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1 Protozoários Sibele Borsuk / sibeleborsuk@gmail.com

2 Classificação Protozoa Helminta Sarcodina Mastigophora Ciliata Sporozoa Trematoda Cestoda Nematoda Artropoda Insecta

3 Protozoários - Protos = antes; zoário = animal - Organismos unicelulares, eucariontes e heterótrofos - ~ espécies são conhecidas - ~ espécies parasitam animais vertebrados ou invertebrados - Tamanho, de 1 a 150µm, apresentam alto índice de reprodução - A classificação dos protozoários se dá pela forma e localização de suas organelas especializadas - Induzem boa resposta imune e também apresentam mecanismos de escape longos períodos de parasitismo.

4 Morfologia Variada - fase do ciclo e meio Formas típicas: trofozoíto, cisto e gametas trofozoíto gametas cisto

5 Morfologia Estrutura básica Membrana celular lipoproteica Citoplasma aspecto mitocôndrias, ribossomas vacúolos reservas alimentares produtos metabólitos Núcleo membrana nuclear, nucleoplasma e cromatina forma, posição tamanho, número

6 Morfologia Organelas Locomoção Relacionadas a: Nutrição Proteção Sustentação

7 Morfologia Organelas de locomoção Flagelos Membrana ondulante Cílios Mionemas Pseudópodes

8 Morfologia Organelas de nutrição Pseudópodes Vacúolos digestivos Citóstoma

9 Morfologia Organelas de sustentação e fixação axóstilo Disco suctorial

10 Biologia- Reprodução Assexuada Fissão binária longitudinal transversal -Esquizogonia-Merogonia meronte (célula mãe) merozoítos (céls. filhas) merogonia (produz merozoítos), gametogonia (produz microgametas) esporogonia (produz esporozoítos).

11 Biologia- Reprodução Sexuada Singamia Gametogonia : Apicomplexa isogametas ou fecundação zigoto heterogametas Conjugação: união temporária de dois indivíduos, com troca mútua de materiais nucleares- Ciliophora

12 Protozoários- Classificação Classes Sarcodina Mastigophora Ciliophara Apicomplexa

13 Protozoários Protozoa Eucarioto Unicelular Sarcomastigophora Locomoção por pseudópodes e/ou flagelos Ciliophora Locomoção por cílios Apicomplexa Deslizamento Ciclo Intracelular reprodução sexuada e assexuada Microspora Reprodução assexuada Sarcodina Movimentos amebóides por pseudópodes Mastigophora Apresenta um ou mais flagelos Coccidia Parasita células epiteliais reprodução sexuada e assexuada Pirosplamidia Parasita células sanguíneas Vetor: carrapato (reprodução sexuada) Haemosporidia Parasita células sanguíneas Vetor: dípteros hematófagos (reprodução sexuada

14 1908 Brasil Splendore, SP coelhos de laboratório 1908 Tunísia Nicolle e Manceaux Ctenodactylus gondii Apicomplexa- T. gondii 1909 Nicolle e Manceaux - Toxoplasma gondii toxon = arco plasma = forma gondii = homenagem ao roedor Década de 70 HD, HI (Dubey) 1981 Toxoplasma x AIDS

15 Toxoplasmose zoonose mais difundida do mundo 25 a 60% da população humana mundial é soropositiva pouca especificidade parasitária (mais de 200 espécies) animais domésticos e silvestres riscos da transmissão congênita caráter oportunista em pacientes imunocomprometidos

16 Toxoplamose Zoonose mais difundida do mundo todas as fases são infectantes pouca especificidade parasitária grande poder de infecção do HD várias vias de infecção

17 Filo Apicomplexa Morfologia Toxoplasma gondii retículo endoplasmático grânulos densos Golgi Filamentos contráteis micronemas conóide mitocôndria roptrias extremidade apical

18 Apicomplexa Morfologia Complexo apical: Anéis polares são dois, permitem a passagem do conteúdo parasitário Conóides definem a extremidade apical e têm motilidade micronemas organelas secretoras, auxiliam na adesão e invasão celular roptrias organelas secretoras, auxiliam na invasão grânulos densos organelas secretoras, necessárias para multiplicação

