DIAGNÓSTICO MOLECULAR DE DOENÇAS RESPIRATÓRIAS EM CAVALOS

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1 1 DIAGNÓSTICO MOLECULAR DE DOENÇAS RESPIRATÓRIAS EM CAVALOS MARIANE ANGÉLICA POMMERENING FINGER 1, FLAVIA DO PRADO AUGUSTO AMARO 2, IVAN ROQUE DE BARROS FILHO 3, CAMILA SCHRODER 2, CHRISTIAN LEUTENEGGER 4, PETERSON TRICHES DORNBUSCH 3 1- Doutoranda Programa de Pós Graduação em Ciências Veterinárias Universidade Federal do Paraná, Curitiba-PR, Brasil 2- Acadêmica de Medicina Veterinária Universidade Federal do Paraná Curitiba-PR, Brasil 3- Docente Departamento de Medicina Veterinária Universidade Federal do Paraná, Curitiba-PR, Brasil 4- Diretor da Real Time Core Facility, Idexx Laboratories, Sacramento Califórnia- EUA Resumo: Identificar os patógenos causadores de doenças respiratórias é fundamental. A reação em cadeia de polimerase (PCR) é citada como método molecular sensível, aplicado no diagnóstico de vários grupos de vírus (Freitas, 2006). Colheu-se BAL de 10 cavalos e realizou-se PCR para oito agentes. Observou-se a ocorrência de EHV tipo 2 em um, tipo 5 em outro e ambos os tipos em um animal. O herpes vírus equino (EHV) pode resultar em doença respiratória. As alterações na avaliação endoscópica, aspirado traqueal (AT) e lavado bronco alveolar (BAL) associadas ao PCR sugerem infecção aguda pro EHV. Palavras-chave: EVH, BAL, PCR 1267

2 2 MOLECULAR DIAGNOSIS OF EQUINE RESPIRATORY DISEASES Abstract: Identify the pathogens that causes respiratory diseases is important. The polymerase chain reaction (PCR) is cited as a sensitive molecular method, used to detect various virus groups (Freitas, 2006). BAL was collected from 10 horses and PCR for respiratory diseases was performed. Occurrence of EHV type 2 in one, EHV type 5 in other and both types in one horse. EHV can result in respiratory disease. The disorders in endoscopic evaluation, tracheal aspirate (AT) and broncho alveolar lavage (BAL) associated with PCR suggest EHV acute infection. Key words: EHV, BAL, PCR As afecções do sistema respiratório são consideradas a segunda causa principal de redução do desempenho em cavalos, ocasionando perdas econômicas significativas e preocupação para a equinocultura. O herpes vírus equino acomete com frequência animais jovens, em especial aqueles na janela de risco entre o desmame e os 02 anos de vida (Allen, 2002), causando uma enfermidade semelhante a influenza, com febre, tosse e fluxo nasal seroso presentes (Thomassian, 2005). Em infecção experimental por herpes vírus tipo 2.Fortier et al. (2013) relatou que o vírus pode ser detectado por PCR em vias respiratórias e que a inflamação das vias aéreas está presente. Foram utilizados 10 cavalos da raça Puro Sangue Inglês (PSI), com 2 anos e meio de idade. Os animais foram sedados com 1mg/Kg de xilazina por via endovenosa e então se realizou endoscopia, aspirado traqueal (AT) e lavado bronco alveolar (BAL). O fluído traqueal foi aspirado por meio de 1268

3 3 sonda de silicone pelo canal de trabalho do endoscópio e depositado em lâminas, fazendo um esfregaço e foram coradas com May Grunwald Giemsa (MGG). A coleta do BAL foi realizada através de técnica descrita por Biava et al As lâminas de BAL foram confeccionadas em cito centrífuga e coradas com MGG e Azul da Prússia. As amostras de BAL foram congeladas até o momento do processamento (painel respiratório equino por PCR). Dentre os antígenos testados no painel respiratório um animal foi positivo para EHV tipo 2, outro animal para EHV tipo 5 e um animal positivo para ambos. O herpes vírus equino acomete com frequência animais jovens, em especial aqueles na janela de risco entre o desmame e os 02 anos de vida (Allen, 2002), causando uma enfermidade semelhante a influenza, com febre, tosse e fluxo nasal seroso presentes (Thomassian, 2005). Relacionando os animais positivos para EHV com os achados endoscópicos e citológicos observou-se que o animal positivo apenas para EHV-2 apresentou exsudato mucopurulento na traquéia, secreção bolsa gutural direita e esquerda, AT com número elevado de neutrófilos e BAL com número elevado de macrófagos. O animal positivo apenas para EHV-5 apresentou exsudato mucopurulento na traquéia, secreção nasal, AT com número elevado de neutrófilos e BAL com número elevado de neutrófilos e febre. Aquele positivo para ambos os tipos apresentou exsudato mucopurulento na traquéia, HPIE (Hemorragia Pulmonar Induzida por Exercício) e BAL com número elevado de neutrófilos e eosinófilos. Esses achados sugerem que os animais estavam com infecção ativa por EHV (não tendo sido apenas expostos) e que existe a presença desses 1269

4 4 sorotipos virais no Brasil. Além disso, sugere que pode haver uma correlação entre infecção viral e HPIE. Agradecimentos: Marko Estrada, da Idexx Laboatories e professores do Departamento de Medicina Veterinária da Universidade Federal do Paraná. Ivan Deconto, João Henrique Perotta e Juliana Sperotto Brum. Referências: ALLEN, G. P.; KYDD, J.H.; SLATER, J.D.; et al. Equid herpesvirus-1 (EHV- 1) and equid herpesvirus-4 (EHV-4) infections. In: COETZER, J.A.W, THOMSON, G.R, Tustin, eds. Infectious diseases of livestock. Capetown: Oxford University Press, 2002 BIAVA, J. S.; GONÇALVES, R. C.; FINGER, M. A.; BIONDO, A. W. Hemorragia Pulmonar Induzida por Exercício (EIPH) em Cavalos Quarto de Milha (QM) em Provas de Laço em Dupla. Anais da VIII Conferência Anual da ABRAVEQ, ERICKSON, H. H.; POOLE, D. C. Exercise-Induced Pulmonary Hemorrhage. In: Equine Respiratory Disease. Ithaca, NY: International Veterinary Information Services. Disponível em: Accessed FORTIER, G.; RICHARD, E.; HUE,E. et al. Long-lasting airway inflammation associated with equid herpesvirus-2 in experimentally challenged horses. The Veterinary Journal. 197(2):492-5, 2013 THOMASSIAN, A. Enfermidades Infecciosas In: Enfermidades dos Cavalos. Ed. Livrarias Varela, 4 ed.,

5 5 FREITAS, T. R. P. Conceitos Básicos, Métodos e Técnicas em Laboratório de Virologia Animal. Pedro Leopoldo - MG: Tavares Grafica e Editora,