacio Gonçalves Rodrigues October 2005
9 A. fumigatus, A. flavus, A. niger e outros fungos filamentosos foram detectados na água hospitalar; Não foram isolados em semanas consecutivas - isolamento esporádico Radiação UV não inviabilizou os esporos fúngicos; Não se encontraram diferenças nas concentrações fúngicas detectadas na água fria e na água quente; Verificou-se redução das concentrações fúngicas na água nos locais com sistemas de filtração terminal.
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11 O aquecimento a 60 ºC por 45 minutos resultou num tratamento fungicida (redução >10 4 conídios/ml) em suspensões de conídios de A. flavus e A. niger, mas não em A. fumigatus; Exposição por curtos períodos de tempo (40 s) a radiação microondas resultou na redução da viabilidade das três espécies de Aspergillus, por lesão de membrana; Verificou-se idêntica susceptibilidade entre todas as espécies de Aspergillus em relação ao sulfato de cobre e ao hipoclorito de sódio; Agentes físicos úteis revelaram-se para o tratamento de água e alimentos; agentes químicos revelaram-se úteis para tratamento de superfícies e utensílios hospitalares.
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13 MICs 4 µg/ml AMB, ITC, VRC e CPF foram raramente detectados; Susceptibilidade natural mais reduzida de A. flavus e A. terreus a AMB; A. niger correspondeu a MICs superiores ao ITC comparando com as outras espécies de Aspergillus; A. fumigatus e A. glaucus foram as espécies mais susceptíveis aos antifúngicos testados;
14 Araujo R et al. Clin Microbiol Infect
15 Método novo e automático para genotipagem de A. fumigatus única corrida electroforética recorrendo a um multiplex com 8 pares de primers ; Poder de discriminação de 0,9997 entre isolados clínicos presumivelmente nãorelacionados; Grande diversidade genética 99,6 % da variação genotípica presente no interior dos diferentes hospitais (3) avaliados; Isolou-se a mesma estirpe fúngica em amostras do mesmo doente com vários anos de intervalo, sugerindo persistência da estirpe; Alguns doentes admitidos na mesma unidade clínica no mesmo período apresentaram a mesma estirpe de A. fumigatus em amostras biológicas, sugerindo colonização durante a hospitalização.
16 RESULTANTES (I) 1 Tese de doutoramento "Genesis of systemic infections by Aspergillus fumigatus - Ricardo Araújo, submetida à Faculdade de Medicina, Universidade do Porto, 2007 (aprovada) 5 Artigos científicos, em revistas internacionais indexadas 2 Comunicações orais, em congressos internacionais 4 Comunicações em forma de poster, em congressos internacionais
17 RESULTANTES (II) validação da técnica de sedimentação honey jar como uma alternativa válida, prática e de custo muito acessível para avaliação da qualidade do ar. aferição do bom funcionamento e/ou a necessidade de implementar ou melhorar sistemas de filtração e tratamento de ar ambiente e água no meio hospitalar em unidades de cuidados médicos diferenciados. implementação da estratégia de controlo ambiental em 2 unidades clínicas - Unidade de Queimados e Unidade de Doentes Neutropénicos do Hospital de S. João. estabelecimento de padrões de susceptibilidade de Aspergillus a antifúngicos, com a finalidade de poderem ser utilizados na prática clínica.
18 PERSPECTIVAS FUTURAS Monitorização contínua da qualidade do ar e água em ambiente hospitalar definição de valores fúngicos de referência para ambientes de acesso restrito, com doentes críticos. Melhor conhecimento dos mecanismos de transmissão e dispersão das bactérias e microorganismos emergentes mais importantes no ambiente hospitalar. Melhor conhecimento do Microbioma em Portugal.
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