19 Apicomplexa Morfologia

20 Toxoplasma gondii Oocistos Eliminado pelos felideos

21 Toxoplasma gondii Taquizoitos Fase aguda-móvel de multiplicação rápida

22 Toxoplasma gondii Bradizoitos Fase crônica -brady-lento - Vacúolo parasitoforo TODAS AS FASES SÃO INFECTANTES A TODOS OS HOSPEDEIROS

23 Toxoplasma gondii Hospedeiros

24 Toxoplasma gondii Ciclo Vacúolo parasitóforo

25 Toxoplasma gondii Processo ativo que envolve reconhecimento de receptores conservados de membrana: laminina, integrina, glicosamino glicans, proteoglicans são receptores para MIC2 e molécula P30. Uma vez aderido, o conóide é projetado e os micronemas descarregam seu conteúdo MIC2 e outras proteínas A membrana plasmática da célula hospedeira realiza um movimento de englobamento do parasita a partir do sítio de adesão para formar o vacúolo parasitóforo O conteúdo das roptrias é lançado e suas proteínas incorporam-se aos componentes de membrana do recém criado vacúolo parasitóforo Dentro do vacúolo parasitóforo os grânulos densos despejam seu conteúdo modificando o ambiente do vacúolo parasitóforo, impedindo a acidificação e facilitando a replicação do parasita. Não há fusão de lisossomos.

26 Toxoplasma gondii Ciclo heteroxeno facultativo Sexuada e Assexuada

27 CICLO BIOLÓGICO Toxoplasma gondii infectante por 12 a 18 meses

28 Toxoplasma gondii Fase gestacional Terço inicial Terço médio Terço final Infecção dos fetos 15% 25 55% 65% Consequências Graves, aborto Em 15 a 30%, graves com natimortos ou Tétrade de Sabin Subclínico (leve deficit intelectual, retinoco- roidite bilateral)

29 Toxoplasma gondii Tétrade de Sabin - macro ou microcefalia - retinocoroidites - calcificações cerebrais - retardo mental

30 Toxoplasma gondii Formas de infecção INGESTÃO Oocisto esporulado água saladas cruas frutas contaminação de mãos na terra (jardinagem, hortas) hospedeiros de transporte rações, pastos, grãos

31 Formas de infecção Toxoplasma gondii Bradizoitos INGESTÃO TRANSPLANTES predação carnes cruas ou mal cozidas órgãos transplantados

32 Toxoplasma gondii Formas de infecção INGESTÃO CONTATO TRANSFUSÃO Taquizoítos manipulação de carnes transfusão de sangue predação leite in natura transplacentária

33 Toxoplasma gondii - Controle Evitar a infecção humana com cistos e taquizoítos não ingerir carnes/embutidos crus ou mal cozidos congelar (freezer) as carnes antes do consumo lavar bem as mãos após manusear carnes cruas não provar tempero de carne crua rigorosa higiene dos utensílios de cozinha (água quente) controle rigoroso de doadores de sangue

34 Diretos (parasito) Toxoplasma gondii - Diagnóstico - Oocistos - fezes de gatos - concentração (Sheather) confirmação - inoculação em camundongos - Taquizoítos - líquidos teciduais fase aguda - Cistos teciduais microscopia: histopatologia, imunohistoquímica - PCR - líquido amniótico* - humor vítreo e aquoso - líquido cérebro-espinhal - urina e sangue (generalizada)

35 Toxoplasma gondii - Diagnóstico Exames indiretos (anticorpos) - RIFI - ELISA

36 Toxoplasma gondii - Diagnóstico Exames indiretos (anticorpos) -Títulos crescentes de IgG OU elevados títulos de IgM

37 Toxoplasma gondii -Diagnóstico e Controle

38 Toxoplasma gondii -Diagnóstico e Controle

39 Toxoplasma gondii -Diagnóstico Molecular PCR- gene b1(rrna) Spalding et al.2002./j. Bras. Patol. Med. Lab. 38:

40 Toxoplasma gondii Caracterização Molecular

41 Toxoplasma gondii - Caracterização Molecular

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